本文關(guān)鍵詞：X射線照射聯(lián)合苦參堿對肝癌HepG2細(xì)胞人宮頸癌基因-1及相關(guān)基因表達(dá)的影響

  更多相關(guān)文章： 苦參堿 HepG2細(xì)胞 輻射敏感性 凋亡 HCCR-1

【摘要】：目的：探討中藥制劑苦參堿(Matrine)對人肝癌細(xì)胞HepG2的增殖抑制效應(yīng)和對輻射敏感性的影響；研究X射線照射聯(lián)合中藥制劑苦參堿對HepG2細(xì)胞人宮頸癌基因HCCR-1 (Human Cervical Cancer Oncogene-1)及其相關(guān)基因表達(dá)的影響。方法：1、于體外培育人肝癌細(xì)胞HepG2,光鏡下觀察細(xì)胞的生長狀態(tài),取處于生長對數(shù)期的細(xì)胞試驗(yàn)。2、以培養(yǎng)基稀釋的不同濃度苦參堿處理人肝癌細(xì)胞HepG2,其終濃度0.2mg/ml、0.4 mg/ml、0.8 mg/ml、1.6mg/ml、3.2mg/ml。3、MTT法研究苦參堿對HepG2細(xì)胞增殖的抑制效應(yīng)。4、應(yīng)用克隆形成法檢測,探討中藥制劑苦參堿對HepG2細(xì)胞輻射敏感性的效應(yīng)。5、應(yīng)用Hoechst33258熒光染色法檢測HepG2細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化。6、應(yīng)用蛋白質(zhì)印跡法(Western blot)檢測苦參堿作用24h后,HCCR-1及其相關(guān)蛋白表達(dá)水平。結(jié)果：1、MTT法結(jié)果表明,苦參堿的濃度越高,其對人肝癌HepG2細(xì)胞的增殖抑制效應(yīng)越明顯,該抑制效應(yīng)呈現(xiàn)一定時(shí)間-劑量依賴關(guān)系。0.2 mg/ml苦參堿對HepG2細(xì)胞的增殖抑制率30%。2、克隆形成實(shí)驗(yàn)表明,苦參堿處理HepG2細(xì)胞4h后再予X射線輻照,聯(lián)合組比單獨(dú)輻照組存活率明顯降低(P0.01)。結(jié)果表明苦參堿對于HepG2細(xì)胞有顯著輻射增敏效應(yīng)。3、Hoechst33258熒光染色結(jié)果表明,在X射線處理后24h聯(lián)合組比單獨(dú)輻照組表現(xiàn)出更為明顯的細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)變化。4、蛋白質(zhì)印跡法檢測結(jié)果表明,在輻照后24h,聯(lián)合組同輻照組相比,HCCR-1蛋白表達(dá)量降低,p53和Bax蛋白的表達(dá)水平增高(P0.05)。結(jié)論：1、苦參堿能夠明顯抑制體外培育的肝癌HepG2細(xì)胞的增殖效應(yīng),增強(qiáng)對于HepG2細(xì)胞輻射敏感性。2、苦參堿能降低肝癌HepG2細(xì)胞的原癌基因HCCR-1蛋白表達(dá)水平,增加其相關(guān)基因p53、Bax蛋白表達(dá)水平。3、苦參堿對HepG2細(xì)胞有增殖抑制效應(yīng)。其機(jī)制可能與降低HCCR-1基因表達(dá),增加其相關(guān)基因p53、Bax表達(dá)水平,而抑制HepG2細(xì)胞增殖,促進(jìn)細(xì)胞凋亡有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：苦參堿 HepG2細(xì)胞 輻射敏感性 凋亡 HCCR-1
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R735.7
【目錄】：

• 中文摘要3-4
• Abstract4-8
• 第一章 前言8-15
• 1.1 苦參堿簡介8-9
• 1.2 苦參堿抗腫瘤效用9-12
• 1.2.1 抑制腫瘤細(xì)胞的增殖9
• 1.2.2 誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的分化和凋亡9-10
• 1.2.3 抗腫瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移效用10
• 1.2.4 抑制腫瘤新生血管的形成過程10-11
• 1.2.5 逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞的耐藥性11-12
• 1.2.6 誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的自噬作用12
• 1.3 HCCR-1基因與其功能相關(guān)基因p53、Bax12-15
• 1.3.1 HCCR-1基因的結(jié)構(gòu)及功能12-13
• 1.3.2 HCCR-1基因與p53及其下游因子關(guān)系13
• 1.3.3 HCCR-1基因與苦參堿13-15
• 第二章 材料和方法15-29
• 2.1 試劑,材料和儀器15-20
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)用藥物15
• 2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑15-16
• 2.1.3 細(xì)胞株16
• 2.1.4 主要儀器和設(shè)備16-17
• 2.1.5 主要溶液的配制17-20
• 2.2 試驗(yàn)方法20-29
• 2.2.1 HepG2細(xì)胞的培養(yǎng)及凍存20-22
• 2.2.2 MTT比色法22-23
• 2.2.3 克隆形成抑制實(shí)驗(yàn)檢測苦參堿對HepG2細(xì)胞的輻射增敏效應(yīng)23-24
• 2.2.4 Hoechst33258熒光染色檢測24-25
• 2.2.5 Western blot法25-28
• 2.2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法28-29
• 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果29-33
• 3.1 MTT法檢測不同濃度的苦參堿對肝癌HepG2細(xì)胞增殖的影響29-30
• 3.2 苦參堿增強(qiáng)X射線對HepG2細(xì)胞克隆形成率影響30-31
• 3.3 HepG2細(xì)胞凋亡情況31
• 3.4 不同處理?xiàng)l件下HepG2細(xì)胞蛋白表達(dá)的影響31-33
• 第四章 討論33-35
• 結(jié)論35-36
• 英文縮寫36-37
• 參考文獻(xiàn)37-41
• 在學(xué)期間的研究成果41-42
• 致謝42

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：633511