本文關(guān)鍵詞：EGb761對(duì)LPS誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞釋放HMGB1蛋白表達(dá)的調(diào)節(jié)

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【摘要】：目的:探討EGb761對(duì)LPS誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞釋放HMGB1蛋白表達(dá)的調(diào)節(jié),為EGb761的臨床運(yùn)用提供可行的依據(jù)。方法:LPS(1μg/m L)誘導(dǎo)不同時(shí)間后,western blotting檢測(cè)THP-1細(xì)胞上清液中HMGB1蛋白含量變化及不同濃度EGb761對(duì)LPS誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞釋放HMGB1蛋白的表達(dá)和NF-κB的活性;酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)細(xì)胞中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量。共聚焦顯微鏡觀察EGb761對(duì)LPS誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞釋放HMGB1蛋白核轉(zhuǎn)位變化。結(jié)果:(1)LPS組IL-1β、IL-6、TNF-α的含量在刺激6-12 h后明顯高于空白對(duì)照組,而EGb761+LPS組IL-1β、IL-6、TNF-α的含量均顯著低于LPS組(P0.05)。(2)EGb761處理LPS誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞6 h后細(xì)胞上清液NF-κB活性表達(dá)量較空白對(duì)照組低,隨著處理時(shí)間延長(zhǎng)至12 h,NF-κB的活性表達(dá)量呈明顯下降趨勢(shì)(P0.05)。(3)LPS誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞18 h后,細(xì)胞上清液中HMGB1蛋白含量呈明顯升高趨勢(shì)(P0.05)。(4)不同濃度EGb761對(duì)LPS誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞18 h后,HMGB1蛋白含量較空白對(duì)照組有下降趨勢(shì),HMGB1蛋白含量隨著EGB761濃度增加至100μg/m L呈下降趨勢(shì)并呈濃度依賴效應(yīng)(P0.05)。(5)LPS誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞后,在共聚焦顯微鏡下可見(jiàn)胞漿中大量HMGB1蛋白標(biāo)記分布,而EGb761+LPS共同誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞后胞漿中可見(jiàn)少量HMGB1蛋白分布。結(jié)論:LPS可誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞IL-1β、IL-6、TNF-α表達(dá)增多及NF-κB活化,導(dǎo)致HMGB1蛋白表達(dá)增多及核轉(zhuǎn)位,而EGB761能抑制THP-1細(xì)胞IL-1β、IL-6、TNF-α表達(dá)及NF-κB活化,調(diào)節(jié)HMGB1蛋白的表達(dá)及核轉(zhuǎn)位。
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科;廣東休克微循環(huán)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室病理生理學(xué)南方醫(yī)科大學(xué);
【關(guān)鍵詞】： LPS THP-細(xì)胞 EGB HMGB NF-κB(P-)
【分類號(hào)】：R285
【正文快照】： 前言HMGB1為高遷移率族蛋白(high mobility group protein,HMGB1)為細(xì)胞核內(nèi)蛋白,主要參與DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄穩(wěn)定核小體結(jié)構(gòu)等作用[1,2]。HMGB1也是一種在膿毒癥晚期引起多器官衰竭的重要炎性介質(zhì),其自身毒性和結(jié)合促炎因子相互作用是參與和加重膿毒癥晚期器官衰竭的病理生理過(guò)程,

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本文編號(hào)：659366