本文關(guān)鍵詞：治療性低溫對(duì)窒息大鼠心肺復(fù)蘇后海馬神經(jīng)細(xì)胞活性氧及凋亡和自噬的影響

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【摘要】：目的：觀察治療性低溫（TH）對(duì)窒息致心臟驟停（CA）大鼠自主循環(huán)恢復(fù)（ROSC）后其海馬神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)活性氧（ROS）產(chǎn)生量和神經(jīng)功能的關(guān)系；并觀察低溫對(duì)大鼠海馬凋亡相關(guān)基因caspase-3mRNA，自噬相關(guān)蛋白LC3B和線粒體自噬標(biāo)志物Parkin表達(dá)的影響。 方法：65只健康成年雄性SD大鼠隨機(jī)分為2組：空白對(duì)照組（BC，n=5）和心肺復(fù)蘇組（CPR，n=60）。CPR組制作窒息法心肺復(fù)蘇模型，在ROSC后再隨機(jī)分為2組：常溫CPR組（NT）和低溫CPR組（HT）。NT組在ROSC后保持37℃恒溫，HT組在ROSC后立即行低溫32℃干預(yù)4小時(shí)。根據(jù)觀察時(shí)點(diǎn)的不同，再將兩組CPR組隨機(jī)分2個(gè)亞組：即ROSC后12小時(shí)和24小時(shí)組（NT-12，NT24，HT-12，HT-24）。到達(dá)觀察時(shí)點(diǎn)先對(duì)存活大鼠進(jìn)行神經(jīng)功能缺損評(píng)分（NDS），，然后立即取雙側(cè)海馬組織，應(yīng)用流式法檢測(cè)大鼠海馬單細(xì)胞懸液ROS水平。利用透射電鏡觀察海馬神經(jīng)細(xì)胞細(xì)胞核和線粒體的超微結(jié)構(gòu)形態(tài)學(xué)變化。利用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）技術(shù)測(cè)定海馬神經(jīng)細(xì)胞caspase-3mRNA的表達(dá)水平；蛋白免疫印跡法（WB）測(cè)定海馬神經(jīng)細(xì)胞LC3B和Parkin蛋白水平。應(yīng)用SPSS19.0軟件包，計(jì)量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩組間均數(shù)比較用成組t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析LSD-t檢驗(yàn)。 結(jié)果：60只大鼠中有44只（73%）成功ROSC，存活到觀察時(shí)點(diǎn)的有33只大鼠（55%）。NT和HT組各時(shí)點(diǎn)的NDS明顯低于BC組（F=8.107, P0.05），HT-12和HT-24組的NDS與相同時(shí)點(diǎn)的NT組比較有顯著提高（t=9.692, P0.001; t=14.374,P0.001）。NT和HT組各時(shí)點(diǎn)的ROS產(chǎn)生量明顯高于BC組（F=16.824, P0.05），而HT-12和HT-24組的升高程度則明顯低于相同時(shí)點(diǎn)的NT組大鼠（t=9.836, P0.001;t=7.499, P0.001）。NT和HT組各時(shí)點(diǎn)的caspase-3mRNA表達(dá)量明顯高于BC組（F=24.527, P0.05），而HT-12和HT-24組的升高程度則明顯低于相同時(shí)點(diǎn)的NT組大鼠（t=6.935, P0.001; t=4.317, P0.001）。NT和HT組各時(shí)點(diǎn)的LC3B-II/I表達(dá)量明顯高于BC組（F=6.584, P0.05），而HT-12和HT-24組的升高程度則明顯低于相同時(shí)點(diǎn)的NT組大鼠（t=10.836, P0.001; t=2.653, P=0.02）。NT和HT組各時(shí)點(diǎn)的Parkin表達(dá)量明顯高于BC組（F=4.126, P0.05），而HT-12和HT-24組的升高程度則明顯低于相同時(shí)點(diǎn)的NT組大鼠（t=4.027, P=0.001; t=5.505, P0.001）。NT組海馬神經(jīng)細(xì)胞核和線粒體的形態(tài)學(xué)變化較BC組有明顯改變，HT組海馬神經(jīng)細(xì)胞核和線粒體與相同時(shí)點(diǎn)NT組比較損傷有所減輕。 結(jié)論：治療性低溫能減輕ROSC后大鼠腦神經(jīng)細(xì)胞損傷并提高其神經(jīng)功能，其機(jī)制之一可能是減少了CPR后大鼠神經(jīng)細(xì)胞活性氧蓄積量，并通過(guò)抑制caspase-3、LC3B和Parkin的表達(dá)使神經(jīng)細(xì)胞凋亡和包括線粒體自噬在內(nèi)的胞內(nèi)自噬減少。
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R459.7

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

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本文編號(hào)：1262140