本文關(guān)鍵詞：全反式視黃酸通過(guò)RARγ蛋白直接調(diào)控PPARγ2蛋白抑制骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成脂分化

  更多相關(guān)文章： 全反式視黃酸 RARγ PPARγ 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 Co-IP

【摘要】：目的研究高濃度全反式視黃酸(atRA)抑制大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(r BMSCs)成脂分化過(guò)程中,視黃酸核受體γ(RARγ)對(duì)過(guò)氧化物酶體增殖激活受體γ2(PPARγ2)與CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)調(diào)控的機(jī)制。方法體外分離、培養(yǎng)、誘導(dǎo)r BMSCs。成脂分化誘導(dǎo)液中,加入0.5、1.0μmol/L atRA持續(xù)作用15 d后,real-time PCR和Western blotting分別檢測(cè)RARγ、C/EBPα、PPARγ2的mRNA和蛋白表達(dá)水平。重組腺病毒過(guò)表達(dá)RARγ(over-RARγ)、沉默RARγ(si-RARγ)分別感染BMSCs,采用real-time PCR及Western blotting檢測(cè)RARγ、C/EBPα、PPARγ2的mRNA及蛋白表達(dá)水平。Co-IP檢測(cè)1.0μmol/L atRA持續(xù)成脂誘導(dǎo)15 d后,明確RARγ與PPARγ2兩者之間是否有相互作用。結(jié)果誘導(dǎo)15 d結(jié)束時(shí),與對(duì)照組相比,加入0.5、1.0μmol/L atRA后,RARγ表達(dá)明顯增加(P0.01,P0.001),而PPARγ2、C/EBPα表達(dá)明顯降低(P0.001)。over-RARγ組:RARγmRNA和蛋白表達(dá)均較對(duì)照組明顯增加(P0.01),而PPARγ2、C/EBPαmRNA和蛋白表達(dá)均較對(duì)照組明顯降低(P0.05,P0.01)。si-RARγ組:RARγ蛋白表達(dá)較對(duì)照組明顯減低,但PPARγ2、C/EBPα卻無(wú)明顯變化。Co-IP結(jié)果提示:RARγ與PPARγ2蛋白之間有直接作用,形成復(fù)合物,未發(fā)現(xiàn)其與視黃酸反應(yīng)元件(RARE)相結(jié)合證據(jù)。結(jié)論高濃度atRA抑制r BMSCs成脂分化,是通過(guò)激活視黃酸信號(hào)通路RARγ而實(shí)現(xiàn)的。RARγ下調(diào)成脂分化通路PPARγ2、C/EBPα表達(dá)是通過(guò)直接作用于下游的PPARγ2蛋白而實(shí)現(xiàn)的。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院兒童營(yíng)養(yǎng)研究中心兒童發(fā)育疾病研究教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室重慶市干細(xì)胞治療工程技術(shù)研究中心;
【關(guān)鍵詞】： 全反式視黃酸 RARγ PPARγ 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 Co-IP
【分類(lèi)號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 維生素A(VA)是人體生命活動(dòng)所必需的脂溶性維生素,包括視黃醇、視黃醛、視黃酸(retinoid acid,RA)等。VA通過(guò)其主要氧化活化物質(zhì)RA,在體內(nèi)類(lèi)似于激素一樣發(fā)揮其生理作用[1]。RA在體內(nèi)發(fā)揮作用主要是通過(guò)激活其核受體RARs而實(shí)現(xiàn)的,RARs包括RARα、RARβ和RARγ三亞型,即視黃酸

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本文編號(hào)：1009729