本文關(guān)鍵詞：吡喹酮新衍生物抗日本血吸蟲生物學(xué)效應(yīng)研究

  更多相關(guān)文章： 日本血吸蟲 PZQ衍生物 鈣通道阻滯劑 細(xì)胞松弛素-D

【摘要】：第一部分吡喹酮(PZQ)衍生物和PZQ消旋體體外抗日本血吸蟲生物學(xué)效應(yīng) 目的：觀察17種DW系列及32種YCH-II-P系列PZQ衍生物和2種PZQ消 旋體對(duì)體外培養(yǎng)的日本血吸蟲成蟲和童蟲活性的影響。 方法：ICR小鼠感染日本血吸蟲尾蚴后第17d及第6w肝門靜脈灌注法分別收集童蟲與成蟲，加入不同濃度的化合物于DMEM培養(yǎng)液中，過夜后(16h)無菌生理鹽水洗滌蟲體3次，換無藥物的新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)蟲體72h,每天置于體視顯微鏡下觀察其死亡率及活力降低情況，收集第72h蟲體作掃描電鏡觀察。 結(jié)果：經(jīng)觀察17種DW系列對(duì)PZQ衍生物日本血吸蟲均有一定的殺蟲效應(yīng)，其中以DW-3-15殺蟲效應(yīng)最強(qiáng)，作用濃度為50μmol L時(shí)蟲體完全死亡，體外抗日本血吸蟲成蟲及童蟲臨界致死濃度分別為15μmol L及10μmol L。32種YCH-II-P系列PZQ衍生物篩選出P96、P125、P126、P64種有效化合物。其中P96作用濃度為50μmol L時(shí)蟲體完全死亡，體外抗日本血吸蟲成蟲及童蟲臨界致死濃度均為25μmol L，掃描電鏡（SEM）顯示蟲體皮層及抱雌溝內(nèi)壁損傷嚴(yán)重。2種PZQ消旋體中R-PZQ作用濃度為100μmol L時(shí)成蟲及童蟲均完全死亡。SEM顯示蟲體皮層及抱雌溝內(nèi)壁僅有輕度損傷。 結(jié)論: DW系列衍生物體外具有一定的殺日本血吸蟲作用，其中以DW-3-15殺蟲效應(yīng)最強(qiáng)。YCH-II-P系列衍生物中P96體外具有顯著的殺日本血吸蟲成蟲和童蟲作用效應(yīng)，兩種PZQ消旋體中R-PZQ具有顯著的殺日本血吸蟲成蟲作用。 第二部分PZQ衍生物P96體內(nèi)抗日本血吸蟲效應(yīng) 目的：觀察PZQ衍生物P96對(duì)感染小鼠體內(nèi)不同發(fā)育階段蟲體殺蟲效應(yīng)及體內(nèi)殺蟲劑量依賴效應(yīng)。 方法：小鼠感染日本血吸蟲尾蚴后，在蟲體發(fā)育的不同階段（1d，3d，7d，14d，21d，28d）以200mg/kg/只的劑量及在感染后第14天以不同劑量經(jīng)灌胃連續(xù)給藥5d，停藥后21d解剖小鼠計(jì)算減蟲率。進(jìn)一步于成蟲期（28d）經(jīng)灌胃連續(xù)給藥5d殺蟲，分別于停藥后第1d，3d，7d取蟲，SEM觀察P96對(duì)體內(nèi)蟲體的損傷作用。 結(jié)果：成蟲期與童蟲期經(jīng)PZQ衍生物P96作用后檢獲蟲數(shù)與對(duì)照組相比，顯著減少（P0.05）。其中成蟲期（28d）P96組減蟲率(53.6%)與PZQ組(67.1%)相近（P0.05），童蟲期（14d）P96組減蟲率（58.2%）顯著高于PZQ組（19.9%，P0.05），尤其在童蟲期1d、3d、7d、14d、21d的減蟲率為43.5%~58.2%，均顯著高于PZQ組（5.9%~45.0%，P0.05）。P96對(duì)體內(nèi)成蟲用藥后1d、3d、7d SEM觀察顯示蟲體皮層及抱雌溝內(nèi)壁嚴(yán)重受損 結(jié)論：PZQ衍生物P96體內(nèi)具有顯著抗日本血吸蟲成蟲與童蟲的作用，其體內(nèi)抗日本血吸蟲成蟲作用與PZQ相仿，體內(nèi)抗日本血吸蟲童蟲作用則明顯優(yōu)于PZQ，并存在明顯的劑量依賴效應(yīng) 第三部分鈣通道阻滯劑與肌動(dòng)蛋白解聚劑對(duì)P96體外抗日本血吸蟲效應(yīng)的影響 目的：通過觀察鈣通道阻滯劑(calcium channel blockers，CCBs)與細(xì)胞松弛素-D(cytochalasin D，CyD)對(duì)P96體外抗日本血吸蟲活性的拮抗作用，探討PZQ衍生物對(duì)血吸蟲的藥物作用靶點(diǎn)及其機(jī)制。 方法：在單性日本血吸蟲尾蚴感染小鼠6w后，將采用肝門靜脈灌注法收集雄性成蟲分別與CCBs及CyD預(yù)孵育lh，然后加入臨界致死濃度的P96與蟲體孵育過夜(16h)，，次日用無菌生理鹽水洗滌蟲體3次，換至新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)蟲體72h，每天置于體視顯微鏡下觀察并記錄蟲體活力，收集第72h蟲體作SEM觀察。 結(jié)果：鈣通道阻滯劑尼非地平和尼群地平及CyD對(duì)P96抗日本血吸蟲的拮抗效應(yīng)均較弱， CCBs或CyD預(yù)孵育對(duì)P96的抗蟲作用基本無影響。 結(jié)論：鈣通道阻滯劑尼非地平和CyD可特異性地抑制肌動(dòng)蛋白與微絲有關(guān)的細(xì)胞骨架，干擾細(xì)胞膜離子通道（如Ca~(2+)通道）的一些相關(guān)功能，可拮抗PZQ的殺蟲效應(yīng)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，CCBs和CyD無明顯拮抗P96抗血吸蟲效應(yīng)，提示P96的對(duì)血吸蟲的藥物作用靶點(diǎn)及其機(jī)制可能與PZQ不同，其殺蟲效應(yīng)與細(xì)胞Ca~(2+)內(nèi)穩(wěn)態(tài)的變化相關(guān)性較小。
【關(guān)鍵詞】：日本血吸蟲 PZQ衍生物 鈣通道阻滯劑 細(xì)胞松弛素-D
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R965;R383.24
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• Abstract7-11
• 研究背景11-15
• 參考文獻(xiàn)13-15
• 第一部分 DW 系列及 YCH-II-P 系列吡喹酮(PZQ) 衍生物和 PZQ 消旋體體外抗日本血吸蟲生物學(xué)效應(yīng)15-32
• 材料與方法15-19
• 結(jié)果19-28
• 討論28-30
• 參考文獻(xiàn)30-32
• 第二部分 PZQ衍生物 P96 體內(nèi)抗日本血吸蟲效應(yīng)32-41
• 材料與方法32-33
• 結(jié)果33-37
• 討論37-39
• 參考文獻(xiàn)39-41
• 第三部分 鈣通道阻滯劑與肌動(dòng)蛋白解聚劑對(duì) P96 體外抗日本血吸蟲效應(yīng)的影響41-50
• 材料與方法41-42
• 結(jié)果42-45
• 討論45-47
• 參考文獻(xiàn)47-50
• 全文小結(jié)50-51
• 附錄一 縮寫詞表51-52
• 附錄二 主要儀器與設(shè)備52-53
• 綜述53-63
• 參考文獻(xiàn)58-63
• 攻讀學(xué)位期間本人出版或公開發(fā)表的論著、論文63-64
• 致謝64-65

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 孫偉振;仇思婕;吳建忠;夏超明;喬春華;;苯二氮雜卓類化合物的合成及抗血吸蟲活性研究[J];化學(xué)研究與應(yīng)用;2011年08期

2 周士勝;細(xì)胞骨架對(duì)離子通道的調(diào)節(jié)作用[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2005年02期

3 梁幼生,戴建榮,朱蔭昌,李洪軍,徐明,許永良,杭盤宇,G. CColes,M. JDoenhoff;血吸蟲對(duì)吡喹酮抗藥性的研究 Ⅲ曼氏血吸蟲吡喹酮敏感株與抗性株尾蚴對(duì)吡喹酮的反應(yīng)性[J];中國血吸蟲病防治雜志;2003年01期

4 梁幼生,戴建榮,朱蔭昌,杭盤宇,李洪軍,趙松,茹煒煒,徐明,司進(jìn),寧安,余冬保,徐興建,李遠(yuǎn)林,宋鴻燾,神學(xué)慧;血吸蟲對(duì)吡喹酮抗藥性的研究 Ⅹ日本血吸蟲中國大陸株對(duì)吡喹酮敏感性的現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查[J];中國血吸蟲病防治雜志;2005年05期

5 王艷蕊;鄭新生;姚寶安;段存爭;;外源性一氧化氮抗日本血吸蟲的實(shí)驗(yàn)研究[J];中國血吸蟲病防治雜志;2006年02期

6 黃一心;;吡喹酮是否具有免疫調(diào)節(jié)作用[J];中國血吸蟲病防治雜志;2007年01期

7 梁幼生;戴建榮;李洪軍;汪偉;陶永輝;張鍵鋒;李偉;朱蔭昌;G.C. Coles;M.J. Doenhoff;;血吸蟲對(duì)吡喹酮抗藥性的研究 Ⅺ日本血吸蟲中國大陸現(xiàn)場(chǎng)分離株蟲卵毛蚴尾蚴對(duì)吡喹酮的敏感性[J];中國血吸蟲病防治雜志;2007年05期

8 汪天平;操治國;陳紅根;周曉農(nóng);;實(shí)現(xiàn)防治策略轉(zhuǎn)變 加快血防工作進(jìn)程[J];中國血吸蟲病防治雜志;2009年04期

9 周曉農(nóng);;我國血吸蟲病的監(jiān)測(cè)與預(yù)警[J];中國血吸蟲病防治雜志;2009年05期

10 黃一心;;吡喹酮抗血吸蟲作用機(jī)理的奧秘[J];中國血吸蟲病防治雜志;2010年02期

本文編號(hào)：1015106