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褪黑激素對增生性瘢痕形成影響的動物實驗研究

發(fā)布時間:2017-06-23 19:09

  本文關鍵詞:褪黑激素對增生性瘢痕形成影響的動物實驗研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:研究目的:建立動物模型研究褪黑激素對增生性瘢痕的影響。研究方法:1.建立兔耳增生性瘢痕動物模型,設褪黑素實驗組及空白對照組。實驗組:每天腹腔內注射褪黑激素,給予劑量為5.0mg/kg(按體重計算,動物需注射褪黑激素溶液在10.2ml—13.4ml之間);空白對照組:每天腹腔內注射等量生理鹽水。參照褪黑素生物學作用設計給藥時間為每晚8點左右。飼養(yǎng)6星期后,記錄拍照、收集瘢痕組織、固定標本。2.記錄創(chuàng)面愈合時間,觀察創(chuàng)面的水腫、出血及分泌物的多少,評估炎癥反應程度;按瘢痕凸出正常皮膚表面厚度、顏色及硬度評價瘢痕增生程度。3.標本切片后,用HE染色組織后拍照,圖像用Image-Pro Plus6.0軟件測量瘢痕厚度,分析實驗組及對照組差異。4.使用天狼星紅染色后拍照,圖像用Image-Pro Plus6.0軟件測量膠原所占面積百分比,對比兩組差異。5.使用免疫組化法染色后拍照,圖像用Image-Pro Plus6.0軟件測量α-SMA蛋白所占面積百分比,對照兩組差異。6.采用Western-blot檢測褪黑激素對TGF-β1蛋白分泌的影響。結果:結果表明實驗組在術后第3天時創(chuàng)面分泌物減少、紅腫消退,而對照組分泌物仍較多,水腫未完全消退。實驗組在術后第19天時痂皮脫落、創(chuàng)面愈合;對照組23天時痂皮脫落、創(chuàng)面愈合。第42天時觀察瘢實驗組痕增生程度明顯低于對照組。實驗組瘢痕組織厚度為920.30±227.56μm,對照組厚度為1033.10±263.59μm,對照組瘢痕增生程度強于實驗組(P0.05)。實驗組Ⅰ型膠原含量0.115±0.051%,對照組Ⅰ型膠原含量為0.148±0.043%;Ⅲ型膠原含量實驗組為0.145±0.041%,對照組含量為0.121±0.034%。實驗組Ⅰ型膠原含量低于對照組(P0.05),實驗組Ⅲ型膠原含量高于對照組(P0.05)。實驗組α-SMA含量0.136±0.014%,對照組α-SMA含量為0.255±0.015%,對照組α-SMA含量高于實驗組(P0.05)(實驗組低于對照組)。實驗組中TGF-β1蛋白含量0.310±0.060,對照組TGF-β1蛋白含量0.65±0.04,實驗組TGF-β1蛋白含量明顯低于對照組(P0.05)。結論:實驗結果可以證明褪黑激素縮短創(chuàng)面愈合時間,調節(jié)Ⅰ、Ⅲ型膠原含量比例,降低TGF-β1蛋白含量,減少成纖維細胞向肌成纖維細胞轉化的作用。證明褪黑激素能夠減輕瘢痕增生。
【關鍵詞】:增生性瘢痕 褪黑激素 兔耳瘢痕模型 轉化生長因子-β1(TGF-β1) 平滑肌肌動蛋白-α(α-SMA) Ⅰ型膠原 Ⅲ型膠原
【學位授予單位】:暨南大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2014
【分類號】:R641
【目錄】:
  • 中文摘要3-5
  • 英文摘要5-8
  • 前言8-13
  • 實驗材料及方法13-23
  • 動物模型13-14
  • 1 實驗材料13
  • 2 實驗方法13-14
  • 標本染色14-23
  • 1 主要實驗試劑14-15
  • 2 主要實驗設備15-17
  • 3 操作步驟17-23
  • 實驗結果23-29
  • 討論29-32
  • 結論32-33
  • 參考文獻33-36
  • 中英文縮略詞對照表36-37
  • 攻讀期間取得成果37-38
  • 致謝38

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