發(fā)布時(shí)間：2017-08-23 15:29

  本文關(guān)鍵詞：結(jié)直腸癌中RNF43基因突變的病理意義

  更多相關(guān)文章： 結(jié)直腸癌 RNF43 微衛(wèi)星不穩(wěn)定

【摘要】：結(jié)直腸癌是嚴(yán)重威脅人類健康的惡性消化道腫瘤之一,對(duì)結(jié)直腸癌發(fā)病機(jī)制以及防治策略的研究具有十分重要的現(xiàn)實(shí)意義。在經(jīng)典的正常上皮-腺瘤-腺癌序列中Wnt通路激活是重要的早期環(huán)節(jié),對(duì)Wnt通路信號(hào)強(qiáng)度調(diào)控的研究有助于闡明結(jié)直腸癌的發(fā)病機(jī)制。環(huán)指蛋白43(Ring finger protein 43, RNF43)是Wnt信號(hào)通路中重要的負(fù)向調(diào)控因子之一,具有清除細(xì)胞膜Wnt受體以及阻滯TCF4 (T cell factor 4)入核的功能,在通路中發(fā)揮Wnt信號(hào)抑制作用。RNF43的異常表達(dá)、突變等改變對(duì)Wnt信號(hào)通路的活化程度有重大影響,與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有密切聯(lián)系,在臨床可能具有較為重要的意義。有研究報(bào)道RNF43的突變?cè)诟哳l微衛(wèi)星不穩(wěn)定(High-frequency microsatellite instability,MSI-H)的腫瘤中發(fā)生頻率較高,其突變情況與微衛(wèi)星不穩(wěn)定性相關(guān)。RNF43的截短突變絕大多數(shù)發(fā)生在MSI-H情況下且與APC突變極少同時(shí)發(fā)生。這提示RNF43功能缺失對(duì)Wnt通路激活程度的影響很可能是MSI類型結(jié)直腸癌發(fā)生機(jī)制中重要的一環(huán),對(duì)其基因突變情況及微衛(wèi)星不穩(wěn)定情況的綜合分析可能有助于闡明其在臨床的功能效應(yīng)。對(duì)比在微衛(wèi)星穩(wěn)定／微衛(wèi)星不穩(wěn)定病例中RNF43基因的改變情況與臨床參數(shù)、預(yù)后之間的差異,有助于尋找新的預(yù)測(cè)標(biāo)志物、為個(gè)體化治療提供指導(dǎo),具有重要的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值和理論意義。KRAS/BRAF的突變狀態(tài)與微衛(wèi)星不穩(wěn)定狀態(tài)均可以作為預(yù)測(cè)預(yù)后的指標(biāo),且均與耐藥存在關(guān)聯(lián),因此我們還對(duì)其與KRAS/BRAF突變狀態(tài)的關(guān)聯(lián)進(jìn)行了分析,以深入探討RNF43對(duì)預(yù)后可能存在的效應(yīng)。本次研究選取的446例散發(fā)性結(jié)直腸癌樣本均取自經(jīng)福爾馬林固定-石蠟包埋的患者手術(shù)切除組織。RNF43的基因外顯子區(qū)段存在多個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn),根據(jù)RNF43突變與微衛(wèi)星不穩(wěn)定性的相關(guān)性推測(cè),這些位點(diǎn)可能具有較高的突變率。因此我們先篩選出RNF43外顯子序列上存在的這些微衛(wèi)星位點(diǎn)并設(shè)計(jì)了針對(duì)性引物,在提取樣本基因組DNA后,用PCR方法對(duì)這些微衛(wèi)星區(qū)段進(jìn)行擴(kuò)增,并使用Sanger測(cè)序方法對(duì)這些位點(diǎn)的突變情況進(jìn)行了檢測(cè)。之后我們運(yùn)用SPSS軟件(version 20)分析了這些病例中RNF43突變與微衛(wèi)星不穩(wěn)定性狀態(tài)、KRAS、BRAF等基因的突變情況(由本實(shí)驗(yàn)室在之前基于焦磷酸測(cè)序技術(shù)和多重?zé)晒釶CR-毛細(xì)管電泳的臨床分子檢測(cè)方法獲得)、患者的臨床病理學(xué)參數(shù)(性別、年齡、腫瘤部位、浸潤(rùn)深度、大體類型和組織學(xué)類型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、TNM分期等)、預(yù)后生存數(shù)據(jù)等信息的相關(guān)性。我們還對(duì)RNF43在腫瘤組織的表達(dá)做了免疫組化檢測(cè),并分析了RNF43突變對(duì)其表達(dá)情況的影響。本次研究試圖闡明RNF43在結(jié)直腸癌人群中的突變情況,探討RNF43基因突變情況與上述各因素之間的聯(lián)系,分析這些改變情況與臨床參數(shù)的關(guān)聯(lián)及對(duì)預(yù)后的影響。本次研究共發(fā)現(xiàn)結(jié)直腸癌人群中存在p.Gly659fs、p.Arg117fs、c.350GA,c.816TC四種RNF43基因的突變,其總體突變頻率分別為9.2%、1.1%、54.5%、0.91%。p.Gly659fs在MSI-H狀態(tài)下的突變率為28.6%,在MSI-L/MSS狀態(tài)下的突變率為3.1%。p.Arg117fs在MSI-H狀態(tài)下的突變率為3.6%,未在MSI-L/MSS狀態(tài)下發(fā)現(xiàn)此種突變。c.350GA的突變率在不同微衛(wèi)星狀態(tài)下未發(fā)現(xiàn)差異。發(fā)現(xiàn)p.Gly659fs與腫瘤部位(位于結(jié)腸、位于右半大腸)相關(guān),與組織學(xué)類型(粘液腺癌)、組織學(xué)分化(低分化)相關(guān),攜帶此突變的患者較少發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移；c.350GA與組織學(xué)類型(腺癌)、組織學(xué)分化(高分化)相關(guān),這些相關(guān)性體現(xiàn)在此位點(diǎn)發(fā)生純合突變的情況下,而此位點(diǎn)發(fā)生雜合型突變時(shí)其各項(xiàng)臨床參數(shù)相比未突變組則均無(wú)差異。當(dāng)患者攜帶RNF43基因的p.Gly659fs突變時(shí),再發(fā)生BRAF突變的患者五年生存率低于無(wú)BRAF突變者。暫未發(fā)現(xiàn)RNF43的突變與其在腫瘤組織的表達(dá)之間存在相關(guān)性。本次研究目前可以得出以下結(jié)論：1、RNF43在結(jié)直腸癌中突變率高。2、p.Gly659fs. p.Arg117fs兩種突變與微衛(wèi)星不穩(wěn)定存在相關(guān)性,其在MSI-H狀態(tài)下的突變率顯著高于在MSI-L/MSS狀態(tài)下的突變率。3、RNF43基因的p.Gly659fs突變是結(jié)直腸癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的保護(hù)因素。4、當(dāng)患者攜帶RNF43基因的p.Gly659fs突變時(shí),這些患者的BRAF基因突變會(huì)導(dǎo)致其五年生存率降低。
【關(guān)鍵詞】：結(jié)直腸癌 RNF43 微衛(wèi)星不穩(wěn)定
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.34
【目錄】：

• 致謝4-5
• 中文摘要5-8
• Abstract8-11
• 縮略語(yǔ)11-13
• 1 引言13-17
• 2 儀器設(shè)備17-18
• 2.1 儀器設(shè)備17-18
• 3 試劑與相關(guān)溶液的配制18-20
• 3.1 主要生物學(xué)與化學(xué)試劑18
• 3.2 相關(guān)溶液的配制18-20
• 4 RNF43基因突變的研究20-41
• 4.1 實(shí)驗(yàn)材料與方法20-28
• 4.2 結(jié)果分析28-41
• 5 討論41-44
• 6 結(jié)論44-45
• 參考文獻(xiàn)45-47
• 文獻(xiàn)綜述47-59
• 參考文獻(xiàn)56-59
• 作者簡(jiǎn)歷及在讀期間所取得科研成果59

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1 王漢濤 ,Kraemer M.;隨訪危險(xiǎn)因素分析:復(fù)發(fā)和非復(fù)發(fā)結(jié)直腸癌的比較[J];中國(guó)實(shí)用外科雜志;2001年12期

2 蘇森;患結(jié)直腸癌婦女后代癌癥的危險(xiǎn)性增加[J];中國(guó)腫瘤;2001年06期

3 汪一虹;在確定的法國(guó)人群中年齡<45歲結(jié)直腸癌病人與≥45歲結(jié)直腸癌病人的比較[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(消化系疾病分冊(cè));2002年01期

4 李會(huì)晨;結(jié)直腸癌解剖位置的連續(xù)性右向遷移[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).外科學(xué)分冊(cè);2003年03期

5 李志霞;結(jié)直腸癌復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移的綜合治療[J];中華胃腸外科雜志;2003年06期

6 何建苗,蒲永東,曹志宇,劉衛(wèi)平;老年人結(jié)直腸癌186例的外科治療[J];中華胃腸外科雜志;2003年05期

7 保紅平,方登華,高瑞崗,李奎,張雪松,劉天錫;青年人結(jié)直腸癌臨床病理分析[J];中國(guó)普外基礎(chǔ)與臨床雜志;2004年01期

8 章江;;監(jiān)測(cè)結(jié)直腸癌非常必要[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)情報(bào);2004年04期

9 郜文秀,楊艷芳,梁小波,李耀平,李佩珍;細(xì)胞粘附分子變異體在結(jié)直腸癌中的表達(dá)及預(yù)后[J];中國(guó)公共衛(wèi)生;2005年07期

10 Nozawa T. ,Enomoto T. ,Koshida Y. ,M. Kuranami,王志宇;人結(jié)直腸癌黏膜下血小板源性內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子特異性增強(qiáng)表達(dá)[J];世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘(胃腸病學(xué)分冊(cè));2005年06期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 鄭樹;;結(jié)直腸癌預(yù)后與轉(zhuǎn)移相關(guān)因素分析[A];2005年浙江省腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議全國(guó)大腸癌轉(zhuǎn)移與復(fù)發(fā)的診治研討會(huì)學(xué)術(shù)論文集[C];2005年

2 鄒一峰;吳小劍;蘭平;;結(jié)直腸癌免疫治療新進(jìn)展[A];第十一次全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合大腸肛門病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

3 郁寶銘;;結(jié)直腸癌治療的進(jìn)展及其新理念[A];2006年浙江省肛腸外科學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年

4 王錫山;;結(jié)直腸癌治療的困惑之我見[A];第九屆全國(guó)腫瘤轉(zhuǎn)移學(xué)術(shù)大會(huì)暨2011年黑龍江省醫(yī)學(xué)會(huì)腫瘤學(xué)年會(huì)報(bào)告集[C];2011年

5 秦建平;;未病思想中的結(jié)直腸癌預(yù)防[A];貴州省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)肛腸學(xué)會(huì)第五屆學(xué)術(shù)交流會(huì)暨新技術(shù)新進(jìn)展學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2012年

6 高文慶;陳會(huì)林;童蕾;陸松春;;老年梗阻性結(jié)直腸癌診療體會(huì)(附42例報(bào)告)[A];首屆“之江中醫(yī)藥論壇”暨浙江省中醫(yī)藥學(xué)會(huì)2011年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2011年

7 王啟遠(yuǎn);周長(zhǎng)江;高云飛;徐巖;李坤;;血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子與結(jié)直腸癌[A];《中華急診醫(yī)學(xué)雜志》第八屆組稿會(huì)暨急診醫(yī)學(xué)首屆青年論壇論文匯編[C];2009年

8 巴一;;結(jié)直腸癌靶向治療進(jìn)展[A];第三屆中國(guó)腫瘤內(nèi)科大會(huì)教育集暨論文集[C];2009年

9 何超;朱洪波;;結(jié)直腸癌的生物治療[A];2009年浙江省腫瘤外科學(xué)術(shù)年會(huì)暨腫瘤外科規(guī)范化診治學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2009年

10 萬(wàn)德森;;進(jìn)一步提高結(jié)直腸癌療效的思考[A];2009年浙江省腫瘤學(xué)術(shù)年會(huì)暨腫瘤診治新進(jìn)展學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2009年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 中華醫(yī)學(xué)會(huì)腫瘤學(xué)分會(huì)主任委員 顧晉;分期不精確 致結(jié)直腸癌過(guò)度治療[N];健康報(bào);2012年

2 本報(bào)記者 賈巖;跨線治療成結(jié)直腸癌最后防線[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2012年

3 本報(bào)記者 賈巖;跨線治療構(gòu)筑結(jié)直腸癌最后防線[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2012年

4 本報(bào)記者 林琳;結(jié)直腸癌：可以治愈的癌癥[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2013年

5 記者 張妍　通訊員 熊靜帆 朱品磊;深圳結(jié)直腸癌發(fā)病高于全國(guó)[N];深圳商報(bào);2013年

6 本報(bào)記者 孫剛;預(yù)防結(jié)直腸癌：請(qǐng)管住嘴[N];解放日?qǐng)?bào);2013年

7 上海市中醫(yī)醫(yī)院腫瘤科 侯鳳剛 副主任醫(yī)師;中醫(yī)藥在結(jié)直腸癌治療中的作用和特色[N];上海中醫(yī)藥報(bào);2014年

8 李華虹 孫瑜淼 記者 李麗云 實(shí)習(xí)生 陰浩;專家呼吁：結(jié)直腸癌應(yīng)多學(xué)科規(guī)范化診療[N];科技日?qǐng)?bào);2014年

9 ;降低結(jié)直腸癌復(fù)發(fā)有新療法[N];人民日?qǐng)?bào);2003年

10 韓自力;新化療方案可高效治療結(jié)直腸癌[N];健康報(bào);2007年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 陳濤;MicroRNA-31/FIH-1調(diào)控關(guān)系在結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 任翡;MYBL2基因在結(jié)直腸癌的表達(dá)及機(jī)制的初步探討[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

3 吳朋;結(jié)直腸癌中microRNA-615基因甲基化及其生物學(xué)特性探究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

4 李澤武;MicroRNA-203靶向ZNF217基因調(diào)控結(jié)直腸癌生物學(xué)行為的研究[D];山東大學(xué);2015年

5 徐興遠(yuǎn);低分子肝素對(duì)結(jié)直腸癌患者預(yù)后的影響及相關(guān)機(jī)制的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

6 梁洪亮;miR-454在結(jié)直腸癌中的功能及其作用機(jī)制[D];山東大學(xué);2015年

7 金鵬;MMR蛋白在雌激素致結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡中的作用及SEPT9檢測(cè)結(jié)直腸癌的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

8 珠珠;云南省Lynch綜合征候選基因標(biāo)志物研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2014年

9 周智航;SEMA3F通過(guò)下調(diào)ASCL2-CXCR4軸而抑制結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

10 王林;MiRNA-300對(duì)結(jié)直腸癌腫瘤侵襲和增殖的影響及其調(diào)控機(jī)制的初步研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 顏斐斐;術(shù)后結(jié)直腸癌患者癌因性疲乏與影響因素的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2009年

2 李斌;結(jié)直腸癌患者就診延遲分析[D];中南大學(xué);2009年

3 葉建杰;慈溪市結(jié)直腸癌危險(xiǎn)因素病例對(duì)照研究[D];浙江大學(xué);2008年

4 趙波;結(jié)直腸癌危險(xiǎn)因素及臨床流行病學(xué)特征的調(diào)查與分析[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2013年

5 崔娟娟;p53和nm23在結(jié)直腸癌中的表達(dá)及其臨床意義[D];河北聯(lián)合大學(xué);2014年

6 宋青芳;正常腸道、癌前病變、結(jié)直腸癌相關(guān)微生物組學(xué)比較分析[D];昆明理工大學(xué);2015年

7 郭秀燕;結(jié)直腸癌術(shù)后生存分析[D];泰山醫(yī)學(xué)院;2014年

8 王靜;TL1A在結(jié)腸炎相關(guān)結(jié)直腸癌動(dòng)物模型中作用的初步探討[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

9 吳哲;Th17細(xì)胞在TL1A調(diào)控結(jié)腸炎相關(guān)結(jié)直腸癌中作用的初步研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

10 肖華旭;通過(guò)microRNA-155下調(diào)SOCS-1在結(jié)直腸癌的表達(dá)促進(jìn)其轉(zhuǎn)移和侵襲[D];川北醫(yī)學(xué)院;2015年

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本文編號(hào)：725824