本文關(guān)鍵詞：UBM材料上的Laminin蛋白促進負載骨髓間充質(zhì)干細胞增殖和平滑肌分化

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【摘要】：目的探討豬膀胱細胞外基質(zhì)(urinary bladder matrix,UBM)上的Laminin蛋白對大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖和向平滑肌分化的影響。方法采用機械分離法、酶消化法及冷凍干燥法等方法對新鮮豬膀胱進行脫細胞處理,采用蛋白與支架共孵育,制備出UBM+Laminin及UBM+Anti-Laminin復(fù)合支架。采用貼壁法培養(yǎng)BMSCs,流式細胞儀鑒定BMSCs。采用P3代BMSCs,分別接種于UBM+Laminin、UBM及UBM+Anti-Laminin上。采用CCK-8檢測、HE染色觀察及免疫組化鑒定等方法檢測Laminin蛋白對BMSCs增殖、遷移和分化的影響。結(jié)果流式細胞儀鑒定BMSCs CD29陽性表達率為98%,CD31陽性表達率為4.56%,CD34陽性率為3.30%。3種材料均能支持BMSCs生長,且隨共孵育時間的延長,D(450)值逐漸升高,其中UBM+Laminin復(fù)合材料組細胞D(450)最高(P0.01)。HE染色結(jié)果顯示UBM+Laminin組細胞接種第3天形成黏附層,并向深部遷移,第14天可達材料致密層;UBM組第7天僅少許細胞向深層遷移,第14天未達基底層;UBM+Anti-Laminin組僅在支架表層生長。免疫組化檢測顯示UBM+Laminin組、UBM組、UBM+Anti-Laminin組細胞α-SMA表達分別呈陽性、弱陽性和陰性。結(jié)論 UBM材料上Laminin蛋白能促進負載BMSCs增殖、遷移、并有誘導(dǎo)其向平滑肌方向分化的作用。
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院婦產(chǎn)科;第三軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部全軍免疫學(xué)研究所;重慶市婦幼保健醫(yī)院婦產(chǎn)科;
【關(guān)鍵詞】： 脫細胞膀胱 骨髓間充質(zhì)干細胞 Laminin蛋白 細胞增殖 細胞分化
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81270683)~~
【分類號】：R318.08;R329.2
【正文快照】： 醫(yī)學(xué)部全軍免疫學(xué)研究所2;400013重慶,重慶市婦幼保健醫(yī)院婦產(chǎn)科3)壓力性尿失禁(stress urinary incontinence,SUI)的發(fā)病機制主要與尿道內(nèi)平滑肌和橫紋肌的減少有關(guān)。臨床上治療SUI的最佳治療手段是運用組織替代物進行盆底修復(fù)[1],目前用于盆底修復(fù)的組織工程支架包括合成聚

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本文編號：1051490