目的:腦膠質(zhì)瘤是人類中樞神經(jīng)系統(tǒng)中最常見的原發(fā)性腫瘤。盡管目前在手術(shù)、化療和放療方面取得了很多進(jìn)展,但惡性腦膠質(zhì)瘤患者預(yù)后仍然很差。腦膠質(zhì)瘤依賴于腫瘤血管生長(zhǎng)。膠質(zhì)瘤細(xì)胞分泌血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）等多種促血管生成因子促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng);膠質(zhì)瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞也分泌多種促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)的因子,二者相互作用促進(jìn)膠質(zhì)瘤的生長(zhǎng)。因此抗血管新生的治療已成為抗膠質(zhì)瘤的重要治療手段之一。深入研究膠質(zhì)瘤血管新生可能為膠質(zhì)瘤的治療提供新途徑。FUS是一種RNA結(jié)合蛋白（RNA-binding proteins,RBPs）,屬于FET（FUS/EWS/TAF15）蛋白家族,參與調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)RNA轉(zhuǎn)運(yùn),信使RNA（messenger RNA,mRNA）合成,選擇性剪接和多腺苷酸化位點(diǎn)選擇等。FUS參與腫瘤等疾病發(fā)生發(fā)展的調(diào)控。例如,FUS與轉(zhuǎn)錄因子ERG結(jié)合,調(diào)節(jié)急性髓性白血病的發(fā)展。此外,在脂肪肉瘤、乳腺癌、宮頸癌等細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)FUS的mRNA或蛋白表達(dá)增加。FUS能夠促進(jìn)非小細(xì)胞肺癌的惡性進(jìn)展。FUS的表達(dá)沉默抑制神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞的增殖和...

【文章頁(yè)數(shù)】：86 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料和方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞株
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.2 細(xì)胞凍存
        2.2.3 細(xì)胞復(fù)蘇
        2.2.4 細(xì)胞計(jì)數(shù)
        2.2.5 膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(GBM)條件培養(yǎng)基的制備
        2.2.6 Trizol法提取RNA
        2.2.7 實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)
        2.2.8 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        2.2.9 細(xì)胞生長(zhǎng)抑制實(shí)驗(yàn)(CCK-8 法)
        2.2.10 細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)
        2.2.11 內(nèi)皮細(xì)胞管腔形成實(shí)驗(yàn)
        2.2.12 Western blot實(shí)驗(yàn)
        2.2.13 熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)
        2.2.14 RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀(RIP)實(shí)驗(yàn)
        2.2.15 染色質(zhì)免疫共沉淀(ChIP)實(shí)驗(yàn)
        2.2.16 基質(zhì)膠栓體內(nèi)血管生成實(shí)驗(yàn)
    2.3 統(tǒng)計(jì)方法
3 結(jié)果
    3.1 FUS在 GECs中高表達(dá),FUS表達(dá)沉默抑制膠質(zhì)瘤血管新生,FUS結(jié)合并促進(jìn)circ₀02136 的生成,調(diào)節(jié)膠質(zhì)瘤血管新生
    3.2 Circ₀02136在GECs中高表達(dá),circ₀02136 的表達(dá)沉默抑制膠質(zhì)瘤血管新生
    3.3 MiR-138-5p在 GECs中低表達(dá),過表達(dá)miR-138-5p抑制膠質(zhì)瘤血管新生
    3.4 MiR-138-5p靶向結(jié)合circ₀02136,調(diào)節(jié)膠質(zhì)瘤血管新生
    3.5 SOX13是miR-138-5p的靶基因,促進(jìn)膠質(zhì)瘤血管新生
    3.6 SOX13與SPON2 啟動(dòng)子區(qū)結(jié)合,促進(jìn)SPON2 的表達(dá)
    3.7 MiR-138-5p通過SOX13 影響SPON2 的表達(dá),SOX13 促進(jìn)FUS轉(zhuǎn)錄形成反饋環(huán),調(diào)節(jié)膠質(zhì)瘤血管新生
    3.8 FUS、circ₀02136和miR-138-5p單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用在體顯著抑制膠質(zhì)瘤血管新生
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：4028198