REST4對(duì)膠質(zhì)細(xì)胞瘤U87細(xì)胞生物學(xué)行為的影響及其作用機(jī)制
發(fā)布時(shí)間:2024-09-17 15:36
目的探討抑制元素l-沉默轉(zhuǎn)錄因子4(repressor element 1-silencing transcription factor 4,REST4)基因?qū)δz質(zhì)細(xì)胞瘤U87細(xì)胞增殖、凋亡、遷移的影響及可能的作用機(jī)制。方法將REST4-siRNA轉(zhuǎn)染至膠質(zhì)細(xì)胞瘤U87細(xì)胞(si-REST4組),同時(shí)設(shè)置siRNA陰性對(duì)照組(si-NC組)及空白對(duì)照組(Control組)。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)REST4 mRNA的表達(dá)水平,MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖能力,Annexin V-FITC/PI雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況,劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移能力,Western blot檢測(cè)U87細(xì)胞中REST4、PI3K、AKT、mTOR、p-PI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果轉(zhuǎn)染后,與Control組及si-NC組相比,si-REST4組U87細(xì)胞中REST4 mRNA及蛋白表達(dá)水平下調(diào)(P<0.05),細(xì)胞增殖能力降低(P<0.05),細(xì)胞凋亡比例增加(P<0.05),細(xì)胞遷移率降低(P<0.05)。Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示,與Control組及si...
【文章頁數(shù)】:5 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 主要材料
1.2 細(xì)胞培養(yǎng)與轉(zhuǎn)染
1.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)U87細(xì)胞中REST4 m RNA的表達(dá)
1.4 MTT法檢測(cè)U87細(xì)胞的增殖能力
1.5 Annexin V-FITC/PI雙染法檢測(cè)U87細(xì)胞凋亡情況
1.6 劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)U87細(xì)胞的遷移能力
1.7 Western blot檢測(cè)U87細(xì)胞中PI3K/AKT/m TOR信號(hào)通路相關(guān)因子的表達(dá)水平
1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
2.1 轉(zhuǎn)染后U87細(xì)胞中REST4 m RNA及蛋白表達(dá)水平
2.2 下調(diào)REST4對(duì)U87細(xì)胞增殖能力的影響
2.3 下調(diào)REST4對(duì)U87細(xì)胞凋亡的影響
2.4 REST4對(duì)U87細(xì)胞遷移能力的影響
2.5 REST4對(duì)U87細(xì)胞PI3K/AKT/m TOR信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)水平的影響
3 討論
本文編號(hào):4005664
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1 材料與方法
1.1 主要材料
1.2 細(xì)胞培養(yǎng)與轉(zhuǎn)染
1.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)U87細(xì)胞中REST4 m RNA的表達(dá)
1.4 MTT法檢測(cè)U87細(xì)胞的增殖能力
1.5 Annexin V-FITC/PI雙染法檢測(cè)U87細(xì)胞凋亡情況
1.6 劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)U87細(xì)胞的遷移能力
1.7 Western blot檢測(cè)U87細(xì)胞中PI3K/AKT/m TOR信號(hào)通路相關(guān)因子的表達(dá)水平
1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
2.1 轉(zhuǎn)染后U87細(xì)胞中REST4 m RNA及蛋白表達(dá)水平
2.2 下調(diào)REST4對(duì)U87細(xì)胞增殖能力的影響
2.3 下調(diào)REST4對(duì)U87細(xì)胞凋亡的影響
2.4 REST4對(duì)U87細(xì)胞遷移能力的影響
2.5 REST4對(duì)U87細(xì)胞PI3K/AKT/m TOR信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)水平的影響
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本文編號(hào):4005664
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