本文關鍵詞：骨髓間充質干細胞對急性肝衰竭大鼠腸道屏障保護作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究目的： 本課題采用貼壁培養(yǎng)法分離純化大鼠BMSCs,探討尾靜脈移植BMSCs對急性肝衰竭大鼠腸道屏障的作用。 研究方法： 1.分離、培養(yǎng)、鑒定大鼠BMSCs； 2.制備不同TAA劑量誘導下急性肝衰竭腸道屏障損傷大鼠模型,觀察死亡率,制作肝臟和回腸組織HE染色病理切片,選定TAA造模合適劑量； 3.制備急性肝衰竭腸道屏障損傷大鼠模型,干預組經尾靜脈輸入Brdu標記的BMSCs,模型組輸入PBS液。于24h、48h、72h和96h分別處死大鼠,取腹主動脈血和回腸組織,檢測內毒素、二胺氧化酶、TNF-α和IL-6水平及變化,制作回腸組織HE染色病理切片和冰凍切片； 4.設立干預死亡率觀察組和模型死亡率觀察組,觀察大鼠死亡率。 研究結果： 1.所培養(yǎng)細胞呈均一梭形,漩渦狀排列；具有對塑料底物黏附性；表達細胞表型CD29,不表達造血細胞表型CD34；體外具有分化為脂肪細胞的能力,且增殖能力強,可鑒定為BMSCs； 2.采用不同劑量TAA灌胃造模均可造成肝損傷,同時伴有腸道屏障損傷,300mg/(kg-d)是大鼠急性肝衰竭伴腸道屏障損傷模型建立的適宜造模劑量； 3.BMSCs可成功定植在大鼠受損腸道組織中； 4.干預組和模型組血漿內毒素、二胺氧化酶、TNF-α和IL-6水平均明顯升高(P0.05)；除干預組二胺氧化酶48h與24h比較,無明顯升高外(P0.05),干預組和模型組內毒素、二胺氧化酶、TNF-α和IL-6水平隨時間增加不斷升高(P0.05)；24h干預組與模型組內毒素水平無明顯差異(P0.05),而48h、72h和96h,干預組內毒素水平明顯低于模型組(P0.05)；24h和48h干預組與模型組二胺氧化酶水平無明顯差異(P0.05),而72h和96h,干預組二胺氧化酶水平明顯低于模型組(P0.05)；在4個時間點,干預組TNF-α和IL-6水平均明顯低于模型組(P0.05)； 5.模型死亡率觀察組死亡率為52%,高于干預死亡率觀察組(P0.05)； 6.回腸組織Western blot結果,48h干預組與模型組IL-6水平無明顯差異(P0.05),干預組TNF-α水平明顯低于模型組(P0.05)。96h干預組TNF-α和IL-6水平均明顯低于模型組(P0.05)； 7.干預組回腸組織病變程度比模型組更輕。研究結論： 1.貼壁培養(yǎng)法可獲得較高純度的BMSCs,并可最大限度保持細胞的活性； 2.TAA灌胃的適宜劑量為300mg/(kg-d),能成功建立急性肝衰竭腸道屏障損傷模型; 3.BMSCs可經大鼠尾靜脈移植,早期進入腸道受損部位,為受損腸道屏障的修復,提供重要基礎條件； 4.BMSCs經大鼠尾靜脈移植,可明顯降低急性肝衰竭大鼠血漿內毒素及二胺氧化酶水平,同時可以降低血漿和腸組織中TNF-α和IL-6等炎癥因子水平,減輕腸道器質性損傷,降低死亡率,表明BMSCs早期移植干預,對急性肝衰竭大鼠腸道屏障損傷具有明顯的保護作用。
【關鍵詞】：骨髓間充質干細胞 急性肝衰竭 腸道屏障 保護
【學位授予單位】：昆明醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R575.3
【目錄】：

• 英文~.略詞表5-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-11
• 前言11-12
• 第一部分 大鼠BMSCs的分離、培養(yǎng)及鑒定12-20
• 實驗材料12-14
• 實驗方法14-16
• 實驗結果16-20
• 第二部分 大鼠急性肝衰竭腸道屏障損傷模型的建立20-24
• 實驗材料20
• 實驗方法20-21
• 實驗結果21-24
• 第三部分 大鼠BMSCs腸道組織內示蹤及對ALF大鼠腸道屏障保護作用的研究24-47
• 實驗材料24-26
• 實驗方法26-30
• 實驗結果30-47
• 討論47-56
• 結論56-57
• 參考文獻57-63
• 文獻綜述63-71
• 參考文獻68-71
• 攻讀學位期間發(fā)表文章71-72
• 致謝72

【參考文獻】

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  本文關鍵詞：骨髓間充質干細胞對急性肝衰竭大鼠腸道屏障保護作用的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：499478