本文關(guān)鍵詞：東亞鉗蝎鈣通道樣毒素的重組表達及活性研究

  更多相關(guān)文章： 東亞鉗蝎 鈣通道毒素 重組表達 細胞內(nèi)鈣離子

【摘要】：目的:原核表達東亞鉗蝎鈣通道樣毒素,分離純化并初步探討其生物學活性。方法:將東亞鉗蝎鈣通道樣毒素Bm Ca基因重組到PET-GST表達載體中,轉(zhuǎn)化入大腸桿菌BL21并IPTG誘導(dǎo)表達,Ni-Super Chelating Resin柱親和層析純化融合蛋白,尿素梯度透析法復(fù)性融合蛋白,采用激光共聚焦顯微鏡觀察其對大鼠骨骼肌細胞內(nèi)鈣濃度的影響。結(jié)果:成功構(gòu)建PET-GST-Bm Ca原核表達質(zhì)粒,誘導(dǎo)后表達分子量約為33 k D的融合蛋白,經(jīng)親和層析得較高純度的融合蛋白,復(fù)性后激光共聚焦掃描顯微鏡檢測顯示表明重組蛋白能可逆性的升高骨骼肌細胞內(nèi)[Ca2+]i。結(jié)論:成功構(gòu)建PET-GST-Bm Ca重組質(zhì)粒,獲得Bm Ca基因工程菌株,并表達純化得到可作用于鈣通道的重組蝎毒素蛋白。
【作者單位】： 廣州醫(yī)科大學藥學院蛇毒研究所;
【關(guān)鍵詞】： 東亞鉗蝎 鈣通道毒素 重組表達 細胞內(nèi)鈣離子
【基金】：廣東省醫(yī)學科研基金(編號:A20009247) 廣州市屬高校科研計劃項目(編號:2012C205) 廣州醫(yī)科大學科研項目(編號:20062R012)
【分類號】：R384.9
【正文快照】： 蝎是地球上最古老的物種之一,為了生存,蝎在體內(nèi)逐漸進化產(chǎn)生多種毒素多肽作為捕食和防御的武器。蝎毒素對多種離子通道具有特異性和高度選擇性,因此成為探討各類相關(guān)靶離子通道的特性及其調(diào)控細胞活動分子機制的有效探針[1-2]。但由于蝎毒成分復(fù)雜,蝎毒素多肽含量少,分離純化

【參考文獻】

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【共引文獻】

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本文編號：1089703