本文關(guān)鍵詞：創(chuàng)傷失血性休克復(fù)蘇后大鼠IGF-1系統(tǒng)功能的變化及高氮量腸內(nèi)營養(yǎng)的調(diào)控作用

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【摘要】：背景及目的：臨床觀察發(fā)現(xiàn)當(dāng)機(jī)體處于嚴(yán)重應(yīng)激狀態(tài)時,患者常出現(xiàn)生長激素抵抗現(xiàn)象,表現(xiàn)為生長激素(GH)水平持續(xù)增高,而下游主要效應(yīng)分子胰島素樣生長因子-1(IGF-1)卻明顯低于正常。重癥患者GH-IGF-1軸的嚴(yán)重紊亂提示機(jī)體蛋白合成代謝受損,可能是引起重癥患者肌肉消耗發(fā)生的重要原因之一。本研究旨在通過建立創(chuàng)傷失血性休克復(fù)蘇動物模型以模擬臨床重癥狀態(tài),探討危重癥疾病下機(jī)體IGF-1系統(tǒng)功能的變化,及對骨骼肌蛋白質(zhì)代謝的影響。方法：成年雄性SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(n=9)和創(chuàng)傷失血性休克復(fù)蘇組(T-HS, n=11)。以剖腹探查(腹部正中5cm切口)和控制性失血法(平均動脈壓于20min內(nèi)降至30-35mmHg,維持45min后復(fù)蘇)建立動物模型。造模成功后次日清晨處死取材。ELISA法檢測大鼠血清GH、游離IGF-1、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-1(IGFBP-1)和IGFBP-3水平,Western Blot法檢測腓腸肌蛋白激酶B (PKB/Akt)-雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信號通路的活化情況。高效液相色譜(HPLC)檢測趾長伸肌3-甲基組氨酸(3-MH)含量。結(jié)果：與假手術(shù)組相比,T-HS組大鼠血清游離IGF-1水平急劇下降,伴隨著IGFBP-3水平顯著降低和IGFBP-1水平明顯升高。同時,T-HS組大鼠腓腸肌胞內(nèi)mTOR通路關(guān)鍵蛋白Akt、mTOR和核糖體S6蛋白激酶1(S6K1)的磷酸化程度顯著被抑制,提示胞內(nèi)蛋白翻譯起始過程受阻。T-HS組大鼠肌肉3-MH釋放量較假手術(shù)組亦明顯增加,說明蛋白分解代謝加劇。結(jié)論：重度創(chuàng)傷后出現(xiàn)的IGF-1系統(tǒng)功能紊亂,引起骨骼肌蛋白質(zhì)代謝異常是導(dǎo)致肌肉消耗的重要原因之一。背景及目的：循環(huán)中IGF-1持續(xù)處于低水平不利于重癥患者瘦肉質(zhì)的維持。研究發(fā)現(xiàn)充足的蛋白-能量攝入對機(jī)體IGF-1的表達(dá)具有營養(yǎng)調(diào)控意義,食物中氨基酸組成對IGF-1的正常合成也會產(chǎn)生影響。傳統(tǒng)觀點強(qiáng)調(diào),對重癥高代謝患者實施營養(yǎng)支持時需適當(dāng)提高蛋白供給以彌補(bǔ)機(jī)體劇烈的氮量丟失。本研究旨在探討富含必需氨基酸的高氮量腸內(nèi)營養(yǎng)對創(chuàng)傷失血性休克復(fù)蘇后大鼠IGF-1系統(tǒng)功能,及下游胞內(nèi)：mTOR蛋白合成信號通路活化的調(diào)控作用。方法：成年雄性SD大鼠(n=90)隨機(jī)分為5組：(1)正常對照組(NC),(2)配對飲食組(PF), (3)T-HS對照組(T-HS/Ctr), (4)標(biāo)準(zhǔn)腸內(nèi)營養(yǎng)組(T-HS/SE)和(5)富含必需氨基酸的高氮量腸內(nèi)營養(yǎng)組(T-HS/EAA).分別于實驗第2、4和6天處死大鼠并取材(n=6/組)。記錄大鼠每日體重變化及腓腸肌、比目魚肌和趾長伸肌濕重。ELISA法檢測血清游離IGF-1、IGFBP-1、IGFBP-3、胰島素和皮質(zhì)酮水平。Western blot法檢測第6天腓腸肌標(biāo)本中Akt、mTOR和$6K1的磷酸化情況。HPLC法檢測第6天血清必需氨基酸譜和趾長伸肌標(biāo)本中3-MH含量。結(jié)果：創(chuàng)傷失血性休克后大鼠腓腸肌和趾長伸肌重量丟失明顯。第2天起,T-HS/SE組和T-HS/EAA組腓腸肌濕重均明顯高于T-HS/Ctr組。從第4天起T-HS/EAA組腓腸肌濕重亦顯著高于T-HS/SE組,與PF組相比無明顯差異。第6天,T-HS/EAA組比目魚肌濕重也顯著高于T-HS/SE組、T-HS/Ctr組和PF組,接近于NC組水平。創(chuàng)傷失血性休克復(fù)蘇后大鼠血清游離IGF-1、IGFBP-3水平顯著降低,IGFBP-1水平明顯升高。與T-HS/Ctr組相比,第2天起T-HS/SE組和T-HS/EAA組大鼠血清IGFBP-1水平明顯降低,第4天起血清游離IGF-1、IGFBP-3水平明顯升高,同時伴隨著血清胰島素水平顯著上升和皮質(zhì)酮水平顯著下降。此外,與T-HS/SE組相比,T-HS/EAA組大鼠血清游離IGF-1水平于第4、6天分別升高了18%和22%,IGFBP-3水平于第4、6天亦分別升高了70%和40%。觀察大鼠腓腸肌mTOR信號通路的活化情況發(fā)現(xiàn)：T-HS/Ctr組胞內(nèi)mTOR通路信號蛋白活化被明顯抑制,T-HS/SE組升高并不明顯,而T-HS/EAA組p-Akt. p-mTOR和p-S6K1水平均顯著高于T-HS/Ctr組,并且T-HS/EAA組p-mTOR.p-S6K1水平亦明顯高于T-HS/SE組。血清氨基酸譜檢測發(fā)現(xiàn)：T-HS/EAA組大鼠血清支鏈氨基酸水平較T-HS/Ctr組上升明顯,且亮氨酸和纈氨酸水平亦顯著高于T-HS/SE組。T-HS/EAA組趾長伸肌3-MH含量明顯低于T-HS/Ctr組。結(jié)論：富含必需氨基酸的高氮量腸內(nèi)營養(yǎng)有利于糾正大鼠創(chuàng)傷失血性休克復(fù)蘇后IGF-1系統(tǒng)紊亂,促進(jìn)IGF-1-IGFBPs軸早期明顯恢復(fù),激活了胞內(nèi)蛋白合成信號通路,緩解了重度創(chuàng)傷下的肌肉消耗,維持了骨骼肌含量。本研究從代謝調(diào)控層面上說明了營養(yǎng)支持對重癥疾病狀態(tài)下IGF-1系統(tǒng)的變化具有調(diào)節(jié)作用,為臨床“營養(yǎng)支持”向“營養(yǎng)治療”觀念的轉(zhuǎn)變提供了可靠的理論證據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：腸內(nèi)營養(yǎng) IGF-1 必需氨基酸 mTOR 創(chuàng)傷失血性休克 胰島素樣生長因子-1 雷帕霉素靶蛋白
【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R605.971
【目錄】：

• 中文摘要7-11
• Abstract11-15
• 文獻(xiàn)綜述15-32
• 一、重癥患者GH-IGF-1軸功能的變化15-21
• 1 GH-IGF-1軸簡介15-16
• 2 重癥疾病狀態(tài)下GH-IGF-1軸的改變16-17
• 3 生長激素抵抗17-18
• 參考文獻(xiàn)18-21
• 二、亮氨酸調(diào)控骨骼肌蛋白質(zhì)合成代謝的研究進(jìn)展21-32
• 1 亮氨酸與骨骼肌蛋白質(zhì)合成21-22
• 2 亮氨酸對胞內(nèi)mTOR信號通路的調(diào)控作用22-25
• 3 亮氨酸在肌肉消耗疾病中的應(yīng)用25-27
• 4 總結(jié)與展望27
• 參考文獻(xiàn)27-32
• 實驗部分32-77
• 第—部分、創(chuàng)傷失血性休克復(fù)蘇后大鼠IGF-1系統(tǒng)功能的變化32-51
• 背景32-34
• 材料與方法34-43
• 結(jié)果43-46
• 討論46-48
• 結(jié)論48-49
• 參考文獻(xiàn)49-51
• 第二部分、持續(xù)高氮量腸內(nèi)營養(yǎng)支持對創(chuàng)傷失血性休克復(fù)蘇后大鼠IGF-1系統(tǒng)功能的營養(yǎng)調(diào)控作用51-77
• 背景51-53
• 材料與方法53-59
• 結(jié)果59-69
• 討論69-72
• 結(jié)論72-73
• 參考文獻(xiàn)73-77
• 論文發(fā)表目錄77-78
• 致謝78-79

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 夏賢峰;王新穎;李寧;黎介壽;;失血性休克復(fù)蘇后大鼠生長激素-胰島素樣生長因子-1軸功能的變化[J];腸外與腸內(nèi)營養(yǎng);2014年02期

2 張卿云;姚一;;局灶性皮質(zhì)發(fā)育不良及其致癇機(jī)制的研究進(jìn)展[J];立體定向和功能性神經(jīng)外科雜志;2015年01期

3 夏志;趙艷;尚畫雨;葉菊菲;楊力源;孫君志;熊偉平;蘇全生;;膳食補(bǔ)充亮氨酸可通過抑制泛素-蛋白酶體削弱增齡小鼠骨骼肌萎縮[J];體育科學(xué);2015年06期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 林元邦;改進(jìn)型復(fù)制缺陷性腺病毒（HDAd）轉(zhuǎn)基因載體特異性及穩(wěn)定性研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2012年

2 徐磊;非酒精性脂肪性肝病與內(nèi)分泌代謝紊亂的關(guān)系的研究[D];浙江大學(xué);2014年

3 吳海青;mTOR信號通路對山羊骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞增殖及分化的影響[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2015年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 安靜;IGF1在綿羊成肌細(xì)胞增殖與分化中的作用[D];新疆農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

2 宿魯鋒;表沒食子兒茶素沒食子酸酯、β-羥基-β甲基丁酸鹽聯(lián)合治療癌癥惡病質(zhì)實驗性研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2013年

3 陳思;胰島素樣生長因子-1對模擬失重下成骨細(xì)胞整合素亞單位表達(dá)的影響[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年

4 王巍;有氧運動干預(yù)父系C57BL/6小鼠對雄性子代生長發(fā)育的影響[D];天津醫(yī)科大學(xué);2014年

5 楊雅閣;復(fù)合營養(yǎng)素對CCl_4誘導(dǎo)的肝纖維化大鼠血生長激素、胰島素樣生長因子-1表達(dá)的影響[D];鄭州大學(xué);2014年

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本文編號：995766