本文關(guān)鍵詞：EPO對(duì)急性創(chuàng)面TGF-β1和Smad3蛋白表達(dá)的影響

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【摘要】：目的:探討外用不同濃度EPO對(duì)大鼠急性創(chuàng)面愈合的影響,以及對(duì)愈合過(guò)程中創(chuàng)面組織TGFβ1及Smad3蛋白表達(dá)的影響,并進(jìn)一步探討EPO與TGFβ1及Smad3蛋白的表達(dá)關(guān)系,明確EPO促進(jìn)創(chuàng)面愈合的機(jī)制,最終為臨床選擇合理濃度EPO外用藥物治療急性創(chuàng)面提供理論依據(jù)。方法:(1)SD雄性大鼠72只,隨機(jī)分為四組:低劑量組、中劑量組、高劑量組和對(duì)照組,每組18只;(2)急性創(chuàng)面模型建立:四組大鼠分別麻醉后稱(chēng)重,然后在SD大鼠背部制作直徑2.5cm急性創(chuàng)面模型;(3)給藥:對(duì)各組大鼠每天創(chuàng)面用無(wú)菌生理鹽水進(jìn)行清理后,分別給予低、中、高劑量組三組創(chuàng)面對(duì)應(yīng)紗布濕敷50U/m L、100 U/m L、150U/m L三種濃度重組人促紅細(xì)胞生成素,對(duì)照組創(chuàng)面采用生理鹽水濕敷,每次使用1m L液體濕敷,每日換藥濕敷1次,最長(zhǎng)給藥于傷后14 d停止給藥;(4)記錄:每日拍照,游標(biāo)卡尺測(cè)量創(chuàng)面直徑,紀(jì)錄創(chuàng)面大小,計(jì)算創(chuàng)面愈合率;(5)4組大鼠分別在制模后3d、7d、14d,每個(gè)時(shí)間點(diǎn)每組隨機(jī)取6只大鼠,處死后,在創(chuàng)面與正常組織交界處取組織,留取部分組織作HE染色及免疫組化,部分作免疫蛋白印跡使用;(6)數(shù)據(jù)分析:實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(`x±s)表示,各組間均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)處理,以P0.05為差異具有顯著性。結(jié)果:1.治療7d后,促紅細(xì)胞生成素注射液低、中和高劑量組大鼠創(chuàng)面愈合率較模型對(duì)照組相比均增加,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。而中濃度組和高濃度組與對(duì)照組相比顯著增加,統(tǒng)計(jì)學(xué)意義明顯(P0.001),各組之間比較發(fā)現(xiàn),高濃度組和中濃度組與低濃度組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。高濃度和中濃度組之間相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.顯微鏡下觀察,治療組肉芽組織生長(zhǎng)活躍,主要表現(xiàn)為成纖維細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞增生,新生血管增多,同等治療時(shí)間內(nèi)依次為高劑量組最強(qiáng),中劑量組其次,低劑量組最弱;同等治療時(shí)間內(nèi)的模型組與治療組相比,新生肉芽組織的活躍程度相對(duì)較弱。3.轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGFβ1)在高劑量和中劑量EPO治療組高表達(dá),與對(duì)照組相比有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。其中應(yīng)用到第7天時(shí)所取組織中TGFβ1表達(dá)明顯升高,與對(duì)照組相比統(tǒng)計(jì)學(xué)意義顯著(P0.01)而低劑量EPO治療組轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子在皮膚中表達(dá)與對(duì)照組無(wú)相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4.Western blot方法進(jìn)行Smad3蛋白檢測(cè)結(jié)果顯示:應(yīng)用中、高劑量EPO處理3天時(shí)所取大鼠組織中Smad3蛋白的表達(dá)較對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。而其余組在各時(shí)段所取組織與對(duì)照組組織中Smad3蛋白的表達(dá)無(wú)明顯差異。結(jié)論:1、EPO能夠明顯促進(jìn)創(chuàng)面的愈合,其效果與EPO濃度有關(guān),應(yīng)用100U/ml的EPO即可以達(dá)到最佳效果。2、EPO能夠促進(jìn)創(chuàng)面纖維細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞增生,并隨著濃度的增加作用逐漸增強(qiáng)3、EPO能夠促進(jìn)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGFβ1)的表達(dá)。創(chuàng)面愈合早期最為明顯。4、EPO在創(chuàng)面愈合的早期能夠促進(jìn)Smad3蛋白的表達(dá)。5、EPO促進(jìn)創(chuàng)面愈合的機(jī)制與TGFβ1-Smad3信號(hào)通路有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：急性創(chuàng)面 EPO TGF-β1 Smad3蛋白
【學(xué)位授予單位】：皖南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R641
【目錄】：

• 摘要7-9
• ABSTRACT9-11
• 前言11-13
• 研究材料與方法13-20
• 結(jié)果20-24
• 討論24-27
• 結(jié)論27-28
• 參考文獻(xiàn)28-31
• 綜述31-45
• 參考文獻(xiàn)38-45
• 附圖45-51
• 作者簡(jiǎn)介及讀研期間主要科研成果51-52
• 致謝52-53

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本文編號(hào)：937075