發(fā)布時(shí)間：2023-11-11 12:13

　　目的:探索凝血酶合并缺氧對(duì)PC12細(xì)胞損傷的最佳反應(yīng)時(shí)間點(diǎn),建立體外缺氧合并凝血酶誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞損傷模型,模擬急性缺血性中風(fēng)時(shí)凝血酶合并缺氧毒性損傷的細(xì)胞內(nèi)環(huán)境。探討急性缺血性中風(fēng)(Acute Ischemic Stroke,AIS)引起的腦細(xì)胞損傷的分子機(jī)制及解毒化瘀方對(duì)凝血酶合并缺氧損傷的干預(yù)作用與Ras/Raf/撕裂原激活蛋白激酶(mitogenactivatedp rotein kinase kinase,MEK)/細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(Extracellular singnal-regulated Kinase,ERK)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的作用機(jī)制。方法:采用三氣培養(yǎng)箱和無(wú)血清(Dulbeccos Modified Eagle Medium DMEM)高糖型培養(yǎng)液合并不同濃度的凝血酶(0、50、100、150和200U/ml)造成細(xì)胞損傷后,再將每組缺氧狀態(tài)下培養(yǎng)1h、6h、12h、24h,采用四甲基偶氮唑鹽(MTT)分析細(xì)胞的存活率、TUNEL法檢測(cè)細(xì)胞的凋亡程度,篩選出凝血酶合并缺氧對(duì)PC12細(xì)胞損傷的最佳模型條件,建立凝血酶合并缺氧的體外細(xì)胞模型。將PC12細(xì)胞隨機(jī)分為空白...

【文章頁(yè)數(shù)】：47 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
英語(yǔ)縮略詞表
前言
材料與方法
    1.實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.3 藥物
        1.4 試劑
        1.5 主要儀器
    2. 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 解毒化瘀方含藥血漿的制備
        2.2 凝血酶合并缺氧誘導(dǎo)PC12細(xì)胞損傷模型的建立
        2.3 指標(biāo)檢測(cè)
        2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    3.結(jié)果
        3.1 細(xì)胞模型的篩選和確定
        3.2 解毒化瘀方對(duì)凝血酶合并缺氧細(xì)胞毒性損傷的干預(yù)作用
    4 討論
        4.1 西醫(yī)對(duì)AIS的認(rèn)識(shí)
        4.2 凝血酶在AIS中的作用
        4.3 凝血酶受體
        4.4 凝血酶毒性損傷相關(guān)信號(hào)通路
        4.5 傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)對(duì)AIS的認(rèn)識(shí)
        4.6 解毒化瘀方的立方依據(jù)及用藥分析
        4.7 解毒化瘀方對(duì)凝血酶及其受體與ERK信號(hào)通路的影響
結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附圖 A：經(jīng)NGF誘導(dǎo)具有神經(jīng)元形態(tài)的 PC12 細(xì)胞
附圖 B 150U/ml 凝血酶在缺氧 1h、6h、12h、24h 后細(xì)胞凋亡情況（綠色熒光為凋亡細(xì)胞）
附圖 C：各組細(xì)胞 PAR-1、MEK-1、ERK-1、ERK-2 的 m RNA 表
附錄 D：免疫熒光相關(guān)信號(hào)通路 ERK1/2、p-ERK1/2 蛋白表達(dá)
附錄 E：綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：3862573