目的探討抑制元素l-沉默轉(zhuǎn)錄因子4(repressor element 1-silencing transcription factor 4,REST4)基因?qū)δz質(zhì)細胞瘤U87細胞增殖、凋亡、遷移的影響及可能的作用機制。方法將REST4-siRNA轉(zhuǎn)染至膠質(zhì)細胞瘤U87細胞(si-REST4組),同時設置siRNA陰性對照組(si-NC組)及空白對照組(Control組)。采用實時熒光定量PCR檢測REST4 mRNA的表達水平,MTT法檢測細胞增殖能力,Annexin V-FITC/PI雙染法檢測細胞凋亡情況,劃痕實驗檢測細胞遷移能力,Western blot檢測U87細胞中REST4、PI3K、AKT、mTOR、p-PI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白的表達水平。結(jié)果轉(zhuǎn)染后,與Control組及si-NC組相比,si-REST4組U87細胞中REST4 mRNA及蛋白表達水平下調(diào)(P<0.05),細胞增殖能力降低(P<0.05),細胞凋亡比例增加(P<0.05),細胞遷移率降低(P<0.05)。Western blot檢測結(jié)果顯示,與Control組及si...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要材料
    1.2 細胞培養(yǎng)與轉(zhuǎn)染
    1.3 實時熒光定量PCR檢測U87細胞中REST4 m RNA的表達
    1.4 MTT法檢測U87細胞的增殖能力
    1.5 Annexin V-FITC/PI雙染法檢測U87細胞凋亡情況
    1.6 劃痕實驗檢測U87細胞的遷移能力
    1.7 Western blot檢測U87細胞中PI3K/AKT/m TOR信號通路相關因子的表達水平
    1.8 統(tǒng)計學方法
2 結(jié)果
    2.1 轉(zhuǎn)染后U87細胞中REST4 m RNA及蛋白表達水平
    2.2 下調(diào)REST4對U87細胞增殖能力的影響
    2.3 下調(diào)REST4對U87細胞凋亡的影響
    2.4 REST4對U87細胞遷移能力的影響
    2.5 REST4對U87細胞PI3K/AKT/m TOR信號通路相關蛋白表達水平的影響
3 討論



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