發(fā)布時間：2017-08-03 17:12

  本文關(guān)鍵詞：MMP-8與TGF-1的相互激活誘導(dǎo)肝細胞肝癌上皮間質(zhì)化及惡性進展的研究

  更多相關(guān)文章： 基質(zhì)金屬蛋白酶8 轉(zhuǎn)化生長因子β1 肝細胞肝癌 惡性進展 PI3K/Akt/Rac1信號通路

【摘要】：目的：研究基質(zhì)金屬蛋白酶8 (matrix metalloproteinases 8, MMP-8)及轉(zhuǎn)化生長因子β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)的相互關(guān)系,及其對肝細胞肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)細胞上皮間質(zhì)化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)、惡性進展的影響及其分子機制。方法：1.使用transwell小室法鑒定4株HCC細胞(SK-Hep-1、HCCLM3、 HepG2、SMMC-7721)及人正常肝細胞HL-7702細胞的轉(zhuǎn)移潛能；使用蛋白免疫印跡(Western blot, WB)、實時熒光定量PCR (Quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR)檢測MMP-8、MMP-2、MMP-9及TGF-β1在4株不同轉(zhuǎn)移潛能人HCC細胞系及HL-7702中的表達水平。2.使用免疫組織化學(xué)法(Immunohistochemistry, IHC)檢測73例HCC患者組織及其配對癌旁組織中的MMP-8及TGF-β1表達水平。3.通過慢病毒(lentivirus)載體技術(shù)對HCC細胞MMP-8表達進行干擾及過表達,通過小干擾RNA (small inhibitory RNA, siRNA)及外加重組人TGF-β1蛋白(Recombinant human TGF-β1)分別對HCC細胞TGF-p1表達進行干擾及過表達； 使用WB及酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)鑒定干擾和過表達的效果：使用WB檢測HCC細胞中E-caherin、N-cadherin、Snail、Twist、Akt 及 p-Akt的表達水平。使用G-LISA Rac活性檢測試劑盒檢測HCC細胞Rac1活性。使用劃痕法及Transwell、室法分別檢測HCC細胞的遷移及侵襲能力。結(jié)果：1.Transwell、室結(jié)果顯示,SK-Hep-1、HCCLM3細胞侵襲能力顯著高于HepG2、SMMC-7721,并高于HL-7702細胞；WB和qRT-PCR結(jié)果顯示,MMP-8、MMP、MMP-9及TGF-β1在高轉(zhuǎn)移潛能人HCC細胞株(SK-Hep-1、HCCLM3)中的表達高于低轉(zhuǎn)移潛能人HCC細胞株(HepG2、 SMMC-7721),且4株HCC細胞株的MMP-8及TGF-β1表達均高于HL-7702細胞。2. MMP-8及TGF-β1在有侵襲轉(zhuǎn)移的HCC組織中的表達高于非侵襲轉(zhuǎn)移HCC組織及其相應(yīng)的癌旁組織。3. MMP-8或TGF-β1的上調(diào)與HCC EMT轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)移及侵襲相關(guān)。MMP-8可主要通過P I3K/Akt/Racl信號通路上調(diào)TGF-β1干擾株中TGF-β1的表達水平；同樣,TGF-β1可部分通過PI3K/Akt/Racl信號通路上調(diào)MMP-8干擾株中MMP-8的表達水平。4.在患者HCC組織中,MMP-8表達與TGF-β1表達顯著正相關(guān)；高表達MMP-8或TGF-β1與HCC病人的TNM分期、轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)關(guān)系。MMP-8及TGF-β1共同高表達與HCC的TNM分期及轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)關(guān)系,且共同高表達MMP-8和TGF-β1的HCC病人的復(fù)發(fā)時間顯著短于共同低表達MMP-8和TGF-β1的病人。結(jié)論MMP-8與TGF-β1主要通過激活PI3K/Akt/Racl信號通路相互激活從而誘導(dǎo)HCC發(fā)生EMT轉(zhuǎn)化、促進HCC侵襲及轉(zhuǎn)移。
【關(guān)鍵詞】：基質(zhì)金屬蛋白酶8 轉(zhuǎn)化生長因子β1 肝細胞肝癌 惡性進展 PI3K/Akt/Rac1信號通路
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R735.7
【目錄】：

• 個人簡歷3-6
• 主要英文縮略詞表6-7
• 摘要7-9
• ABSTRACT9-12
• 前言12-17
• 參考文獻13-17
• 第一部分 MMP-β、MMP-2、MMP-9及TGF-β1在不同侵襲潛能HCC細胞系或HCC患者組織中的表達17-29
• 1 材料17-19
• 2 方法19-23
• 3 結(jié)果23-26
• 4 討論26-27
• 5 小結(jié)27
• 參考文獻27-29
• 第二部分 MMP-8及TGF-β1的相互調(diào)控關(guān)系29-47
• 1 材料29-30
• 2 方法30-34
• 3 結(jié)果34-42
• 4 討論42-43
• 5 小結(jié)43-44
• 參考文獻44-47
• 第三部分 MMP-8與TGF-β1對HCC上皮間質(zhì)化及惡性進展的影響47-57
• 1 材料47-48
• 2 方法48
• 3 結(jié)果48-51
• 4 討論51-52
• 5 小結(jié)52-53
• 參考文獻53-57
• 第四部分 MMP-8與TGF-β1的共表達與HCC患者不良預(yù)后的關(guān)系57-66
• 1 材料57
• 2 方法57-58
• 3 結(jié)果58-63
• 4 討論63-64
• 5 小結(jié)64-65
• 參考文獻65-66
• 結(jié)論66-67
• 綜述：MMPs和TGF-β互相調(diào)控與腫瘤EMT及侵襲轉(zhuǎn)移的研究進展67-81
• 參考文獻72-81
• 致謝81-82
• 攻讀碩士期間發(fā)表的論文82

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5 陳孝平;張志偉;楊甲梅;沈鋒;;肝細胞肝癌外科治療方法的選擇[J];中華普通外科學(xué)文獻(電子版);2009年02期

6 郭洪生;杜智;高英堂;薛春祥;張勤;朱爭艷;王偉麗;;磷脂酰肌醇蛋白聚糖3在肝細胞肝癌中的表達及意義[J];中國腫瘤臨床;2009年08期

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本文編號：615432