本文關(guān)鍵詞：RNA干擾AXL基因?qū)δ懩野┘?xì)胞增殖、侵襲能力的影響及其機(jī)制研究

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【摘要】：目的:觀察受體絡(luò)氨酸激酶AXL(Anexelekto)對(duì)膽囊癌細(xì)胞增殖、侵襲能力的影響,并初步探討其作用機(jī)制。方法:1.免疫組化方法檢測(cè)AXL在膽囊癌組織中的表達(dá)情況,并結(jié)合臨床病例資料分析AXL陽(yáng)性表達(dá)的意義2.細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)傳代培養(yǎng)膽囊癌細(xì)胞株GBC-SD,借助于RNA干擾技術(shù)(RNAi)敲低AXL的表達(dá)后,用Western Blot方法檢測(cè)三個(gè)片段的干擾效率,并選取干擾效率最高的一條干擾片段做后續(xù)實(shí)驗(yàn)3.通過MTT、transwell、流式細(xì)胞術(shù)和細(xì)胞劃痕等實(shí)驗(yàn)方法觀察AXL對(duì)膽囊癌細(xì)胞的增殖、侵襲能力的影響4.同時(shí)用Western Blot(免疫蛋白印跡)方法觀察PI3K/AKT通路相關(guān)蛋白的表達(dá)情況,對(duì)AXL的作用機(jī)制進(jìn)行初步探討。結(jié)果:1.免疫組化檢測(cè)發(fā)現(xiàn)膽囊癌組織中AXL的表達(dá)明顯高于慢性膽囊炎組織(P=0.0440.05),并且AXL的陽(yáng)性表達(dá)和膽囊癌患者淋巴轉(zhuǎn)移及腫瘤分期密切相,但AXL的表達(dá)和腫瘤患者的年齡、性別及瘤體大小無(wú)明顯相關(guān)性(P0.05);2.成功干擾AXL的表達(dá)后,膽囊癌細(xì)胞的增殖、侵襲能力均較對(duì)照組明顯降低(P0.05),PI3K通路的相關(guān)蛋白PI3K(Phosphoinositol 3-kinase,磷酸肌醇-3-激酶)及p-mtor蛋白的表達(dá)量較對(duì)照組明顯降低(P0.05),提示AXL發(fā)揮作用的機(jī)制依賴于PI3K通路的激活。結(jié)論:受體酪氨酸激酶AXL在膽囊癌組織中存在高表達(dá),并且可以影響膽囊癌細(xì)胞的增殖、侵襲,抑制其表達(dá)后可明顯降低膽囊癌細(xì)胞的增殖能力。AXL發(fā)揮作用的機(jī)制可能和PI3K/AKT通路密切相關(guān),針對(duì)AXL及PI3K/AKT通路抑制劑或藥物的研發(fā)有望改善膽囊癌患者的預(yù)后。
【關(guān)鍵詞】：膽囊癌 AXL PI3K RNA干擾
【學(xué)位授予單位】：蚌埠醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R735.8
【目錄】：

• 中文摘要5-6
• 英文摘要6-7
• 1 前言7-9
• 2 材料和方法9-14
• 3 結(jié)果14-21
• 4 討論21-25
• 5 結(jié)論25-26
• 6 參考文獻(xiàn)26-29
• 7 致謝29-30
• 附錄30-37
• 附錄A 中英文屬于縮略語(yǔ)對(duì)照表30-31
• 附錄B 個(gè)人簡(jiǎn)歷31-32
• 附錄C 綜述32-37
• 參考文獻(xiàn)36-37

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：615798