本文關(guān)鍵詞：中華按蚊不同種群溴氰菊酯抗性生測(cè)及機(jī)制初步研究

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【摘要】：瘧疾是一種由瘧原蟲(chóng)引起的潛在致命性疾病,嚴(yán)重影響人類(lèi)身體健康。在我國(guó)大部分地區(qū)的瘧疾得到了有效的控制,但云南省、海南省等地區(qū)仍有疫情發(fā)生。在過(guò)去幾年中,瘧疾疫情有所增長(zhǎng),主要原因：一方面瘧原蟲(chóng)對(duì)最常用治療藥物抗性的增強(qiáng)；另一方面?zhèn)鳢懨浇榘次梅N群對(duì)化學(xué)殺蟲(chóng)劑產(chǎn)生了抗性。溴氰菊酯是目前殺蟲(chóng)劑中活性最高的殺蟲(chóng)劑之一,具有高效、低毒、低殘留、易降解等優(yōu)點(diǎn),廣泛應(yīng)用于媒介蚊蟲(chóng)的控制。近年來(lái),世界各地抗性監(jiān)測(cè)顯示,多種媒介蚊蟲(chóng)對(duì)溴氰菊酯均產(chǎn)生了不同程度的抗性。中華按蚊是我國(guó)按蚊中的優(yōu)勢(shì)蚊種,也是我國(guó)以及東南亞地區(qū)間日瘧的主要傳媒,控制其數(shù)量是防治瘧疾傳播的有效方法。關(guān)于中華按蚊種群對(duì)溴氰菊酯產(chǎn)生抗性已有報(bào)告,但目前仍缺少對(duì)其抗性的系統(tǒng)調(diào)查以及抗性機(jī)制的研究。 本研究以六個(gè)野外中華按蚊種群和本實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)種群為材料,采用WHO藥膜接觸方法進(jìn)行生物抗性檢測(cè)。并對(duì)殺蟲(chóng)劑代謝相關(guān)酶GSTs、P450s活性及殺蟲(chóng)劑靶標(biāo)位點(diǎn)kdr基因突變情況進(jìn)行分析。研究結(jié)果如下： ①抗性生測(cè)結(jié)果 重慶市璧山縣和秀山縣中華按蚊種群校正死亡率分別為32.72%和12.62%；云南省元陽(yáng)縣和勐臘縣校正死亡率分別為29.63%和38.31%;湖北武穴市和湖南省瀏陽(yáng)市校正死亡率分別為15.34%和12.88%；實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)種群校正死亡率為98.95%。結(jié)果表明,六個(gè)檢測(cè)點(diǎn)均為抗性種群,實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)種群為敏感種群。 ②代謝酶活檢測(cè)結(jié)果 勐臘、元陽(yáng)和實(shí)驗(yàn)室種群GSTs酶活沒(méi)有顯著性差異(F=0.297,P0.05),而秀上、璧山、瀏陽(yáng)和武穴檢測(cè)點(diǎn)GSTs活性均顯著高于實(shí)驗(yàn)室種群(F=36.743, P0.001)。結(jié)果顯示,秀山、璧山、瀏陽(yáng)和武穴中華蚊蚊對(duì)溴氰菊酯的抗藥性與GSTs活性的增強(qiáng)有關(guān)。 瀏陽(yáng)、武穴、秀山、璧山和實(shí)驗(yàn)室種群P450s酶活沒(méi)有顯著性差異(F=0.691,P0.05),而勐臘和元陽(yáng)兩個(gè)種群P450活性均顯著高于實(shí)驗(yàn)室敏感種群(F=21.723,O0.001)。勐臘和元陽(yáng)中華蚊對(duì)溴氰菊酯的抗藥性與P450s活性的增強(qiáng)有關(guān)。 ③kdr基因突變分析結(jié)果 序列分析表明,璧山種群中檢測(cè)到一個(gè)kdr基因突變類(lèi)型(TTG→TTT),秀山、武穴市和瀏陽(yáng)檢測(cè)到兩種突變類(lèi)型(TTG→TTT/TTC和TTG→TGT),勐臘、元陽(yáng)和實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)種群中未檢測(cè)到突變。統(tǒng)計(jì)分析顯示,璧山種群突變基因型TTT與抗性性狀間無(wú)關(guān)聯(lián)(x2=0.2,P=0.6547),秀山突變基因型TTT與TGT均與抗性性狀間無(wú)關(guān)聯(lián)(TTT:x2=0.30,P=0.4166；TGT:x2=0.30,P=0.3833)。武穴、瀏陽(yáng)感性蚊蟲(chóng)突變頻率顯著低于抗性蚊(t=7.79,P0.01),該地區(qū)中華按蚊kdr突變與溴氰菊酯抗性有密切的關(guān)系。
【關(guān)鍵詞】：中華按蚊 溴氰菊酯抗性 GSTs P450s kdr基因
【學(xué)位授予單位】：重慶師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類(lèi)號(hào)】：R384.1
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-10
• 1 緒論10-21
• 1.1 研究背景10-11
• 1.2 瘧疾傳播媒介及其控制11-13
• 1.2.1 中國(guó)主要傳瘧媒介按蚊種類(lèi)11-12
• 1.2.2 瘧疾的控制12-13
• 1.3 我國(guó)媒介蚊蟲(chóng)抗性現(xiàn)狀13
• 1.4 昆蟲(chóng)抗性機(jī)理及其研究進(jìn)展13-18
• 1.4.1 代謝抗性15-16
• 1.4.2 靶標(biāo)抗性16-18
• 1.4.3 行為抗性18
• 1.5 蚊蟲(chóng)抗性檢測(cè)技術(shù)18-20
• 1.5.1 抗性生測(cè)方法18-19
• 1.5.2 生化檢測(cè)方法19
• 1.5.3 分子檢測(cè)技術(shù)19-20
• 1.6 本研究目的和意義20-21
• 2 材料與方法21-28
• 2.1 蚊蟲(chóng)采集點(diǎn)21-22
• 2.2 儀器和設(shè)備22-23
• 2.3 所用試劑和試劑盒23-24
• 2.4 蚊蟲(chóng)采集與飼養(yǎng)24
• 2.5 中華按蚊抗性生測(cè)24
• 2.6 代謝酶活檢測(cè)24-26
• 2.6.1 試劑配制24-25
• 2.6.2 實(shí)驗(yàn)蚊蟲(chóng)準(zhǔn)備25
• 2.6.3 GSTs活性檢測(cè)25
• 2.6.4 P450s活性檢測(cè)25-26
• 2.7 kdr基因突變檢測(cè)26-27
• 2.7.1 蚊蟲(chóng)DNA提取26
• 2.7.2 蚊種分子鑒定26
• 2.7.3 kdr片段擴(kuò)增26-27
• 2.8 數(shù)據(jù)處理27-28
• 3 結(jié)果與分析28-38
• 3.1 中華按蚊抗性生測(cè)結(jié)果28-30
• 3.2 代謝酶活檢測(cè)結(jié)果30-32
• 3.2.1 GSTs酶活檢測(cè)結(jié)果30
• 3.2.2 P450酶活檢測(cè)結(jié)果30-32
• 3.3 分子檢測(cè)結(jié)果32-38
• 3.3.1 分子鑒定和Kdr基因的擴(kuò)增32-33
• 3.3.2 突變檢測(cè)結(jié)果及其分析33-35
• 3.3.3 Kdr基因突變與抗性關(guān)系35-38
• 4 討論38-42
• 4.1 中華按蚊抗性生測(cè)時(shí)間、測(cè)試蟲(chóng)態(tài)選擇38
• 4.2 不同種群中華按蚊對(duì)溴氰菊酯抗性水平和影響因素38-39
• 4.3 不同種群代謝酶活的差異分析39-40
• 4.4 不同種群kdr基因突變差異分析40-42
• 5 結(jié)論42-43
• 參考文獻(xiàn)43-48
• 附錄A 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文及科研情況48-49
• 附錄B 生物衛(wèi)生殺蟲(chóng)劑以及農(nóng)藥名單49-50
• 附錄C 縮略詞50-51
• 致謝51-52

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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本文編號(hào)：1081799