本文關(guān)鍵詞：自然條件下嗎啡對(duì)大頭金蠅幼蟲的影響

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【摘要】：目的：研究自然條件下大頭金蠅（Chrysomya megacephala）在鹽酸嗎啡（morphine）作用下的生長發(fā)育情況，探索實(shí)驗(yàn)指標(biāo)隨時(shí)間的規(guī)律性變化，積累石家莊地區(qū)尸源性蠅類的法醫(yī)昆蟲毒理學(xué)（forensic toxicologicentomology）資料，從而為死后間隔時(shí)間（Postmortem interval, PMI）的推斷提供參考依據(jù)。 方法：在河北醫(yī)科大學(xué)校園內(nèi)（N38°02′, E114°31′）以瘦豬肉誘捕大頭金蠅，帶回實(shí)驗(yàn)室置于恒溫光照培養(yǎng)箱內(nèi)連續(xù)飼養(yǎng)，以第三代作為母代開始實(shí)驗(yàn)。本實(shí)驗(yàn)共使用家兔4只，隨機(jī)分為對(duì)照組和3個(gè)實(shí)驗(yàn)組。對(duì)照組家兔經(jīng)耳緣靜脈注射生理鹽水1ml/Kg，實(shí)驗(yàn)組家兔經(jīng)耳緣靜脈依次注射0.5倍、1.0倍、2.0倍致死量的嗎啡，給藥30min后將4只家兔處死，處死方法均為重?fù)羝湔聿垦杆僦滤�。取家兔的肌肉組織分別保存，對(duì)照組標(biāo)記為M0，實(shí)驗(yàn)組依照給藥濃度從小到大依次標(biāo)定為M1、M2、M3。在28℃恒溫條件下用新鮮瘦豬肉誘成蠅產(chǎn)卵，產(chǎn)卵時(shí)間記為零時(shí)，將卵塊移至家兔的肌肉組織上飼養(yǎng)。將培養(yǎng)箱放置在外界自然環(huán)境中，選在干燥通風(fēng)的樹蔭處進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。幼蟲孵出12個(gè)小時(shí)后，每隔12小時(shí)留取標(biāo)本一次，每組每次留取10頭幼蟲，直到半數(shù)化蛹；在幼蟲開始化蛹時(shí)留取蠅蛹標(biāo)本，直到半數(shù)羽化。將留取的幼蟲或者蠅蛹用80℃熱水燙死，然后放入濃度為70%的甘油酒精中保存。1體長體重以及蛹長蛹重的測量 從70％的甘油酒精保存液中取出幼蟲標(biāo)本，吸干表面液體，測量體長、體重及蛹長、蛹重并記錄。2幼蟲形態(tài)學(xué)觀察及測定 從保存液中取出幼蟲標(biāo)本，吸干表面液體，放于培養(yǎng)皿上，用大頭針在幼蟲腹部一側(cè)扎幾個(gè)小孔，放入10％的KOH溶液中消化內(nèi)部組織成分，24h之后將幼蟲從KOH溶液中取出，放于培養(yǎng)皿上用鑷子輕壓蟲體，將其體內(nèi)組織排出。幼蟲用清水清洗數(shù)遍，在體式顯微鏡下分離出幼蟲的頭節(jié)至其后2個(gè)胸節(jié)部分(供幼蟲前氣門、頭咽骨標(biāo)本制作)以及第8腹節(jié)之后的部分（供后氣門標(biāo)本制作）備用。 將已分離的幼蟲頭節(jié)至其后2個(gè)胸節(jié)部分以及第8腹節(jié)之后的部分再用清水沖洗兩遍，用濾紙吸干多余水分。然后在體視顯微鏡下將頭咽骨展開平鋪，依次放入30%、40%、50%、60%、70%的酒精中逐級(jí)脫水，每級(jí)15min，再依次在80％、90％、95％、100％的酒精、100％酒精與二甲苯的混合液(比例1:1)逐級(jí)脫水，每級(jí)30min，更換脫水液時(shí)要求用濾紙將前次剩余的液體吸凈，最后放入二甲苯中透明，在載玻片上滴加加拿大樹膠，解剖鏡下將標(biāo)本整姿，用蓋玻片封片，置于陰涼處風(fēng)干。光學(xué)顯微鏡下觀察、拍照。利用計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)對(duì)前氣門和后氣門的平均面積、平均光密度以及頭咽骨的面積、骨化面積和平均光密度等多項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行測定。 各組的各項(xiàng)形態(tài)學(xué)指標(biāo)均采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，各組最大值或最小值間比較應(yīng)用單因素方差分析(one wayANOVA)，分析結(jié)果由Origin75軟件處理得出，以P0.05為顯著性差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，應(yīng)用Adobe Illustrato程序作圖。 結(jié)果：1隨著鹽酸嗎啡濃度的增高，大頭金蠅幼蟲體長體重也出現(xiàn)增大。藥物濃度越高，平均體長、平均體重越大；3齡期后體長及體重不再增加，即進(jìn)入平臺(tái)期；當(dāng)進(jìn)入離食期（指幼蟲不再取食，四處爬動(dòng)，尋找化蛹部位）后體長及體重開始逐漸減輕。平均蛹長、平均蛹重也隨藥物濃度的增大而略有增大，但是變化不大。 2自然條件下，M1、M2、M3組幼蟲的前氣門總面積及其色素管部平均光密度值均隨時(shí)間呈持續(xù)性增長，直至3齡末期后各指標(biāo)趨于平穩(wěn)，而M0組則在整個(gè)幼蟲發(fā)育歷期中始終保持上升趨勢。 3四組幼蟲的后氣門平均面積始終保持增長趨勢，而其平均光密度值則在達(dá)到3齡期后進(jìn)入平緩期。 4頭咽骨形態(tài)學(xué)特征 4.1同一藥物濃度條件下，大頭金蠅幼蟲頭咽骨顏色隨時(shí)間的不斷延長而變化，其顏色由淺棕黃色逐漸加深為黑褐色；骨化程度不斷加強(qiáng)并伴有骨化面積的逐漸增大。 4.2自然條件下，大頭金蠅幼蟲的頭咽骨總面積、骨化面積和平均光密度變化趨勢基本一致，均隨時(shí)間而不斷增大，待其進(jìn)入三齡期后，各指標(biāo)迅速達(dá)到最大值，，隨即進(jìn)入平臺(tái)期并維持到化蛹，即可作為PMI的推測指標(biāo)。 4.3鹽酸嗎啡增大了頭咽骨總面積、頭咽骨骨化面積的最大值，縮短了達(dá)到最大值的時(shí)間，加速了幼蟲的發(fā)育速度。 5本實(shí)驗(yàn)所用大頭金蠅在自然條件下飼養(yǎng)，室外大氣平均溫度為22℃-23℃，可于12天完成生活史，其中，從產(chǎn)卵開始計(jì)時(shí)至半數(shù)幼蟲化蛹?xì)v時(shí)4.5天，從化蛹開始至半數(shù)羽化歷時(shí)7.5天。 結(jié)論：1自然環(huán)境下，嗎啡使大頭金蠅幼蟲最大體長、體重增大；并未改變體長達(dá)到最大值的時(shí)間，體重達(dá)到最大值時(shí)間縮短。 2蛹長、蛹重隨時(shí)間變化不大，在恒定范圍內(nèi)波動(dòng)，蛹重在羽化成蠅過程中略有減輕。藥物濃度越高，蛹長、蛹重越大。 3前氣門的面積及色素管部的平均光密度在幼蟲發(fā)育過程中呈現(xiàn)增高趨勢；后氣門面積及平均光密度也是呈增高趨勢，且濃度越高，數(shù)值越大，達(dá)到最大值所需時(shí)間也越短。 4同一藥物濃度條件下，幼蟲頭咽骨顏色從一齡期的淺棕黃色逐漸加深至三齡期黑褐色，同時(shí)，幾丁質(zhì)化程度逐漸加強(qiáng)，骨化面積逐漸增大。在三齡期開始出現(xiàn)點(diǎn)狀的附口骨。 5幼蟲頭咽骨的面積、平均光密度和骨化面積均隨時(shí)間而逐漸增加，3齡后各指標(biāo)逐漸趨于平穩(wěn)；嗎啡增大了頭咽骨面積、骨化面積的最大值，縮短了達(dá)到最大值的時(shí)間，加速了幼蟲的發(fā)育速度。 6在自然條件下飼養(yǎng)的大頭金蠅發(fā)育歷期要短于室內(nèi)恒溫條件下飼養(yǎng)，尤其是自卵至幼蟲的發(fā)育時(shí)間出現(xiàn)明顯縮短。
【關(guān)鍵詞】：法醫(yī)昆蟲學(xué) 大頭金蠅 鹽酸嗎啡 死后間隔時(shí)間（PMI） 頭咽骨 骨化面積 平均光密度 自然環(huán)境
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R384.2
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• ABSTRACT7-11
• 前言11-12
• 材料與方法12-15
• 結(jié)果15-19
• 附圖19-28
• 附表28-32
• 討論32-36
• 結(jié)論36-37
• 參考文獻(xiàn)37-39
• 綜述 大頭金蠅各個(gè)生活史階段在法醫(yī)昆蟲學(xué)中的意義39-47
• 參考文獻(xiàn)43-47
• 致謝47-48
• 個(gè)人簡歷48

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1038990