本文關(guān)鍵詞：miR-20a調(diào)控NFκB對(duì)胃癌細(xì)胞耐藥性的影響及相關(guān)機(jī)制的研究

  更多相關(guān)文章： miR-20a NFκB NFKBIB 順鉑耐藥

【摘要】：目的：miRNA的異常表達(dá)與腫瘤耐藥密切相關(guān),NFκB持續(xù)激活也是腫瘤化療耐藥的重要機(jī)制。本研究旨在探索miR-20a對(duì)NFκB的作用關(guān)系,力圖闡明miR-20a在調(diào)控胃癌耐藥中的作用及內(nèi)在機(jī)制。方法：運(yùn)用實(shí)時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(real-time polymerase chain reaetion, RT-PCR)檢測(cè)miR-20a在胃癌患者血漿及組織樣本、胃癌耐藥患者血漿及組織樣本、胃癌耐藥細(xì)胞株中的表達(dá)水平。MTT藥敏試驗(yàn)法檢測(cè)各組細(xì)胞轉(zhuǎn)染前后對(duì)化療藥物的敏感性。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組細(xì)胞轉(zhuǎn)染后對(duì)化療藥物誘導(dǎo)凋亡的變化。免疫組化檢測(cè)胃癌組織中NFKBIB表達(dá)水平。運(yùn)用熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證miR-20a的靶基因。Western blot檢測(cè)各組細(xì)胞轉(zhuǎn)染前后NFKBIB、核內(nèi)p65、Livin及Survivin分子的表達(dá)變化。結(jié)果：與正常人群血漿及正常胃組織樣本相比,miR-20a;在胃癌血漿、組織樣本中表達(dá)水平明顯增高。此外,miR-20a在胃癌耐藥患者的血漿、組織樣本和細(xì)胞株SGC7901/DDP中的表達(dá)水平呈進(jìn)一步升高。在轉(zhuǎn)染miR-20a抑制物組,胃癌順鉑耐藥株SGC7901/DDP對(duì)順鉑的敏感性和順鉑誘導(dǎo)的凋亡增強(qiáng)；在轉(zhuǎn)染miR-20a模擬物組,胃癌母代細(xì)胞株SGC7901對(duì)順鉑的敏感性和順鉑誘導(dǎo)的凋亡降低。miR-20a高表達(dá)伴隨著NFKBIB (IκBP)蛋白低表達(dá),核內(nèi)p65、Livin和Survivin蛋白高表達(dá)。熒光素酶實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示NFKBIB是miR-20a的靶基因。SGC7901/DDP細(xì)胞中敲低miR-20a表達(dá)能上調(diào)NFKBIB表達(dá)水平,下調(diào)核內(nèi)p65、Livin和Survivin的表達(dá)水平。相反地,異位表達(dá)的miR-20a能顯著下調(diào)SGC7901細(xì)胞株中NFKBIB的表達(dá)水平,上調(diào)核內(nèi)p65、Livin和Survivin蛋白的表達(dá)。結(jié)論：miR-20a可通過靶向調(diào)控NFKBIB的表達(dá),激活NFκB并影響下游抗凋亡蛋白Livin和Survivin的表達(dá)從而導(dǎo)致胃癌細(xì)胞對(duì)順鉑耐藥。
【關(guān)鍵詞】：miR-20a NFκB NFKBIB 順鉑耐藥
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.2
【目錄】：

• 中文摘要5-6
• 英文摘要6-8
• 前言8-13
• 參考文獻(xiàn)10-13
• 第一部分：miR-20a在胃癌患者血漿及組織、胃癌耐藥患者血漿及組織、胃癌耐藥細(xì)胞株中的表達(dá)13-25
• 1. 材料與儀器13-16
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法16-23
• 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果23-25
• 第二部分：miR-20a對(duì)胃癌細(xì)胞生物學(xué)行為及耐藥表型的影響25-33
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料與儀器25-27
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法27-30
• 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果30-33
• 第三部分：miR20a調(diào)控胃癌細(xì)胞生物學(xué)行為及耐藥表型的分子機(jī)制33-45
• 1. 實(shí)驗(yàn)材料與儀器33-34
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法34-40
• 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果40-45
• 討論45-48
• 參考文獻(xiàn)48-52
• 文獻(xiàn)綜述52-72
• 參考文獻(xiàn)61-72
• 英文縮略詞表72-73
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況73-74
• 致謝74

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