本文關(guān)鍵詞：川芎嗪抑制GSK-3β表達及對急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞增殖和凋亡影響的研究

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【摘要】：目的：檢測川芎嗪(TMP)對急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)細(xì)胞株Jurkat和SUP-B15細(xì)胞中GSK-3β表達的影響,并分析其對細(xì)胞增殖和凋亡的影響,進一步檢測其對GSK-3β下游相關(guān)基因表達水平的影響,探討TMP抗腫瘤的作用機制。方法：用不同濃度(0-320ug/ml)的川芎嗪分別作用于Jurkat、 SUP-B15細(xì)胞24h、48h和72h,采用CCK-8法檢測增殖并分別計算兩種細(xì)胞的IC50, Annexin-FITC/PI雙染法測定細(xì)胞凋亡率,流式細(xì)胞術(shù)測定細(xì)胞的周期分布,Real-time PCR、Western blot測定檢測川芎嗪作用前后細(xì)胞中GSK-3β及其己知下游凋亡相關(guān)因子cox-2、survivin、bcl-2以及周期相關(guān)分子P27mRNA和蛋白的變化；Western blot檢測細(xì)胞核中GSK-3β下游核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB (P65)、c-myc的表達。結(jié)果：CCK-8顯示在TMP 0-320ug/ml濃度的范圍內(nèi)以時間劑量依賴性的形式抑制細(xì)胞Jurkat、SUP-B15的增殖,計算兩種細(xì)胞48h的IC50分別為120、200ug/ml; Annexin-FITC/PI雙染法結(jié)果顯示TMP(60、120、180ug/ml)和TMP (100× 200、300ug/ml)分別作用Jurkat、SUP-B15細(xì)胞48h后,與對照組比較,細(xì)胞凋亡率均有明顯地升高(P0.05)；流式細(xì)胞術(shù)檢測到TMP可以將細(xì)胞Jurkat、SUP-B15的周期阻滯于G0/G1期；Real-time PCR及Western blot檢測結(jié)果表明TMP作用于Jurkat、SUP-B15細(xì)胞48h后,GSK-3β表達明顯下降,進一步下調(diào)細(xì)胞核蛋白中轉(zhuǎn)錄因子NF-κB (P65)、c-myc表達,阻斷其進入核內(nèi),導(dǎo)致下游的靶基因cox-2、bcl-2、survivin的表達受到抑制,P27表達升高；結(jié)論：川芎嗪能夠明顯抑制ALL細(xì)胞株Jurkat、SUP-B15增殖,并能誘導(dǎo)凋亡,進一步發(fā)現(xiàn)作用機制可能是通過影響細(xì)胞周期分布,抑制GSK-3β表達,阻斷轉(zhuǎn)錄因子NF-κB (P65)、c-myc入核,從而影響靶基因cox-2、survivin、bcl-2和P27的表達有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：川芎嗪 白血病 GSK-3β 細(xì)胞凋亡
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R733.71
【目錄】：

• 符號說明5-7
• 摘要7-9
• ABSTRACT9-11
• 前言11-13
• 1 實驗材料13-16
• 2 實驗方法16-25
• 3 結(jié)果25-38
• 4 討論38-43
• 全文總結(jié)43-44
• 參考文獻44-50
• 文獻綜述50-60
• 參考文獻56-60
• 致謝60-61
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文61

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本文編號：625069