腸三葉因子對(duì)燒傷小鼠腸黏膜免疫功能影響的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2017-08-27 03:36
本文關(guān)鍵詞:腸三葉因子對(duì)燒傷小鼠腸黏膜免疫功能影響的實(shí)驗(yàn)研究
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【摘要】:目的:觀察腸三葉因子(intestinal trefoil factor, ITF)對(duì)燒傷后小鼠腸黏膜免疫功能的影響并探討其可能的機(jī)制。 方法:將108只BALB/c小鼠(體重20-25g),按隨機(jī)數(shù)字表隨機(jī)分為正常對(duì)照(C)組,燒傷對(duì)照(B)組,燒傷+ITF治療(B+I)組。C組只給予麻醉和剃毛,不予燒傷。B組和B+I組均給予90℃水燙傷背部7S,造成小鼠30%體表面積Ⅲ度燒傷。B+I組于燒傷后6h(麻醉清醒后)灌胃給予ITF (1mg/kg.d),每日2次;B組灌胃等體積生理鹽水,每日2次;傷后各組均給予正常飲食及飲水。觀察時(shí)相為傷后24h、48h、72h,每組每時(shí)相點(diǎn)6只小鼠,采用密度梯度離心法提取小鼠腸上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞(intra epithelial lymphocyte, IEL) 1、通過流式細(xì)胞儀檢測(cè)燒傷后IEL表面抗原CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+的比值,觀察各組小鼠腸上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞亞群的變化。 2、將傷后不同時(shí)相小鼠的IEL與腸上皮細(xì)胞株(IEC-6)混合共培養(yǎng)48h后取上清,冷凍干燥保存。采用流式細(xì)胞小球微陣列(Cytometric Beads Array, CBA)技術(shù)檢測(cè)各組共培養(yǎng)上清分泌IL-2、IL-4、IL-5、IFN-y和TNF炎性介質(zhì)含量的變化。 結(jié)果: (1)與C組相比,B組各時(shí)相點(diǎn)IEL CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均減少,傷后24h、72h存在顯著性差異(P0.01);B組各時(shí)相點(diǎn)IEL CD8+均增加,傷后72h存在顯著性差異(P0.01)。與B組相比,B+I組各時(shí)相點(diǎn)IEL CD3+、CD4+、 CD4+/CD8+均有不同程度的增加,72h具有顯著性差異(P0.01);CD8+有所減少,傷后72h差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01) (2)與C組相比,B組共培養(yǎng)細(xì)胞上清分泌的5種炎性介質(zhì)含量均有所增加,其中傷后24h IFN-γ和TNF分泌量明顯增加,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),傷后48h不僅IFN-γ和TNF, IL-4、IL-5也明顯增加(P0.01),傷后72h增幅最為明顯,5種細(xì)胞因子分泌量均明顯高于C組,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);與B組相比,B+I組各時(shí)相點(diǎn)5種炎性介質(zhì)分泌量均有不同程度降低,其中72h測(cè)得B+I組的IL-2. IL-4、TNF明顯降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),IFN-y的變化最明顯(P0.01),IL-5有所下降,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),B+I組較B組雖有不同程度的降低,但仍高于C組。 結(jié)論: (1)嚴(yán)重?zé)齻?腸黏膜免疫屏障被打亂,促使IEL表面抗原轉(zhuǎn)化發(fā)生改變,傷后CD4+下降,CD8+顯著升高,CD4+/CD8+比例明顯下降,出現(xiàn)腸道免疫紊亂,傷后給予ITF能降低CD8+比例,CD4+/CD8+比例恢復(fù)至正常對(duì)照組水平,維護(hù)腸道免疫功能穩(wěn)定; (2)嚴(yán)重?zé)齻?腸道黏膜免疫紊亂,Thl型細(xì)胞因子大量分泌,腸道促炎性反應(yīng)加劇,腸道分泌Th1/Th2型炎性介質(zhì)之間的動(dòng)態(tài)平衡被破壞,ITF通過降低Thl型細(xì)胞因子的分泌,重建Th1/Th2平衡,維護(hù)腸黏膜免疫穩(wěn)態(tài)。
【關(guān)鍵詞】:腸三葉因子 腸道免疫 腸上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞 CD4~+/CD8~+ Th1/Th2 燒傷
【學(xué)位授予單位】:蚌埠醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R644;R574
【目錄】:
- 摘要5-7
- Abstract7-9
- 1. 前言9-11
- 2. 材料與方法11-19
- 3. 結(jié)果19-25
- 4. 討論25-31
- 5. 結(jié)論31-32
- 6. 參考文獻(xiàn)32-36
- 7. 致謝36-37
- 8. 附錄37-51
- 附錄A 附圖37-40
- 附錄B 主要英文縮寫一覽表40-41
- 附錄C 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備41-42
- 附錄D 綜述42-51
- 參考文獻(xiàn)47-51
【參考文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條
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2 張海霞;張丙宏;石磊;;壞死性小腸結(jié)腸炎新生大鼠核因子-κB活性變化及腸三葉因子的干預(yù)作用[J];實(shí)用兒科臨床雜志;2009年07期
3 吳曉娜;蔣紅兵;;流式細(xì)胞術(shù)的工作原理及其臨床應(yīng)用[J];中國醫(yī)療設(shè)備;2011年03期
,本文編號(hào):744201
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