本文關(guān)鍵詞：發(fā)育與衰老相關(guān)疾病基因APP,BACE2在非洲爪蛙早期胚胎時(shí)空表達(dá)

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【摘要】：目的：研究發(fā)育與衰老相關(guān)疾病基因APP，BACE2在非洲爪蛙早期胚胎時(shí)空表達(dá) 材料和方法：分子克隆構(gòu)建質(zhì)粒，胚胎原位雜交，RT-PCR定量分析，細(xì)胞培養(yǎng)與轉(zhuǎn)染，蛋白表達(dá)檢測(cè)，胚胎組織切片免疫熒光檢測(cè)。 結(jié)果：成功構(gòu)建爪蛙APP，BACE2質(zhì)�？寺〔⑥D(zhuǎn)染細(xì)胞檢測(cè)表達(dá)通過(guò)原位雜交和免疫熒光檢測(cè)早期胚胎中APP和BACE2的表達(dá)圖示并對(duì)APP進(jìn)行了功能結(jié)構(gòu)域分析，驗(yàn)證了BACE2基因水解Aβ的作用，進(jìn)一步研究了RCAN1基因可能與APP的相互作用。 結(jié)論：我們描述了APP和BACE2基因在爪蟾發(fā)育過(guò)程并比較了其在眼睛和大腦早期的時(shí)空表達(dá)圖式。氨基酸序列的比對(duì)分析顯示具有高度的保守。 RT-PCR分析表明，Xl.bace2和Xl.rcan1轉(zhuǎn)錄可以明顯檢測(cè)到從囊胚階段到原腸胚后期階段，其表達(dá)仍維持在較高水平，直到神經(jīng)胚階段。可以在stage30，40期和45期檢測(cè)到這些基因的高表達(dá)。結(jié)果表明，在發(fā)育過(guò)程中，這些基因表達(dá)的檢測(cè)主要是內(nèi)源性蛋白表達(dá)。與以前的原位雜交和免疫組化數(shù)據(jù)，我們觀察到這些基因的表達(dá)在多種組織和細(xì)胞類型，包括中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)，神經(jīng)視網(wǎng)膜，咽中胚層和內(nèi)胚層和它們的衍生物（顱面結(jié)構(gòu)，，胸腺和氣管），心血管系統(tǒng)（心臟流出道，頸動(dòng)脈，臍船，竇房結(jié)與心房中隔），胃腸道系統(tǒng)（口腔上皮，胃，胰腺，腸系膜）。
【關(guān)鍵詞】：爪蟾 發(fā)育 表達(dá)
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R339.38
【目錄】：

• 英漢縮略語(yǔ)名詞5-6
• 摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 前言10-11
• 1、材料和方法11-24
• 1.1 材料11-13
• 1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物11
• 1.1.2 細(xì)胞11
• 1.1.3 主要試劑11-13
• 1.1.4 儀器13
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法13-24
• 1.2.1 相關(guān)基因質(zhì)粒構(gòu)建13
• 1.2.2 非洲爪蟾胚胎的獲取13-14
• 1.2.3 胚胎 RNA 提取及 RT-PCR 定量分析14-15
• 1.2.4 爪蟾胚胎原位雜交15-18
• 1.2.5 細(xì)胞培養(yǎng)及轉(zhuǎn)染18-20
• 1.2.6 蛋白表達(dá)檢測(cè)（Western blotting）20-23
• 1.2.7 胚胎組織切片免疫熒光染色23-24
• 2、結(jié)果24-33
• 2.1 APP 的克隆和表達(dá)24-26
• 2.2 APP 的表達(dá)圖示及功能結(jié)構(gòu)域分析26-28
• 2.3 BACE2 基因切割 APP 的作用28-30
• 2.4 BACE2 的時(shí)空表達(dá)圖示30-32
• 2.5 RCAN1 基因可能與 APP 的相互作用32-33
• 3、討論與總結(jié)33-34
• 參考文獻(xiàn)34-35
• 文獻(xiàn)綜述35-52
• 參考文獻(xiàn)44-52
• 致謝52-53
• 攻讀碩士學(xué)位期間的研究成果和發(fā)表論文53-54

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 高文明;;淀粉樣前體蛋白研究進(jìn)展[J];濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2010年02期

本文編號(hào)：1030972