本文關(guān)鍵詞：人胎盤(pán)絨毛間充質(zhì)干細(xì)胞在大鼠急性心肌梗死修復(fù)中的作用的實(shí)驗(yàn)研究

  更多相關(guān)文章： 人胎盤(pán)絨毛膜間充質(zhì)干細(xì)胞 心肌梗死 細(xì)胞移植 修復(fù)

【摘要】：目的：人胎盤(pán)絨毛膜間充質(zhì)干細(xì)胞(Chorionic Mesenchymal stem cells, CMSCs)在體外適宜的培養(yǎng)條件下，容易擴(kuò)增、具有向多種細(xì)胞分化的能力，且易形成毛細(xì)血管樣結(jié)構(gòu)，，使之成為心肌修復(fù)組織工程理想的種子細(xì)胞。本實(shí)驗(yàn)在建立大鼠心肌梗死模型兩周后，經(jīng)開(kāi)胸在左心室壁梗死區(qū)及邊緣區(qū)注射人CMSCs，觀察其改善心功能的效果，進(jìn)一步探討其作用機(jī)制。 方法：選取剖腹產(chǎn)足月胎兒的胎盤(pán)，分離培養(yǎng)CMSCs細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)CMSCs細(xì)胞表型、特異性染色檢測(cè)CMSCs三系分化潛能、毛細(xì)血管形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)CMSCs體外成血管能力；實(shí)驗(yàn)采用結(jié)扎大鼠左冠狀動(dòng)脈前降支的方法建立大鼠急性心肌梗死模型，建模成功兩周后，開(kāi)胸在心室壁梗死區(qū)及邊緣區(qū)行細(xì)胞移植。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為四組：A（Sham組），僅開(kāi)胸經(jīng)冠狀動(dòng)脈下帶線不予結(jié)扎；B組（Control組），手術(shù)結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支；C組（BMSCs移植組），開(kāi)胸在心臟梗死區(qū)及邊緣區(qū)注射人BMSCs細(xì)胞；D組（CMSCs移植組），開(kāi)胸在心臟梗死區(qū)及邊緣區(qū)注射人CMSCs細(xì)胞。細(xì)胞移植四周后，超聲心動(dòng)圖檢查觀察大鼠心臟功能的改善情況、免疫組化檢測(cè)移植GFP+的CMSCs細(xì)胞在大鼠局部心梗區(qū)分化為內(nèi)皮細(xì)胞及毛細(xì)血管的新生情況。 結(jié)果：1.流式細(xì)胞檢測(cè)表明，培養(yǎng)的P3代CMSCs高表達(dá)CD73、CD90、CD105以及VEGF受體1（KDR），不表達(dá)血系細(xì)胞標(biāo)志CDl4、CD34、CD45、HLA-DR。2.三系分化潛能測(cè)定表明CMSCs具有和BMSCs相似的分化潛能，經(jīng)成骨誘導(dǎo)后vonKossa染色可見(jiàn)細(xì)胞呈集落生長(zhǎng)并出現(xiàn)鈣結(jié)節(jié)；經(jīng)成脂肪誘導(dǎo)，細(xì)胞內(nèi)有明顯的脂滴出現(xiàn)，油紅O染色陽(yáng)性；經(jīng)成軟骨誘導(dǎo)，甲苯胺藍(lán)染色可見(jiàn)細(xì)胞被染成藍(lán)色，同時(shí)CMSCs較BMSCs具有良好的成血管能力；3. Masson染色結(jié)果顯示：心梗區(qū)大量心肌細(xì)胞壞死，消失，被膠原纖維取代后而染成藍(lán)色， CMSCs細(xì)胞移植組梗死區(qū)膠原纖維和彈性纖維均明顯減少，僅在心外膜見(jiàn)到少量彈性纖維。4.免疫熒光顯微鏡觀察，細(xì)胞移植4周后，局部心梗區(qū)仍有GFP+的CMSCs細(xì)胞存活。5.免疫組化染色結(jié)果表明，CMSCs細(xì)胞在大鼠心梗區(qū)分化并表達(dá)CD31及Ⅷ因子；6.心超結(jié)果提示，各組相比GFP+的CMSCs細(xì)胞移植組心臟左室舒張末內(nèi)徑（LVEDd）、左室收縮末內(nèi)徑(LVEDs)明顯減小，而心室射血分?jǐn)?shù)(EF)、縮短分?jǐn)?shù)（FS%)則明顯升高，心功能明顯改善，實(shí)驗(yàn)結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 結(jié)論：（1）CMSCs具有和BMSCs相似的分化潛能，同時(shí)具有良好的體外成血管能力，以及較強(qiáng)的體內(nèi)毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞分化能力；（2）經(jīng)開(kāi)胸心臟梗死區(qū)及邊緣區(qū)行CMSCs直接移植對(duì)大鼠急性心梗死后心功能恢復(fù)效果顯著；（3）CMSCs細(xì)胞可在大鼠心臟梗死區(qū)分化為內(nèi)皮細(xì)胞，參與局部毛細(xì)血管新生，從而改善大鼠心功能，此為CMSCs細(xì)胞參與大鼠急性心梗修復(fù)的可能機(jī)制之一。
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R542.22

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 李娜;鄒麗云;萬(wàn)瑛;張晉宇;劉婷;李景怡;吳玉章;;siRNA沉默Rac2蛋白表達(dá)下調(diào)樹(shù)突狀細(xì)胞的交叉遞呈[J];免疫學(xué)雜志;2008年03期

2 張文元,楊亞冬,賀晨,陳勇;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性及在組織修復(fù)中的應(yīng)用[J];中國(guó)臨床康復(fù);2004年26期

3 穆曉紅;徐林;趙子義;李小平;陳江;;人胎盤(pán)與骨髓源性間充質(zhì)干細(xì)胞體外培養(yǎng)及生物學(xué)特性對(duì)比[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2009年19期

4 ;Bone marrow mesenchymal stem cell transplantation combined with perindopril treatment attenuates infarction remodelling in a rat model of acute myocardial infarction[J];Journal of Zhejiang University Science(Life Science);2006年08期

5 奚永志,唐佩弦;深入開(kāi)展臍血干細(xì)胞的基礎(chǔ)與臨床研究[J];中華血液學(xué)雜志;1999年08期

本文編號(hào)：1170035