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大鼠心肺復(fù)蘇后腦Occludin蛋白表達(dá)及其對血腦屏障作用的影響

發(fā)布時間:2017-10-08 16:37

  本文關(guān)鍵詞:大鼠心肺復(fù)蘇后腦Occludin蛋白表達(dá)及其對血腦屏障作用的影響


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【摘要】:目的:探討心肺復(fù)蘇后大鼠腦Occludin蛋白的表達(dá)及其對血腦屏障作用的影響方法:將200只SD雄性大鼠隨機(jī)分為兩組:A組(對照組,n=100),僅進(jìn)行相應(yīng)的麻醉和動靜脈插管及氣管插管,未行窒息及CPR,再將A組分成A1組(50只)和A2組(50只)。B組(復(fù)蘇組,n=100),制作復(fù)蘇模型,常規(guī)小動物心肺復(fù)蘇,自主循環(huán)恢復(fù)后再將B組分成B1組(50只)和B2組(50只)。監(jiān)測A組術(shù)后、B組ROSC后60min內(nèi)MAP的變化;A1組術(shù)后穩(wěn)定10分鐘后在2h、6h、12h、24h、48h,B1組自主循環(huán)恢復(fù)后在2h、6h、12h、24h、48h斷頭處死大鼠取腦組織,各時間點10只,應(yīng)用western blot、免疫組織化學(xué)染色法檢測腦組織HIF-1a、VEGF、Occludin的表達(dá),干濕重法測腦組織含水量。A2組術(shù)后穩(wěn)定10分鐘后2h、6h、12h、24h、48h,B2組自主循環(huán)恢復(fù)后2h、6h、12h、24h、48h,在相應(yīng)時間點前2h經(jīng)大鼠尾靜脈按3mg/kg標(biāo)注注射20g/L伊文氏藍(lán),在相應(yīng)時間點斷頭處死大鼠取腦組織,各時間點10只,用熒光分光光度計計算出血腦屏障對EB的通透率。實驗數(shù)據(jù)采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計處理。所有計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,并進(jìn)行正態(tài)性及方差齊性檢驗,兩樣本間比較采用t檢驗,多樣本間比較用單因素方差分析,以P0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果:①各組基礎(chǔ)狀態(tài)下R、W、HR及MAP的變化,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。②B1組在ROSC后2h腦HIF-1a蛋白表達(dá)開始增高,6h增高明顯,12h達(dá)到高峰,24h逐漸降低,48h仍高于正常,與A1組比較有顯著差異(P0.05或P0.01);③B1組在ROSC后2h腦VEGF蛋白表達(dá)開始增高,6h增高明顯,12h達(dá)到高峰,24h逐漸降低,48h仍高于正常,與A1組比較有顯著差異(P0.05或P0.01);④B1組在ROSC后2h腦Occludin蛋白開始降低,6h降低明顯,12h達(dá)低峰,24h逐漸上升,48h仍低于正常,與A1組比較有顯著差異(P0.05或P0.01)。⑤B1組在ROSC后2h腦組織含水量開始增加,6h增加明顯,12h達(dá)到高峰,24h逐漸降低,48h仍高于正常,與A1組比較有顯著差異(P0.05或P0.01)。⑥B2組腦組織EB含量在ROSC后2h開始增加,6h增加明顯,12h達(dá)到高峰,24h逐漸降低,48h仍高于正常,與A2組比較有顯著差異(P0.05或P0.01)。結(jié)論:1、腦組織中HIF-1a、VEGF蛋白表達(dá)在ROSC后各時間點均高于對照組,而Occludin蛋白表達(dá)均低于對照組。Occludin蛋白表達(dá)隨著HIF-1a、VEGF蛋白表達(dá)增高而呈下降趨勢。2、腦組織EB及水含量在ROSC后各時間點均高于對照組,血腦屏障通透性隨Occludin蛋白表達(dá)下降而增加。3、HIF-1a誘導(dǎo)VEGF產(chǎn)生作用,使Occludin蛋白表達(dá)降低,緊密連接結(jié)構(gòu)受損,血腦屏障通透性增加。
【關(guān)鍵詞】:Occludin 心肺復(fù)蘇 血腦屏障 腦水腫
【學(xué)位授予單位】:南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R459.7
【目錄】:
  • 摘要3-5
  • ABSTRACT5-9
  • 符號說明9-10
  • 第1章 引言10-13
  • 第2章 材料與方法13-19
  • 2.1 實驗材料13-14
  • 2.1.1 實驗動物13
  • 2.1.2 實驗儀器13
  • 2.1.3 實驗試劑13-14
  • 2.2 實驗方法14-19
  • 2.2.1 實驗動物分組14-15
  • 2.2.2 SCA模型制備15
  • 2.2.3 各指標(biāo)的測定和方法15-18
  • 2.2.4 統(tǒng)計學(xué)方法18-19
  • 第3章 結(jié)果19-29
  • 3.1 各組大鼠一般情況比較19-20
  • 3.1.1 各組大鼠基礎(chǔ)狀態(tài)下W、R及HR的比較19
  • 3.1.2 各組大鼠MAP的變化19-20
  • 3.2 通過免疫組化方法分析腦HIF-1α、VEGF、occludin蛋白的變化20-23
  • 3.3 通過Western blot方法檢測HIF-1α、VEGF、occludin蛋白的表達(dá)23-26
  • 3.4 腦組織含水量變化26-27
  • 3.5 血腦屏障通透性的測定27-29
  • 第4章 討論29-39
  • 4.1 實驗背景29-30
  • 4.2 心臟驟停及動物復(fù)蘇模型的制作30-31
  • 4.3 復(fù)蘇后各組觀察指標(biāo)的變化31-39
  • 4.3.1 MAP31
  • 4.3.2 腦HIF-1a蛋白的表達(dá)31-33
  • 4.3.3 腦VEGF的表達(dá)33-35
  • 4.3.4 腦Occludin的表達(dá)35-37
  • 4.3.5 腦組織含水量、血腦屏障通透性的測定37-39
  • 第5章 結(jié)論與展望39-41
  • 5.1 結(jié)論39
  • 5.2 展望39-41
  • 致謝41-42
  • 參考文獻(xiàn)42-47
  • 附圖47-52
  • 綜述52-60
  • 參考文獻(xiàn)57-60

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號:995145

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