大鼠骨骼肌缺血再灌注損傷引起遠隔腎組織中組織間粘附分子-1(ICAM-1)表達的影響及作用機制探討
本文關(guān)鍵詞:大鼠骨骼肌缺血再灌注損傷引起遠隔腎組織中組織間粘附分子-1(ICAM-1)表達的影響及作用機制探討
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【摘要】:目的:1通過觀察大鼠骨骼肌缺血再灌注損傷后骨骼肌組織變化情況探討骨骼肌缺血再灌注損傷的作用機制,為臨床預(yù)防和治療骨骼肌缺血再灌注損傷提供理論依據(jù);2通過觀察大鼠骨骼肌缺血再灌注損傷中遠隔腎臟中組織間粘附分子-1的表達情況,探討骨骼肌缺血再灌注損傷引起遠隔腎損傷的作用機制,并為臨床預(yù)防和治療骨骼肌缺血再灌注損傷腎損傷提供理論依據(jù)。 缺血再灌注(ischemia reperfusion, IR)是臨床工作中經(jīng)常遇到的一種現(xiàn)象。Mccord在1985年就對缺血再灌注的概念進行了較為全面的定義,并得到了廣泛的認同。缺血再灌注損傷在臨床上多發(fā)生于斷肢再植、運動損傷及創(chuàng)傷、骨筋膜間隙綜合征、動脈栓塞取栓后、應(yīng)用止血帶時間過長后等等,是指由于各種原因引起的機體組織或器官低血液灌注甚至無血液灌注一定時間后,血液灌注恢復(fù)的過程。由于組織器官缺血缺氧引起的損傷及血液灌注恢復(fù)后組織器官的功能和結(jié)構(gòu)不但不能得到恢復(fù),反而加重其損傷的現(xiàn)象稱為缺血再灌注損傷。骨骼肌被認為是四肢中對缺血最敏感的組織。而且由于缺血再灌注損傷在發(fā)生缺血再灌注的組織器官可發(fā)生,遠隔的器官也因為氧自由基釋放、中性粒細胞激活以及炎性細胞因子的釋放等機制被被損傷,所以嚴(yán)重的骨骼肌缺血再灌注損傷可致肢體壞死、截肢、其他器官的功能衰竭甚至死亡,因此對骨骼肌缺血再灌注損傷的作用機理、臨床預(yù)防、治療的研究有著深遠的臨床意義。 近年來,對于缺血再灌注損傷作用機制,眾多學(xué)者已做了大量的研究,隨著研究的逐漸深入,氧自由基、鈣超載、無復(fù)流現(xiàn)象及中性粒細胞的作用等逐漸為人們所接受。本實驗期望通過對骨骼肌缺血再灌注損傷引發(fā)的遠隔腎組織中ICAM-1的表達情況的觀察,探討骨骼肌缺血再灌注損傷引發(fā)遠隔腎損傷的相關(guān)作用機制。 方法:選擇健康清潔級成年SD大鼠27只,體重150-200g,隨機分成兩組:①對照組(n=14):常規(guī)麻醉7小時后處死取材;②實驗組(n=13)按照1ml/100g腹腔注射3%戊巴比妥鈉常規(guī)麻醉后,阻斷帶阻斷右后肢血流3小時,松解阻斷再灌注4小時后取材。取骨骼肌組織采用HE染色,石蠟切片后光鏡下觀察組織形態(tài)的改變,取右腎組織,石蠟切片后免疫組織化學(xué)染色,觀察ICAM-1在腎組織的表達情況;陽性細胞采用專業(yè)圖像分析軟件Image-Pro Plus6.0測定平均光密度值。用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS13.0進行數(shù)據(jù)分析。統(tǒng)計學(xué)方法采用t檢驗,檢驗水準(zhǔn)取P<0.05。 結(jié)果: 1骨骼肌組織HE染色結(jié)果:對照組:骨骼肌組織形態(tài)學(xué)正常;實驗組:肌纖維排列紊亂,肌細胞腫脹明顯,細胞間隙明顯增寬,間質(zhì)明顯水腫,間質(zhì)毛細血管擴張充血,,炎性細胞浸潤明顯,部分肌纖維溶解、壞死。 2免疫組織化學(xué)染色結(jié)果:對照組腎組織形態(tài)結(jié)構(gòu)正常,腎小球細胞內(nèi)ICAM-1弱陽性表達,腎小管上皮細胞內(nèi)ICAM-1陽性表達;對照組腎小球及腎小管上皮細胞明顯腫脹,間質(zhì)水腫,可見腎小管上皮細胞部分變性,凋亡,炎性細胞浸潤,腎小球及腎小管上皮細胞內(nèi)ICAM-1強陽性表達。實驗組免疫陽性細胞的平均光密度值為(0.02520.0016),對照組免疫陽性細胞的平均光密度值為(0.015810.0013)。同對照組相比較,實驗組明顯大于對照組平均光密度值,結(jié)果顯示有顯著性差異(P0.05)。 結(jié)論: 1在本實驗所設(shè)定的條件下,原位骨骼肌組織確實發(fā)生了缺血、缺氧及其它病理性改變;2骨骼肌缺血再灌注損傷確實引起了腎臟的損傷;3骨骼肌缺血再灌注后腎組織中ICAM-1表達的增加提示ICAM-1參與了骨骼肌缺血再灌注腎損傷;4本實驗中并未發(fā)現(xiàn)明顯腎小管管型的存在,不排除與骨骼肌缺血時間或再灌注時間較短有關(guān)的可能;5本實驗中可見局部中性粒細胞浸潤及部分細胞內(nèi)細胞核固縮、凋亡,提示中性粒細胞及細胞凋亡在骨骼肌缺血再灌注損傷中發(fā)揮作用;6骨骼肌缺血再灌注腎損傷的具體作用機制仍有待進一步研究。
【關(guān)鍵詞】:大鼠 骨骼肌 缺血再灌注損傷 ICAM-1 腎損傷
【學(xué)位授予單位】:河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號】:R363
【目錄】:
- 摘要4-6
- ABSTRACT6-9
- 前言9
- 材料與方法9-14
- 結(jié)果14-16
- 附圖16-18
- 附表18-19
- 討論19-24
- 結(jié)論24-25
- 參考文獻25-28
- 綜述 骨骼肌缺血再灌注損傷產(chǎn)生機制28-38
- 參考文獻34-38
- 致謝38-39
- 個人簡歷39
【參考文獻】
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本文編號:1019500
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