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制備GP73多克隆抗體并建立GP73膠乳增強免疫比濁法

發(fā)布時間:2017-10-13 16:35

  本文關鍵詞:制備GP73多克隆抗體并建立GP73膠乳增強免疫比濁法


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【摘要】:目的運用膠乳微球標記抗高爾基體蛋白73(GP73)抗體,并初步建立GP73的膠乳增強免疫比濁法。方法用人工重組GP73蛋白免疫新西蘭兔,制備多克隆抗體,并將純化成功后的抗體蛋白共價偶聯(lián)到膠乳微球上;優(yōu)化偶聯(lián)條件,制備免疫膠乳,建立GP73膠乳增強免疫比濁測定法。結果制備的純化抗GP73多克隆抗體的效價達到16 000,用其致敏的膠乳微球在1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽/N-羥基琥珀酰亞胺磺酸鈉鹽(EDAC/NHS)濃度為10 mg/m L、反應溶液為PBS(p H=6)、室溫反應3 h,偶聯(lián)率最高。所建立的顆粒增強免疫比濁法靈敏度和特異性良好,線性范圍在(6.25~200)ng/m L,檢測下限在10 ng/m L。結論成功純化出GP73多克隆抗體,制備GP73免疫膠乳微球顆粒,建立GP73膠乳增強免疫比濁法。
【作者單位】: 廣州醫(yī)科大學金域檢驗學院;
【關鍵詞】GP抗體 膠乳微球 化學偶聯(lián) 免疫比濁法
【基金】:廣東省科技計劃項目(2013B0218003)
【分類號】:R392
【正文快照】: 我國男性肝癌發(fā)病率和死亡率均居第2位,女性中發(fā)病率和死亡率為第5位。全球每年約有100萬人死于肝癌,其中近一半來自中國[1-2]。大部分肝癌患者初期癥狀并不明顯,臨床發(fā)現(xiàn)時,往往已到中晚期,治療變得相當困難。所以肝癌的早期診斷顯得尤為重要。高爾基體蛋白73(Golgi protein

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