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REST4對(duì)膠質(zhì)細(xì)胞瘤U87細(xì)胞生物學(xué)行為的影響及其作用機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2024-09-17 15:36
   目的探討抑制元素l-沉默轉(zhuǎn)錄因子4(repressor element 1-silencing transcription factor 4,REST4)基因?qū)δz質(zhì)細(xì)胞瘤U87細(xì)胞增殖、凋亡、遷移的影響及可能的作用機(jī)制。方法將REST4-siRNA轉(zhuǎn)染至膠質(zhì)細(xì)胞瘤U87細(xì)胞(si-REST4組),同時(shí)設(shè)置siRNA陰性對(duì)照組(si-NC組)及空白對(duì)照組(Control組)。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)REST4 mRNA的表達(dá)水平,MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖能力,Annexin V-FITC/PI雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況,劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移能力,Western blot檢測(cè)U87細(xì)胞中REST4、PI3K、AKT、mTOR、p-PI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果轉(zhuǎn)染后,與Control組及si-NC組相比,si-REST4組U87細(xì)胞中REST4 mRNA及蛋白表達(dá)水平下調(diào)(P<0.05),細(xì)胞增殖能力降低(P<0.05),細(xì)胞凋亡比例增加(P<0.05),細(xì)胞遷移率降低(P<0.05)。Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示,與Control組及si...

【文章頁數(shù)】:5 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 主要材料
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)與轉(zhuǎn)染
    1.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)U87細(xì)胞中REST4 m RNA的表達(dá)
    1.4 MTT法檢測(cè)U87細(xì)胞的增殖能力
    1.5 Annexin V-FITC/PI雙染法檢測(cè)U87細(xì)胞凋亡情況
    1.6 劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)U87細(xì)胞的遷移能力
    1.7 Western blot檢測(cè)U87細(xì)胞中PI3K/AKT/m TOR信號(hào)通路相關(guān)因子的表達(dá)水平
    1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 轉(zhuǎn)染后U87細(xì)胞中REST4 m RNA及蛋白表達(dá)水平
    2.2 下調(diào)REST4對(duì)U87細(xì)胞增殖能力的影響
    2.3 下調(diào)REST4對(duì)U87細(xì)胞凋亡的影響
    2.4 REST4對(duì)U87細(xì)胞遷移能力的影響
    2.5 REST4對(duì)U87細(xì)胞PI3K/AKT/m TOR信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)水平的影響
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本文編號(hào):4005664

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