水通道蛋白4重組質(zhì)粒的構(gòu)建及其在體外對低糖反應(yīng)的觀察
本文關(guān)鍵詞:水通道蛋白4重組質(zhì)粒的構(gòu)建及其在體外對低糖反應(yīng)的觀察
更多相關(guān)文章: 水通道蛋白質(zhì) 綠色熒光蛋白質(zhì)類 轉(zhuǎn)染 細(xì)胞水腫
【摘要】:目的:構(gòu)建大鼠水通道蛋白4(aquaporin4,AQP4)重組質(zhì)粒,檢測融合蛋白在CTX-TNA2星形膠質(zhì)細(xì)胞上的表達(dá),同時觀察低濃度葡萄糖條件下AQP4對細(xì)胞的影響。方法:通過RT-PCR方法從大鼠腦部獲取AQP4基因,插入p EGFP-C2質(zhì)粒中得到p EGFP-C2-AQP4-M23重組質(zhì)粒,同時轉(zhuǎn)染CTX-TNA2細(xì)胞后用不同濃度葡萄糖處理,通過激光共聚焦顯微鏡檢測AQP4在細(xì)胞中的表達(dá)及低糖條件下對細(xì)胞的影響。結(jié)果:PCR和酶切鑒定結(jié)果顯示插入的AQP4基因大小正確,測序結(jié)果證實成功構(gòu)建了p EGFP-C2-AQP4-M23重組質(zhì)粒;在激光共聚焦顯微鏡下觀察到AQP4主要位于CTX-TNA2細(xì)胞膜上;低糖時轉(zhuǎn)染AQP4的星形膠質(zhì)細(xì)胞平均表面積明顯高于對照組。結(jié)論:本研究成功構(gòu)建了AQP4重組質(zhì)粒并在CTX-TNA2細(xì)胞上成功表達(dá),同時證實低糖時AQP4參與了星形膠質(zhì)細(xì)胞水腫的形成。
【作者單位】: 上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】: 水通道蛋白質(zhì) 綠色熒光蛋白質(zhì)類 轉(zhuǎn)染 細(xì)胞水腫
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項目(編號:31271125)
【分類號】:R3411
【正文快照】: 水通道蛋白(aquaporin,AQP)是一類具有高度水通透性的膜通道蛋白,腦組織中主要存在著兩種水通道蛋白:AQP1和AQP4,其中AQP4的含量最為豐富,主要位于大腦星形膠質(zhì)細(xì)胞膜上。腦創(chuàng)傷、代謝紊亂等過程中常繼發(fā)腦水腫,研究[1]發(fā)現(xiàn)AQP4與腦水腫的發(fā)生密切相關(guān)。低血糖是嚴(yán)重臨床相關(guān)
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【相似文獻(xiàn)】
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本文編號:1091446
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