本文關(guān)鍵詞：CGRP對(duì)大鼠急性心肌梗死后心臟干細(xì)胞募集及其治療作用的實(shí)驗(yàn)研究

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【摘要】：目的 急性心肌梗死后移植干細(xì)胞的治療作用已得到廣泛認(rèn)同，但細(xì)胞移植尚存在諸多問(wèn)題，比如擴(kuò)增周期長(zhǎng)、免疫排斥、存活率低、歸巢量少、不能與宿主細(xì)胞通訊等限制了細(xì)胞移植治療的應(yīng)用。而心臟自身的固有干細(xì)胞（CSC）的特性已在多項(xiàng)研究中得到證實(shí)，若能尋找一種能夠原位激活或募集CSCs的藥物或因子，可能是一種干細(xì)胞治療心肌梗死的新途徑。降鈣素基因相關(guān)肽（CGRP）廣泛分布于血管系統(tǒng)，多項(xiàng)研究證實(shí)其對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等具促增殖和遷移作用，并且能上調(diào)體內(nèi)bFGF、IGF-1、HGF等能調(diào)控CSC生物學(xué)作用的生長(zhǎng)因子。因此，我們?cè)O(shè)想：CGRP對(duì)CSCs是否有類似作用，其心血管保護(hù)作用是否與CSC有一定關(guān)聯(lián)呢？為了回答這一問(wèn)題，本實(shí)驗(yàn)擬在大鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，直接給予CGRP處理，觀察其對(duì)CSC是否具有募集作用，并初步探討其募集CSC的機(jī)制和對(duì)急性心肌梗死的治療作用。 方法 通過(guò)結(jié)扎左前降支建立大鼠急性心肌梗死模型。將104只健康SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、對(duì)照組、CGRP組。假手術(shù)組僅開胸，不結(jié)扎前降支，對(duì)照組在梗死后給予PBS心肌內(nèi)注射，CGRP組在梗死后按10μg/3徯募∧謐⑸銫GRP。各組于3d、7d、14d、28d處死動(dòng)物，每個(gè)時(shí)間點(diǎn)保證每組6只。取得標(biāo)本后，分別作HE、Masson染色、TTC染色觀察心臟形態(tài)學(xué)改變；超聲心動(dòng)圖檢測(cè)心功能；免疫組織化學(xué)觀察心肌內(nèi)血管新生；采用ELISA法檢測(cè)心肌組織內(nèi)VEGF水平；免疫熒光染色觀察CSC募集情況。 結(jié)果 1.術(shù)后4周HE染色顯示假手術(shù)組心肌排列整齊有序，無(wú)瘢痕組織；對(duì)照組大量心肌消失，較多纖維瘢痕組織增生，排列紊亂；CGRP組瘢痕組織明顯比對(duì)照組少，有較多正常心肌細(xì)胞存留。Masson染色顯示，假手術(shù)組心肌細(xì)胞呈紅色，未見藍(lán)染之膠原纖維；對(duì)照組可見大量藍(lán)色膠原纖維，膠原纖維內(nèi)細(xì)胞核溶解消失，存活心肌細(xì)胞少；CGRP組膠原纖維較對(duì)照組明顯減少。 2.術(shù)后4周各組行超聲心動(dòng)圖檢測(cè)LVDd、LVDs、FS和EF值。結(jié)果顯示，與假手術(shù)組相比，對(duì)照組及CGRP組的LVDd和LVDs均增大，F(xiàn)S和EF減低；給予CGRP組較對(duì)照組以上心功能指標(biāo)明顯改善（P0.05）。 3. TTC染色顯示，假手術(shù)組未見梗死區(qū)，而對(duì)照組梗死面積較大，為（31.72±4.00）%；與對(duì)照組相比，CGRP組梗死面積明顯縮小，為（22.54±1.73）%（P0.05）。 4.免疫組織化學(xué)染色計(jì)數(shù)各組新生微血管結(jié)果提示，心肌梗死后梗死周圍區(qū)毛細(xì)血管較假手術(shù)組增加（P0.01），，而CGRP較對(duì)照組增加更明顯（P0.01）. 5. ELISA法檢測(cè)心肌組織VEGF水平，對(duì)照組和CGRP組較假手術(shù)組于3天即明顯升高，7天達(dá)高峰，14天下降，28天時(shí)降至假手術(shù)組水平。其中在3、7、14天，CGRP組VEGF水平較對(duì)照組明顯增加（P0.05） 6.免疫熒光染色檢測(cè)CSC募集情況，結(jié)果提示，對(duì)照組和CGRP組CSC細(xì)胞數(shù)在第3天即增加，7天達(dá)高峰，14天明顯減少。其中，各時(shí)間點(diǎn)中對(duì)照組較假手術(shù)組CSC細(xì)胞數(shù)明顯增多（P0.05），CGRP組較對(duì)照組則增加更明顯（P0.05）。 結(jié)論 1. CGRP可誘導(dǎo)心肌VEGF高表達(dá)，促進(jìn)血管生成，減少梗死面積，改善左室重構(gòu)和心功能，對(duì)急性心肌梗死具有治療作用。 2. CGRP可促進(jìn)急性心肌梗死后CSCs在梗死區(qū)域募集，并在第7天達(dá)高峰,其機(jī)制可能與VEGF有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：降鈣素基因相關(guān)肽 心臟干細(xì)胞 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 心肌梗死
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R542.22
【目錄】：

• 中英文縮略詞表4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-12
• 實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線圖12-13
• 材料與方法13-20
• 結(jié)果20-28
• 討論28-33
• 結(jié)論33
• 研究局限性及展望33-34
• 參考文獻(xiàn)34-38
• 綜述：固有心臟干細(xì)胞與心肌再生的研究進(jìn)展38-48
• 參考文獻(xiàn)44-48
• 致謝48-49
• 作者簡(jiǎn)介49

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：574767