本文關(guān)鍵詞：Neuritin對Neuralized與Notch通路配體結(jié)合及Notch途徑下游靶基因的影響

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【摘要】：目的：探討Neuritin對細胞中Neuralized與Notch通路的配體結(jié)合以及對Notch通路的受體及下游靶基因的影響，明確Neuritin通過Neuralized調(diào)節(jié)Notch通路的的機制。 方法： （1）探討Neuritin是否通過對Neuralized的影響調(diào)節(jié)Notch通路配體Jag1：利用免疫熒光、免疫共沉淀以及Western-Blot技術(shù)觀察過表達Neuritin以及在RNA干擾下降低Neuralized后Jag1表達水平的變化； （2）探討不同濃度Neuritin作用下Notch信號通路中Jag1與Neuralized結(jié)合量的變化：利用免疫共沉淀及Western-Blot首先確定各質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的最佳濃度以及Jag1與Neuralized結(jié)合的最佳時間，從而觀察不同濃度Neuritin作用下Notch信號通路中Jag1與Neuralized結(jié)合量的變化； （3）探討Neuritin對細胞中Notch通路受體胞內(nèi)區(qū)（NICD）、下游靶基因HES1蛋白表達水平的影響：利用免疫共沉淀及Western-Blot技術(shù)檢測在Neuritin作用下Notch信號通路受體胞內(nèi)區(qū)（NICD）、下游靶基因HES1蛋白表達水平的變化。 結(jié)果： （4）利用免疫共沉淀以及Western-Blot技術(shù)檢測Neuritin過表達能增加細胞中Jag1表達水平；利用RNA干擾技術(shù)降低Neuralized表達后，，細胞中Jag1的表達水平有明顯升高； （5）濃度梯度增加的Neuritin能使Notch配體Jag1表達呈梯度增加，并使Neuralized（酶）與Jag1（底物）的親和力逐漸降低； （6） Neuritin在降低細胞中Neuralized與Jag1的親和力的同時，降低了Notch受體胞內(nèi)區(qū)，Notch途徑下游靶基因HES1的表達。 結(jié)論： （1）Neuritin對Notch信號途徑配體Jag1的影響是受Neuralized介導的； （2）Neuritin通過影響Neuralized與Jag1的結(jié)合，從而抑制了Neuralized介導的Notch信號途徑配體Jag1蛋白的泛素化及內(nèi)吞； （3）Neuritin能部分下調(diào)Notch信號通路受體NICD及其下游靶基因HES1的表達。
【關(guān)鍵詞】：Neuritin Neuralized Notch信號通路
【學位授予單位】：石河子大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R363
【目錄】：

• 摘要6-7
• Abstract7-8
• 主要符號、縮略語、術(shù)語注釋說明表8-9
• 前言9-11
• 技術(shù)路線11-12
• 材料12-18
• 方法18-29
• 結(jié)果29-43
• 1 Neuritin 對 Notch 信號途徑配體 Jag1 的表達水平的影響29-37
• 1.1 需轉(zhuǎn)染質(zhì)粒測序及鑒定29-33
• 1.2 Neuritin 通過 Neuralized 影響 Notch 信號途徑配體 Jag1 表達水平33-34
• 1.3 Neuralized 表達降低 Neuritin 對 Notch 信號途徑配體 Jag1 的影響34-37
• 2. Neuritin對Neuralized與Jag1結(jié)合的影響37-41
• 2.1 細胞中各質(zhì)粒轉(zhuǎn)染濃度的確定37-38
• 2.1.1 細胞中Jag1轉(zhuǎn)染濃度的確定37
• 2.1.2 細胞中Neuralize轉(zhuǎn)染濃度的確定37-38
• 2.1.3 細胞中Neuritin轉(zhuǎn)染濃度的確定38
• 2.2 Jag1與Neuralized結(jié)合最佳時間點的確定38-39
• 2.3 不同濃度Neuritin 對Neur與Jag1 結(jié)合量的影響39-41
• 3 Neuritin 對 Neuralized 介導的 Notch 信號通路受體和下游靶基因的影響41-43
• 討論43-46
• 結(jié)論46-47
• 參考文獻47-51
• 綜述51-59
• 參考文獻55-59
• 致謝59-60
• 作者簡介60-61
• 導師評閱表61

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 張琦,鄭志z

本文編號：1092207