發(fā)布時間：2017-08-05 11:26

  本文關鍵詞：miR-20a調控NFκB對胃癌細胞耐藥性的影響及相關機制的研究

  更多相關文章： miR-20a NFκB NFKBIB 順鉑耐藥

【摘要】：目的：miRNA的異常表達與腫瘤耐藥密切相關,NFκB持續(xù)激活也是腫瘤化療耐藥的重要機制。本研究旨在探索miR-20a對NFκB的作用關系,力圖闡明miR-20a在調控胃癌耐藥中的作用及內在機制。方法：運用實時聚合酶鏈式反應(real-time polymerase chain reaetion, RT-PCR)檢測miR-20a在胃癌患者血漿及組織樣本、胃癌耐藥患者血漿及組織樣本、胃癌耐藥細胞株中的表達水平。MTT藥敏試驗法檢測各組細胞轉染前后對化療藥物的敏感性。流式細胞術檢測各組細胞轉染后對化療藥物誘導凋亡的變化。免疫組化檢測胃癌組織中NFKBIB表達水平。運用熒光素酶報告實驗驗證miR-20a的靶基因。Western blot檢測各組細胞轉染前后NFKBIB、核內p65、Livin及Survivin分子的表達變化。結果：與正常人群血漿及正常胃組織樣本相比,miR-20a;在胃癌血漿、組織樣本中表達水平明顯增高。此外,miR-20a在胃癌耐藥患者的血漿、組織樣本和細胞株SGC7901/DDP中的表達水平呈進一步升高。在轉染miR-20a抑制物組,胃癌順鉑耐藥株SGC7901/DDP對順鉑的敏感性和順鉑誘導的凋亡增強；在轉染miR-20a模擬物組,胃癌母代細胞株SGC7901對順鉑的敏感性和順鉑誘導的凋亡降低。miR-20a高表達伴隨著NFKBIB (IκBP)蛋白低表達,核內p65、Livin和Survivin蛋白高表達。熒光素酶實驗結果顯示NFKBIB是miR-20a的靶基因。SGC7901/DDP細胞中敲低miR-20a表達能上調NFKBIB表達水平,下調核內p65、Livin和Survivin的表達水平。相反地,異位表達的miR-20a能顯著下調SGC7901細胞株中NFKBIB的表達水平,上調核內p65、Livin和Survivin蛋白的表達。結論：miR-20a可通過靶向調控NFKBIB的表達,激活NFκB并影響下游抗凋亡蛋白Livin和Survivin的表達從而導致胃癌細胞對順鉑耐藥。
【關鍵詞】：miR-20a NFκB NFKBIB 順鉑耐藥
【學位授予單位】：南京醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R735.2
【目錄】：

• 中文摘要5-6
• 英文摘要6-8
• 前言8-13
• 參考文獻10-13
• 第一部分：miR-20a在胃癌患者血漿及組織、胃癌耐藥患者血漿及組織、胃癌耐藥細胞株中的表達13-25
• 1. 材料與儀器13-16
• 2. 實驗方法16-23
• 3. 實驗結果23-25
• 第二部分：miR-20a對胃癌細胞生物學行為及耐藥表型的影響25-33
• 1. 實驗材料與儀器25-27
• 2. 實驗方法27-30
• 3. 實驗結果30-33
• 第三部分：miR20a調控胃癌細胞生物學行為及耐藥表型的分子機制33-45
• 1. 實驗材料與儀器33-34
• 2. 實驗方法34-40
• 3. 實驗結果40-45
• 討論45-48
• 參考文獻48-52
• 文獻綜述52-72
• 參考文獻61-72
• 英文縮略詞表72-73
• 攻讀學位期間發(fā)表文章情況73-74
• 致謝74

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 于成功,李敏,莫劍忠,蕭樹東;胃癌細胞垂體腺苷環(huán)化酶激活肽相關受體分析[J];胃腸病學;2000年02期

2 薛英威,耿敬姝,劉曉民,劉立人,高小敏,陳國林,張豈凡,趙家宏;胃癌細胞的流式分析及臨床意義[J];腫瘤防治研究;2000年03期

3 陳堅,林庚金,錢立平,程建,施冬云,張亞東,劉珊林;內源性活性氧水平及錳型超氧化物歧化酶的表達與胃癌細胞分化、增殖相關[J];生物物理學報;2003年02期

4 李瑩,藥立波,韓炯,王立峰,韓月恒,劉新平,林樹新,俞強;胃癌細胞抗脫落凋亡的分子機制[J];醫(yī)學分子生物學雜志;2004年02期

5 羅和生,王維,包鵬輝,張翼;核因子-κB活性增強參與胃癌細胞長春新堿耐藥[J];中華消化雜志;2004年08期

6 劉冀紅,曹偉新,紀玉寶,張軼,劉炳亞,朱正綱,燕敏,林言箴;右旋甲硫氨酸對胃癌細胞作用初探[J];腸外與腸內營養(yǎng);2005年01期

7 齊元玲;于皆平;劉啟勝;鄧全軍;曹俊;于紅剛;;抑癌基因PTEN在胃癌細胞中的表達及意義[J];廣東醫(yī)學;2006年03期

8 何必立;呂賓;徐毅;苗青;范一宏;;溫郁金對胃癌細胞的抑制作用及其對血管內皮生長因子表達的影響[J];中醫(yī)藥學刊;2006年09期

9 郭強;李榮;李慶芳;夏紹友;杜曉輝;王立生;;高表達鞘氨醇激酶對胃癌細胞生物學特性的影響[J];解放軍醫(yī)學雜志;2006年12期

10 陳先來;肖曉旦;楊榮;劉建平;;基于誤差反向傳播神經網絡的胃癌細胞識別研究[J];中國循證醫(yī)學雜志;2007年09期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 韓霜;雷婷;韓者藝;劉杰;郭雪艷;丁睿;吳開春;丁杰;樊代明;;分化抑制因子1對胃癌細胞惡性生物學行為的影響[A];中華醫(yī)學會第七次全國消化病學術會議論文匯編（下冊）[C];2007年

2 陳韶華;吳靈嬌;吳鴻儒;吳雅春;厲有名;;低濃度酒精對胃癌細胞活性及周期抑制[A];中華醫(yī)學會第12次全國內科學術會議論文匯編[C];2009年

3 陳韶華;吳靈嬌;吳鴻儒;吳雅春;厲有名;;低濃度酒精對胃癌細胞活性及周期抑制[A];第二屆浙江省消化病學術大會論文匯編[C];2009年

4 李娜;郭瑞芳;李文梅;邵建敏;汪浩;趙康;李書婷;王敬強;王融;徐寧志;劉斯奇;呂有勇;;大蒜素處理在胃癌細胞中引發(fā)的蛋白質表達響應[A];中國蛋白質組學第二屆學術大會論文摘要論文集[C];2004年

5 ;多西紫杉醇對胃癌細胞作用及其機制的研究[A];第四屆中國腫瘤大會中國藥理學會腫瘤藥理專業(yè)委員會分會場學術會議論文摘要[C];2006年

6 樓儷泓;;15-羥基前列腺素脫氫酶對胃癌細胞周期影響的試驗研究[A];中華醫(yī)學會第七次全國消化病學術會議論文匯編（下冊）[C];2007年

7 朗瑋;;中藥方劑1號對胃癌細胞體外生長及細胞粘附分子的影響[A];浙江省中西醫(yī)結合學會消化專業(yè)第八次學術年會暨省中西醫(yī)結合消化系疾病新進展學習班論文匯編[C];2007年

8 鞏龍靜;馬君;周涵婧;鄭榮兒;;胃癌細胞的表面增強拉曼光譜研究[A];中國光學學會2011年學術大會摘要集[C];2011年

9 謝少茹;沈洪;趙崧;張國新;郝波;劉增巍;施瑞華;;黃芪多糖對胃癌細胞的抑制作用及其機制[A];中華中醫(yī)藥學會脾胃病分會第十九次全國脾胃病學術交流會論文匯編[C];2007年

10 劉文超;任軍;張學庸;劉智廣;張曉楠;;防御素對胃癌細胞殺傷的體外實驗研究[A];2000全國腫瘤學術大會論文集[C];2000年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 記者 陸葉清;發(fā)現(xiàn)抑制胃癌細胞的重要基因[N];上�？萍紙�;2010年

2 衣曉峰　喬蕤琳 記者 趙宇清;抑制胃癌細胞生長研究有新發(fā)現(xiàn)[N];黑龍江日報;2010年

3 記者 衣曉峰　通訊員 喬蕤琳;維生素E衍生物能抑制胃癌細胞生長[N];健康報;2010年

4 王振嶺;我國抑制胃癌細胞生長研究有重要發(fā)現(xiàn)[N];中國醫(yī)藥報;2002年

5 王振嶺;抗癌藥抑制胃癌細胞生長研究獲重要發(fā)現(xiàn)[N];中國中醫(yī)藥報;2002年

6 王振嶺;7種抗癌藥體外抑制胃癌細胞的研究有新發(fā)現(xiàn)[N];醫(yī)藥經濟報;2002年

7 張中橋;胃癌細胞MDR機制研究取得新進展[N];中國醫(yī)藥報;2007年

8 吳一福 蘇玉軍;白藜蘆醇可誘導胃癌細胞脫落凋亡[N];中國醫(yī)藥報;2005年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李雙玲;IGF-1通過抑制Fox01核保留促進胃癌細胞生長機制的研究[D];山東大學;2015年

2 胡偉國;腫瘤相關成纖維細胞中Thy-1激活誘導上皮間質轉化促進胃癌細胞侵襲轉移的研究[D];上海交通大學;2014年

3 周韻斕;應激條件下胃癌細胞高表達線粒體活性氧和前梯度蛋白2促進腫瘤進展的研究[D];上海交通大學;2014年

4 徐同鵬;SP1誘導的長非編碼RNA TINCR通過調控KLF2 mRNA穩(wěn)定性影響胃癌細胞的增殖與凋亡[D];南京醫(yī)科大學;2015年

5 王暢;miR-34a通過miR-34a-c-myc/Bmi-1負反饋通路負調控胃癌干細胞樣特性[D];復旦大學;2014年

6 羅貫虹;MGr1-Ag/37LRP參與PrP~C介導的胃癌細胞多藥耐藥[D];第四軍醫(yī)大學;2014年

7 默董亮;人類解旋酶RecQL4調控胃癌細胞耐藥性分子機制研究[D];中國科學院北京基因組研究所;2016年

8 劉皎婧;PI3K/Akt/GSK3β/p190ARhoGAP/RhoA信號通路在Wnt5a誘導胃癌細胞遷移中作用的研究[D];南京醫(yī)科大學;2014年

9 Muhammad Kamran（卡姆拉）;[D];大連醫(yī)科大學;2015年

10 王瑛;PKGⅡ對LPA誘導的胃癌細胞徖移及RhoA和Rac1激活的影響[D];江蘇大學;2015年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 林光錟;CyclinA/CDK2介導BAG3 Ser291位點的磷酸化并影響胃癌細胞的增殖和凋亡[D];福建醫(yī)科大學;2015年

2 蔡洙哲;p12-LOX對胃癌細胞MKN-28的增殖和遷移的影響[D];延邊大學;2015年

3 李龍;Her-2高表達對胃癌細胞侵襲、遷移的影響[D];長江大學;2015年

4 趙婷婷;GPIbα對胃癌細胞粘附、遷移和侵襲能力的影響及其機制的初步探討[D];蘭州大學;2015年

5 謝瑞霞;盤狀結構域受體1調控上皮—間質轉化影響胃癌侵襲轉移分子機制的研究[D];蘭州大學;2015年

6 王東倉;NM23-H2通過抑制Wnt/β-catenin信號通路抑制胃癌細胞的侵襲遷移[D];蘭州大學;2015年

7 朱瑞雪;NDRG2基因對胃癌細胞惡性表型的影響[D];鄭州大學;2015年

8 董凱楠;內質網應激對胃癌細胞侵襲遷移能力的影響[D];鄭州大學;2015年

9 單爭爭;二甲雙胍在IL-6誘導胃癌細胞EMT中的作用[D];鄭州大學;2015年

10 田莉;NM23-H2通過誘導自噬抑制胃癌細胞EMT的發(fā)生[D];蘭州大學;2015年

，

本文編號：624650