本文關(guān)鍵詞：胃癌中PHLPP1的表達(dá)及其臨床意義

  更多相關(guān)文章： PHLPP1 胃癌 SqRT-PCR 免疫組織化學(xué) 預(yù)后

【摘要】：目的研究PH結(jié)構(gòu)域且富含亮氨酸重復(fù)基序的絲/蘇氨酸蛋白磷酸酶1(pleckstrin homology domain leucine-rich repeat protein phosphatase 1,PHLPP1)在胃癌組織以及相對應(yīng)癌旁非腫瘤組織中的表達(dá)水平及變化;探討PHLPP1蛋白表達(dá)水平與胃癌臨床病理特征之間的關(guān)系;另外,通過檢測不同人胃癌細(xì)胞系(AGS,SUN-1,KATO-III,BGC-823,MGC-803,SGC-7901和HGC-27)和人正常胃黏膜細(xì)胞系(GES-1)PHLPP1 mRNA和蛋白的表達(dá)情況及差異,進(jìn)一步明確PHLPP1在人胃癌細(xì)胞系及人正常胃黏膜細(xì)胞中的表達(dá)情況。根據(jù)完整的臨床隨訪資料,分析135例行胃癌根治術(shù)后患者中PHLPP1蛋白的表達(dá)情況與預(yù)后之間的關(guān)系。方法收集來自天津醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院胃部腫瘤科于2004年08月至2007年12月收治并經(jīng)根治手術(shù)切除,通過病理證實(shí)為胃癌的135例患者的癌組織以及相對應(yīng)癌旁非腫瘤組織石蠟標(biāo)本,送往上海芯超生物科技有限公司制作組織芯片(編號:T14-501 TMA1-3)。應(yīng)用免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry,IHC)方法檢測135例胃癌患者的癌組織及其相對應(yīng)癌旁非腫瘤組織中PHLPP1蛋白的表達(dá)情況;分析PHLPP1蛋白表達(dá)水平與胃癌臨床病理特征及預(yù)后之間的關(guān)系。采取半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(Semi-quantitative reverse transcription and polymerase chain react,SqRT-PCR)技術(shù)檢測不同人胃癌細(xì)胞系及人正常胃黏膜細(xì)胞系中PHLPP1 mRNA的表達(dá)水平;Western blot(WB)法檢測不同人胃癌細(xì)胞系與人正常胃黏膜細(xì)胞系中PHLPP1蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果1、135例胃癌組織標(biāo)本中PHLPP1蛋白陽性表達(dá)率為55.6%,相對應(yīng)癌旁非腫瘤組織中PHLPP1蛋白陽性表達(dá)率為87.4%,差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2、SqRT-PCR技術(shù)檢測不同人胃癌細(xì)胞系PHLPP1 mRNA的表達(dá)水平均低于人正常胃黏膜細(xì)胞系(P0.05);WB法檢測不同人胃癌細(xì)胞系PHLPP1的蛋白表達(dá)水平也均低于人正常胃黏膜細(xì)胞系的表達(dá)(P0.05)。3、對135例胃癌根治術(shù)后患者進(jìn)行單因素生存分析表明:腫瘤大小、N分期、PHLPP1蛋白的表達(dá)水平與胃癌患者根治術(shù)后的預(yù)后相關(guān)(P0.05);COX模型分析表明PHLPP1蛋白的表達(dá)和N分期是胃癌根治術(shù)后患者的獨(dú)立預(yù)后因素(P0.05)。結(jié)論1、胃癌組織中PHLPP1蛋白表達(dá)水平低于相對應(yīng)癌旁非腫瘤組織;且人胃癌細(xì)胞系PHLPP1表達(dá)在mRNA及蛋白水平均也低于人正常胃黏膜細(xì)胞系。提示PHLPP1的低表達(dá)或表達(dá)沉默與胃癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),由此推測PHLPP1在胃癌可能作為一種抑癌基因。2、PHLPP1蛋白表達(dá)水平是胃癌患者根治術(shù)后獨(dú)立的預(yù)后因素。PHLPP1蛋白低表達(dá)或表達(dá)沉默的胃癌患者預(yù)后較差,因此可作為預(yù)測胃癌預(yù)后的因子。
【關(guān)鍵詞】：PHLPP1 胃癌 SqRT-PCR 免疫組織化學(xué) 預(yù)后
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R735.2
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 縮略語/符號說明10-11
• 前言11-15
• 研究現(xiàn)狀、成果11-14
• 研究目的、方法14-15
• 1 對象和方法15-28
• 1.1 研究對象15
• 1.2 實(shí)驗(yàn)材料15-17
• 1.3 基本溶液的配制17-19
• 1.4 試驗(yàn)方法19-26
• 1.4.1 細(xì)胞的復(fù)蘇、換液、傳代、凍存19-20
• 1.4.2 S-P法免疫組織化學(xué)染色20-22
• 1.4.3 SqRT-PCR實(shí)驗(yàn)方法22-25
• 1.4.4 Western Blot方法25-26
• 1.5 隨訪26-27
• 1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理27-28
• 2 結(jié)果28-34
• 2.1 免疫組化結(jié)果28-32
• 2.2 不同人胃癌細(xì)胞系和人正常胃黏膜上皮細(xì)胞系PHLPP1 mRNA的表達(dá)差異32
• 2.3 不同人胃癌細(xì)胞系和人正常胃黏膜上皮細(xì)胞系PHLPP1蛋白的表達(dá)差異32-34
• 3 討論34-38
• 結(jié)論38-39
• 參考文獻(xiàn)39-43
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明43-44
• 綜述 蛋白磷酸酶PHLPP在惡性腫瘤中的研究進(jìn)展44-68
• 綜述參考文獻(xiàn)60-68
• 致謝68-69
• 個(gè)人簡歷69

，

本文編號：646972