本文關(guān)鍵詞：構(gòu)建牛角膜基質(zhì)細(xì)胞pellet體外三維培養(yǎng)模型的實(shí)驗(yàn)研究

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【摘要】：目的：研究構(gòu)建牛角膜基質(zhì)細(xì)胞體外三維培養(yǎng)模型Pellet中種子細(xì)胞的選擇。 方法：分離原代牛角膜基質(zhì)細(xì)胞,分別選取P0、P1牛角膜基質(zhì)細(xì)胞作為種子細(xì)胞,分為兩組(PO組、P1組)進(jìn)行Pellet模型的構(gòu)建,以含10%FBS (fatal bovine serum)的DMEM培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。對(duì)培養(yǎng)了48h的牛角膜基質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行Calcein AM/PI染色；培養(yǎng)2w大體觀觀察培養(yǎng)模型生長趨勢；培養(yǎng)3w進(jìn)行HE及MASSON染色,觀察細(xì)胞活性及細(xì)胞外基質(zhì)的形成情況。 結(jié)果：PO組Pellet模型構(gòu)建不成功,48h后Calcein AM/PI染色顯示,細(xì)胞活性差,2w后觀察細(xì)胞未見明顯抱團(tuán)生長,震蕩易松散,無法進(jìn)行HE及MASSON染色。P1組Pellet模型構(gòu)建成功,培養(yǎng)2w后大體觀顯示,細(xì)胞明顯抱團(tuán)生長,呈粒狀,震蕩不散開。培養(yǎng)3w后HE染色顯示,細(xì)胞密集生長,細(xì)胞團(tuán)中壞死細(xì)胞極少；MASSON染色顯示可以形成細(xì)胞外基質(zhì)。 結(jié)論：第一代牛角膜基質(zhì)細(xì)胞可以作為種子細(xì)胞成功構(gòu)建Pellet體外三維培養(yǎng)模型。 目的：研究血清在構(gòu)建角膜基質(zhì)細(xì)胞Pellet體外三維培養(yǎng)模型中的影響。 方法：分離原代牛角膜基質(zhì)細(xì)胞,取P1牛角膜基質(zhì)細(xì)胞作為種子細(xì)胞,分為兩組(有血清組、無血清組)進(jìn)行Pellet模型的構(gòu)建,分別以基礎(chǔ)培養(yǎng)液及10%FBS (fatal bovine serum)的培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng),大體觀觀察培養(yǎng)模型生長趨勢；培養(yǎng)3w進(jìn)行HE、MASSON染色及Calcein AM/PI染色,并進(jìn)行透射電子顯微鏡觀察,觀察細(xì)胞活性及細(xì)胞外基質(zhì)的形成排列情況。 結(jié)果：無血清組Pellet模型,3w后觀察細(xì)胞未見明顯抱團(tuán)生長,震蕩易松散,無法進(jìn)行HE及MASSON染色及電鏡觀察。進(jìn)行Calcein AM/PI染色顯示,死細(xì)胞較多。有血清組Pellet模型構(gòu)建成功,培養(yǎng)3w后大體觀顯示,細(xì)胞明顯抱團(tuán)生長,呈粒狀,震蕩不散開。培養(yǎng)3w后HE染色顯示,細(xì)胞密集生長,細(xì)胞團(tuán)中壞死細(xì)胞極少；進(jìn)行Calcein AM/PI染色顯示,活細(xì)胞占極大多數(shù),極少部分死細(xì)胞散在存在,MASSON染色顯示可以形成細(xì)胞外基質(zhì),電鏡觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞外膠原形成并排列緊密。 結(jié)論：含血清的培養(yǎng)環(huán)境能成功構(gòu)建牛角膜基質(zhì)細(xì)胞體外Pellet三維培養(yǎng)模型,且能生成含有膠原纖維的細(xì)胞外基質(zhì)。
【關(guān)鍵詞】：三維培養(yǎng) 角膜基質(zhì)細(xì)胞 種子細(xì)胞 三維培養(yǎng) 角膜基質(zhì)細(xì)胞 胎牛血清
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R329
【目錄】：

• 中英文縮略詞表5-6
• 第一部分 體外三維培養(yǎng)牛角膜基質(zhì)細(xì)胞Pellet模型種子細(xì)胞優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)研究6-24
• 摘要6-7
• ABSTRACT7-9
• 前言9-10
• 材料10-11
• 方法11-15
• 結(jié)果15-19
• 討論19-22
• 結(jié)論22-23
• 參考文獻(xiàn)23-24
• 第二部分 血清在構(gòu)建牛角膜基質(zhì)細(xì)胞Pellet體外三維培養(yǎng)模型中的作用觀察24-48
• 摘要24-25
• ABSTRACT25-27
• 前言27-28
• 材料28-29
• 方法29-33
• 結(jié)果33-41
• 討論41-45
• 結(jié)論45-46
• 參考文獻(xiàn)46-48
• 綜述48-58
• 參考文獻(xiàn)55-58
• 致謝58-59
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文59

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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本文編號(hào)：1023920