本文關(guān)鍵詞：一種高產(chǎn)組織芯片制作方法的建立、應(yīng)用與轉(zhuǎn)化

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【摘要】：第一部分一種高產(chǎn)組織芯片技術(shù)的建立背景 組織芯片(tissue chip),又稱組織微陣列(tissue microarray,TMA)是一種高通量、多樣本的分析工具。然而傳統(tǒng)組織芯片受原始蠟塊厚度的限制,產(chǎn)量有限。因此,我們致力于建立一種高產(chǎn)的組織芯片制作方法。目的建立一種高產(chǎn)的組織芯片技術(shù)。材料和方法 1)選擇復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院病理科2001年1月-2012年7月胃腸道間質(zhì)瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)標(biāo)本150例。 2)利用我們建立的組織芯片制作技術(shù)分別制作了含70例GSIT的組織芯片蠟塊和GIST耐藥標(biāo)本組織芯片蠟塊,并進(jìn)行CD117免疫組織化學(xué)染色和c-KIT、PDGFRα基因檢測。 3)利用我們建立的方法和傳統(tǒng)組織芯片制作技術(shù)制作一混合組織芯片,連續(xù)切片并記錄各芯條脫失時(shí)的芯條張數(shù)。 結(jié)果 1)在70例GIST組織芯片中,組織芯條排列整齊,無移位,無缺失,組織代表性好,蛋白保存完整,基因信息未丟失。 2)在20例GIST混合組織芯片中,傳統(tǒng)組織芯片技術(shù)制作區(qū)域產(chǎn)量(100張)；而新方法制作的組織芯片區(qū)域產(chǎn)量可達(dá)1500張。 3)在GIST耐藥標(biāo)本組織芯片中,高產(chǎn)組織芯片技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)再次向組織芯片蠟塊中增加樣本,二次成型,甚至多次成型。 4)在高產(chǎn)組織芯片制作中,我們申請(qǐng)了相關(guān)專利8項(xiàng),己授權(quán)5項(xiàng)。 結(jié)論 1)高產(chǎn)組織芯片制作方法步驟簡單,摒棄了昂貴的組織芯片點(diǎn)樣儀設(shè)備和繁瑣的接種步驟。 2)高產(chǎn)組織芯片蠟塊可完好保存蛋白和基因等信息。 3)相對(duì)于傳統(tǒng)組織芯片制作方法,本方法能夠獲得更大的組織芯片產(chǎn)量。 第二部分高產(chǎn)組織芯片技術(shù)的應(yīng)用 一、應(yīng)用高產(chǎn)組織芯片技術(shù)研究甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-1在乳腺癌中的表達(dá)及意義 目的 甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-1(thyroid transcription factor-1, TTF-1)主要表達(dá)于甲狀腺癌和肺腺癌,常作為發(fā)生在這些部位腫瘤的輔助診斷指標(biāo)。本研究篩查TTF-1在乳腺癌中的表達(dá)狀況,討論其病理診斷及鑒別診斷意義。 方法 制備含70例乳腺癌標(biāo)本的組織芯片,用免疫組織化學(xué)方法檢測TTF-1的表達(dá)狀況。 結(jié)果 70例乳腺癌組織芯片標(biāo)本中,2例表達(dá)TTF-1,陽性率為2.9%,陽性定位于細(xì)胞核,均為彌漫強(qiáng)陽性。其中1例為浸潤性導(dǎo)管癌2級(jí),1例為浸潤性小葉癌。結(jié)論 乳腺癌中可出現(xiàn)TTF-1的表達(dá),雖然發(fā)生率低,但是在腫瘤中出現(xiàn)TTF-1陽性表達(dá)并不能除外乳腺癌的可能,在日常病理工作中尤其是在判斷轉(zhuǎn)移性腫瘤原發(fā)部位時(shí),需要引起注意。 二、應(yīng)用高產(chǎn)組織芯片技術(shù)進(jìn)行原發(fā)性食管神經(jīng)內(nèi)分泌癌的免疫組織化學(xué)研究 目的 探索新的食管神經(jīng)內(nèi)分泌癌(neuroendocrine carcinoma, NEC)輔助診斷指標(biāo)。 方法 用高產(chǎn)組織芯片技術(shù)制作食管NEC組織芯片,同時(shí)制作食管鱗狀細(xì)胞癌組織芯片用作對(duì)照,然后進(jìn)行免疫組織化學(xué)指標(biāo)P63、HCK、CHG、CD56、SYN、 TTF-1、SSR2、SSR5、P16、CD117等的檢測。 結(jié)果 1)P16均為100%彌漫強(qiáng)陽性表達(dá)。 2)TTF1-只在神經(jīng)內(nèi)分泌癌中表達(dá)(60%),而CDl17在SCC伴NED和SCC中可有表達(dá)(40%,5.3%),但在陽性率及陽性范圍、陽性強(qiáng)度均不及NEC(95%)。 3)SSR2在食管NEC、SCC伴NED、SCC三組中的陽性率分別為40%、40% 和19.3%,SSR5在食管NEC、SCC伴NED、SCC三組中的陽性率分別為70%、70%、15.8%。 結(jié)論 1) P16均為100%彌漫強(qiáng)陽性表達(dá),無鑒別診斷價(jià)值。 2) TTF-1、CD117可作為食管SCC及食管NEC的鑒別診斷指標(biāo)。 3) SSR2、SSR5在食管NEC、SCC伴NED、SCC三組中均有一定的陽性表達(dá)率,為進(jìn)一步研究生長抑素在食管癌中的抗腫瘤作用提供了理論依據(jù)。 第三部分高產(chǎn)組織芯片技術(shù)的轉(zhuǎn)化與推廣
【關(guān)鍵詞】：組織芯片 高產(chǎn)量 腫瘤研究 乳腺腫瘤 食管腫瘤 甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-1 神經(jīng)內(nèi)分泌癌
【學(xué)位授予單位】：復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R361.2
【目錄】：

• 英文縮略語注釋3-5
• 中文摘要5-8
• 英文摘要8-11
• 引言11-13
• 第一部分 高產(chǎn)組織芯片的建立13-24
• 一、高產(chǎn)組織芯片技術(shù)的發(fā)明13
• 二、高產(chǎn)組織芯片有效性的驗(yàn)證13-18
• 三、高產(chǎn)組織芯片與傳統(tǒng)組織芯片的比較18-21
• 四、高產(chǎn)組織芯片多次接種的研究21-23
• 五、申請(qǐng)專利23-24
• 第二部分 高產(chǎn)組織芯片技術(shù)的應(yīng)用24-38
• 一、高產(chǎn)組織芯片技術(shù)研究甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-1在乳腺癌中的表達(dá)及意義24-28
• 背景24
• 材料與方法24-25
• 結(jié)果25-26
• 討論26-28
• 小結(jié)28
• 二、高產(chǎn)組織芯片技術(shù)在原發(fā)性食管神經(jīng)內(nèi)分泌癌的免疫組織化學(xué)研究28-38
• 背景28
• 材料和方法28-30
• 結(jié)果30-34
• 討論34-37
• 小結(jié)37-38
• 第三部分 高產(chǎn)組織芯片技術(shù)的轉(zhuǎn)化與推廣38-39
• 全文總結(jié)39
• 參考文獻(xiàn)39-42
• 綜述42-51
• 參考文獻(xiàn)47-51
• 碩士期間研究成果51-54
• 致謝54-56

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 Laurine Verset;Marianna Arvanitakis;Patricia Loi;Jean Closset;Myriam Delhaye;Myriam Remmelink;Pieter Demetter;;TTF-1 positive small cell cancers:Don't think they're always primary pulmonary![J];World Journal of Gastrointestinal Oncology;2011年10期

2 張寶燕;李向紅;崔海宏;;CD56、嗜鉻蛋白A和突觸素在小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及其臨床診斷價(jià)值[J];診斷病理學(xué)雜志;2009年05期

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本文編號(hào)：1004936