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生物電對(duì)表皮干細(xì)胞促進(jìn)創(chuàng)面愈合作用的影響

發(fā)布時(shí)間:2016-11-11 13:27

  本文關(guān)鍵詞:生物電對(duì)表皮干細(xì)胞促進(jìn)創(chuàng)面愈合作用的影響,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目前研究人員認(rèn)為創(chuàng)面修復(fù)是創(chuàng)傷修復(fù)的重點(diǎn),大面積及難愈性創(chuàng)面的修復(fù)是臨床治療的難點(diǎn)。如何促進(jìn)創(chuàng)面愈合、減少并發(fā)癥的發(fā)生、達(dá)到功能修復(fù)是目前創(chuàng)面修復(fù)亟待解決的問題。干細(xì)胞治療和組織工程學(xué)的興起給創(chuàng)面修復(fù)帶來了新的治療思路和策略,如何獲得滿意的“種子細(xì)胞”是其關(guān)鍵。表皮干細(xì)胞是皮膚及其附屬器發(fā)生和再生的重要來源,在皮膚創(chuàng)面修復(fù)中發(fā)揮重要作用。研究顯示表皮干細(xì)胞具有巨大的臨床應(yīng)用前景,但表皮干細(xì)胞位于表皮基底層,僅占基底細(xì)胞中的1%~10%,甚至更低。目前采用的分離培養(yǎng)方法分離得到的細(xì)胞數(shù)量較少,且培養(yǎng)周期長(zhǎng),多次傳代培養(yǎng)后細(xì)胞不可避免的出現(xiàn)克隆形成率明顯下降、細(xì)胞逐漸分化、增殖活性降低等缺點(diǎn)。體外培養(yǎng)時(shí),如何快速擴(kuò)增表皮干細(xì)胞,甚至在提高表皮干細(xì)胞擴(kuò)增速度的同時(shí)維持表皮干細(xì)胞的干細(xì)胞特性,已成為表皮干細(xì)胞臨床應(yīng)用亟待解決的問題。創(chuàng)面的正常愈合離不開創(chuàng)面內(nèi)生物電場(chǎng)的調(diào)控作用,創(chuàng)面不同區(qū)域內(nèi)上皮細(xì)胞增殖程度與傷口內(nèi)生物電場(chǎng)強(qiáng)度分布呈正相關(guān)。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn),大鼠皮膚創(chuàng)面存在從創(chuàng)面中心向創(chuàng)緣流動(dòng)的外向性電流,并且增強(qiáng)該電流可促進(jìn)創(chuàng)面愈合;體外實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),生物電刺激表皮干細(xì)胞后,表皮干細(xì)胞K14、K19、α6-integrin和β1-integrin的表達(dá)增強(qiáng),提示一定強(qiáng)度的生物電刺激,可維持甚至增強(qiáng)表皮干細(xì)胞的干性;表皮干細(xì)胞K10表達(dá)減弱,說明一定強(qiáng)度的生物電刺激,不會(huì)促使表皮干細(xì)胞發(fā)生分化;表皮干細(xì)胞干性轉(zhuǎn)錄因子mRNA表達(dá)無明顯減少,提示一定強(qiáng)度的生物電場(chǎng)在維持表皮干細(xì)胞干性特征方面具有保護(hù)作用。這一結(jié)果讓我們意識(shí)到,生物電或許能夠成為解決表皮干細(xì)胞體外快速擴(kuò)增,同時(shí)保持其干細(xì)胞特性的關(guān)鍵。因此本研究探討了生物電對(duì)體外培養(yǎng)表皮干細(xì)胞生物學(xué)特性的影響,進(jìn)而研究了生物電對(duì)表皮干細(xì)胞促進(jìn)創(chuàng)面愈合作用的影響。本研究中,我們首先建立了內(nèi)源性生物電場(chǎng)模擬平臺(tái)。隨后我們將分離培養(yǎng)的1代表皮干細(xì)胞接種于內(nèi)源性生物電場(chǎng)模擬平臺(tái)中培養(yǎng),觀察不同強(qiáng)度生物電(100m V/mm、200 mV/mm)對(duì)表皮干細(xì)胞增殖、遷移的影響。最后我們觀察了經(jīng)生物電刺激后的表皮干細(xì)胞應(yīng)用于創(chuàng)面移植后對(duì)創(chuàng)面修復(fù)的效果。本研究的主要發(fā)現(xiàn)如下:1、采用Ⅳ型膠原差速貼壁法篩選純化表皮干細(xì)胞(EpSCs),K-sfm培養(yǎng)基培養(yǎng)的方法能夠成功的在體外培養(yǎng)表皮干細(xì)胞。2、體外培養(yǎng)時(shí),適當(dāng)強(qiáng)度的生物電刺激能夠促進(jìn)表皮干細(xì)胞增殖。3、體外培養(yǎng)時(shí),生物電能夠引導(dǎo)表皮干細(xì)胞向陰極定向遷移,遷移速率隨著電場(chǎng)強(qiáng)度增強(qiáng)而增快。4、表皮干細(xì)胞應(yīng)用于創(chuàng)面移植治療能有效地加速創(chuàng)面上皮化,提高創(chuàng)面愈合率,縮短創(chuàng)面愈合時(shí)間,改善創(chuàng)面修復(fù)質(zhì)量、結(jié)局。5、生物電刺激后的表皮干細(xì)胞移植治療顯示出較單純表皮干細(xì)胞移植更好的促愈效果和修復(fù)結(jié)局。為臨床表皮干細(xì)胞移植治療提供了一種更為有效的處理手段。


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本文編號(hào):170943

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