本文關鍵詞：基于納米顆粒的分子展示應用于超靈敏檢測

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【摘要】：醫(yī)學檢驗技術在疾病預防與診斷中具有重要作用，而基于納米顆粒的功能性分子展示技術為醫(yī)學檢驗提供強大的技術手段，能夠實現(xiàn)對低豐度檢測指標的檢驗。 目的：以乙型肝炎病毒（HBV）病毒樣納米顆粒和鐵蛋白籠形結構納米顆粒為研究對象，將檢測相關的功能性分子分別展示在這兩種納米顆粒上，構建出可用于超靈敏檢測的功能性納米顆粒復合結構；并將其應用到Ⅰ型人類免疫缺陷病毒（HIV-1）的P24抗原蛋白的分子檢測，實現(xiàn)對其的高靈敏度檢測。 方法：主要采用分子生物學的手段，將能夠與抗體廣譜性結合的金黃色葡萄球菌Protein G（SPG）展示在HBV病毒樣納米顆粒上，構建出具有抗體廣譜性結合能力的HBV病毒樣納米顆粒復合體，并將其應用到HIV-1的P24抗原蛋白酶連免疫吸附分析（ELISA）檢測中，檢驗其相對的檢測靈敏度；將生物素結合肽（BAP）展示在鐵蛋白籠形結構納米顆粒上，并經(jīng)生物素化，構建出具有鏈霉親和素特異性結合能力的鐵蛋白籠形納米顆粒復合體，并將其應用到HIV-1的P24抗原蛋白的ELISA檢測中，檢驗其相對的檢測靈敏度。 結果：成功的構建出具有抗體廣譜性結合能力的HBV病毒樣納米顆粒復合體，并將其應用到HIV-1的P24抗原檢測中，其檢測下限能夠達到1ng/mL，較商業(yè)HIV-1P24ELISA試劑盒檢測下限10ng/mL，檢測靈敏度具有顯著提高；成功的構建出具有鏈霉親和素特異性結合能力的鐵蛋白籠形納米顆粒復合體，，并將其應用到HIV-1的P24抗原檢測中，其檢測下限能夠達到1ng/mL，較商業(yè)HIV-1P24ELISA試劑盒檢測下限10ng/mL，檢測靈敏度具有顯著提高。 結論：研究中成功建立了基于HBV病毒樣納米顆粒及鐵蛋白籠形結構納米顆粒的分子展示技術平臺，并將檢測關聯(lián)性的SPG和生物素分別展示在HBV病毒樣納米顆粒及鐵蛋白籠形結構納米顆粒上，實現(xiàn)了對HIV-1P24抗原的超靈敏檢測，較商業(yè)標準化ELISA檢測靈敏度具有顯著提高。
【關鍵詞】：納米顆粒 分子展示 超靈敏檢測
【學位授予單位】：河南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R3411
【目錄】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-7
• 目錄7-9
• 1 引言9-17
• 1.1 背景介紹9-10
• 1.2 理論依據(jù)10-13
• 1.2.1 HBV 病毒樣納米顆粒10-12
• 1.2.2 鐵蛋白納米顆粒12
• 1.2.3 基于蛋白質的納米顆粒與分子展示12-13
• 1.3 研究目的與內(nèi)容13-15
• 1.3.1 HBV 病毒樣納米顆粒的分子展示應用于檢測的研究內(nèi)容14-15
• 1.3.2 鐵蛋白納米顆粒的分子展示應用檢測的研究內(nèi)容15
• 1.4 預期結果與意義15-17
• 1.4.1 HBV 病毒樣納米顆粒的分子展示應用于檢測的研究意義15-16
• 1.4.2 鐵蛋白納米顆粒的分子展示應用檢測的研究意義16-17
• 2 基于 HBV 病毒樣納米顆粒分子展示的超靈敏檢測17-49
• 2.1 材料與方法18-35
• 2.1.1 實驗材料18-22
• 2.1.2 實驗方法22-35
• 2.2 結果與分析35-49
• 2.2.1 重組質粒的構建35-41
• 2.2.2 HBcAg149的誘導表達、分離純化和 TEM 表征41-43
• 2.2.3 HBcAg149-SPG 的表達、分離純化和 TEM 表征43-46
• 2.2.4 HBcAg149-SPG 應用于超靈敏檢測46-49
• 3 基于鐵蛋白籠型納米顆粒分子展示的超靈敏檢測49-67
• 3.1 材料與方法49-55
• 3.1.1 實驗材料49-50
• 3.1.2 實驗方法50-55
• 3.2 結果與分析55-67
• 3.2.1 重組質粒的構建55-60
• 3.2.2 rHF 的誘導表達、分離純化及 TEM 表征60-61
• 3.2.3 生物素化 rHF 的誘導表達、分離純化及 TEM 表征61-64
• 3.2.4 生物素化 rHF 應用于超靈敏檢測64-67
• 4 結論67-69
• 4.1 HBV 病毒樣納米顆粒的分子展示與超靈敏檢測67-68
• 4.2 鐵蛋白籠形納米顆粒與分子展示68-69
• 參考文獻69-73
• 文獻綜述73-87
• 參考文獻83-87
• 致謝87-88

【共引文獻】

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1 張敬暢,張信芳,曹維良,張?zhí)烨?負載型鐵基復合氧化物催化苯酚羥基化的研究[J];分子催化;2003年01期

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

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本文編號：1104460