嚴(yán)重燙傷早期主要臟器自噬變化的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2017-06-24 05:01
本文關(guān)鍵詞:嚴(yán)重燙傷早期主要臟器自噬變化的實(shí)驗(yàn)研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:自噬是真核細(xì)胞內(nèi)通過單層或雙層膜包裹待降解物形成自噬體,而后與溶酶體結(jié)合形成自噬溶酶體對(duì)包裹物進(jìn)行降解,降解產(chǎn)物被細(xì)胞再循環(huán)利用的過程。它是真核細(xì)胞適應(yīng)營(yíng)養(yǎng)或生長(zhǎng)因子缺乏、低氧、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激等有害刺激所發(fā)生的一種應(yīng)激反應(yīng),生理狀態(tài)下參與維持蛋白代謝平衡、細(xì)胞和機(jī)體的自身穩(wěn)態(tài)。嚴(yán)重?zé)齻髾C(jī)體啟動(dòng)全身應(yīng)激系統(tǒng)及應(yīng)答反應(yīng),從而引起機(jī)體固有生理反應(yīng)失衡和一系列炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激損傷、免疫功能改變等病理變化,同時(shí)牽涉各重要臟器結(jié)構(gòu)和功能的變化,嚴(yán)重者可誘發(fā)多器官功能不全綜合癥(MODS)等。自噬作為不同于細(xì)胞壞死和凋亡的第三種細(xì)胞死亡方式——自噬性細(xì)胞死亡,是否參與嚴(yán)重?zé)齻碳に鸬囊幌盗胁±砩碜兓?是否在?yán)重?zé)齻笈K器的結(jié)構(gòu)與功能的變化中發(fā)揮著怎樣的作用?就目前的研究資料而言,這些問題的答案尚未不清楚。因此,本課題旨在通過研究嚴(yán)重?zé)齻∈髠笤缙诓煌瑫r(shí)間點(diǎn)時(shí)主要臟器自噬水平的變化,初步闡明嚴(yán)重?zé)齻缙诟髦饕K器自噬水平變化規(guī)律,為深入研究嚴(yán)重?zé)齻笈K器功能損害的發(fā)生機(jī)制與防治措施提供新的思路。 方法: 1.以BALB/C小鼠為研究對(duì)象,建立30%TBSA的Ⅲ度燙傷模型,分別于燙傷前(正常對(duì)照)及燙傷后1h、2h、6h、12h、24h采集小鼠心、肝、肺、腎臟器組織標(biāo)本。 2.提取各時(shí)相點(diǎn)各實(shí)驗(yàn)小鼠心、肝、肺、腎臟器組織標(biāo)本總蛋白,用蛋白免疫印跡檢測(cè)自噬相關(guān)蛋白Beclin1、LC3表達(dá)量及其變化,以反映燒傷后各時(shí)相點(diǎn)不同臟器的自噬相關(guān)分子水平的表達(dá)變化。 3.將燙傷小鼠心、肝、肺、腎臟器組織標(biāo)本制備后于透射電鏡下觀察各臟器自噬現(xiàn)象及其變化情況。 結(jié)果: 1.與傷前相比較,燙傷后1h各臟器Beclin1蛋白表達(dá)即開始有所增加,,尤以肝臟增加明顯;隨后均呈現(xiàn)出逐漸緩慢上升趨勢(shì),多在傷后12h達(dá)高峰。但在傷后24h時(shí),四種臟器Beclin1蛋白表達(dá)卻出現(xiàn)不同的變化,心臟組織Beclin1表達(dá)繼續(xù)升高,而肝、肺、腎組織Beclin1表達(dá)則較12h明顯回落,但仍高于傷前。 2.燙傷后1h四種臟器組織LC3蛋白表達(dá)均較傷前有所增加,以腎臟增加明顯;隨著時(shí)間的延長(zhǎng),也大多呈逐漸上升趨勢(shì),但以腎臟的上升幅度為最大,也多于傷后12h達(dá)高峰。傷后24h時(shí)四種臟器LC3表達(dá)也呈現(xiàn)不同的變化,心臟組織LC3表達(dá)繼續(xù)較12h增加,而肝、肺、腎組織LC3表達(dá)則較12h降低,但仍高于傷前水平。 3.透射電鏡觀察燙傷前后心、肝、肺、腎組織細(xì)胞自噬變化的結(jié)果顯示,燙傷后6h時(shí)心、肝、肺、腎組織胞內(nèi)均出現(xiàn)自噬溶酶體增多,明顯多于傷前水平,表明臟器組織細(xì)胞自噬水平增加。 結(jié)論: 1.嚴(yán)重燙傷后各主要臟器的自噬水平較正常對(duì)照明顯升高,且自噬水平隨傷后時(shí)間的推移有逐漸升高的趨勢(shì)。 2.嚴(yán)重燙傷后各主要臟器的自噬水平隨時(shí)間變化趨勢(shì)有所不同,肝、肺、腎自噬水平于傷后持續(xù)升高,于12小時(shí)達(dá)到高峰,24h回落,而心臟自噬水平于傷后24h呈持續(xù)升高狀態(tài)。嚴(yán)重燙傷后自噬水平的升高可能參與了臟器功能損害的發(fā)生。
【關(guān)鍵詞】:燙傷 自噬 內(nèi)臟 Beclin1 LC3
【學(xué)位授予單位】:瀘州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R644
【目錄】:
- 摘要4-6
- Abstract6-9
- 前言9-12
- 材料與方法12-17
- 1 主要實(shí)驗(yàn)試劑和耗材12
- 2 主要實(shí)驗(yàn)儀器12-13
- 3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型及分組13
- 4 實(shí)驗(yàn)方法及操作步驟13-16
- 5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析16-17
- 結(jié)果17-24
- 1 燙傷后各臟器組織自噬相關(guān)蛋白 Beclin 1 蛋白表達(dá)的變化17-19
- 2 燙傷后各臟器組織自噬相關(guān)蛋白 LC3 蛋白表達(dá)的變化19-23
- 3 透射電子顯微鏡觀察燙傷后各臟器組織自噬變化23-24
- 討論24-27
- 結(jié)論27-28
- 參考文獻(xiàn)28-32
- 英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照32-33
- 致謝33-34
- 綜述34-50
- 參考文獻(xiàn)45-50
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條
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本文編號(hào):477116
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