本文關(guān)鍵詞：SiRNA沉默F(xiàn)GFR3基因表達(dá)對(duì)肺癌A549細(xì)胞侵襲性的影響

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【摘要】：目的探討人成纖維細(xì)胞生長因子3(Fibroblast growth factor3,FGFR3)基因沉默對(duì)人類肺腺癌A549細(xì)胞侵襲能力及其對(duì)基質(zhì)金屬蛋白酶9(Matrix metaloproteinases 9,MMP9)及基因表達(dá)的影響。方法細(xì)胞分為3組:A組:實(shí)驗(yàn)組,即FGFR3特異性小干擾RNA(Small interfering RNA,siRNA)(siRNA-FGFR3)干擾組;B組:陰性對(duì)照組,即FGFR3非特異性陰性對(duì)照siRNA(si RNA-NC)干擾組;C組:空白對(duì)照組,無siRNA干擾;通過核酸轉(zhuǎn)染試劑脂質(zhì)體LipofectamineTM2000(Lipo2000)轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞;倒置熒光顯微鏡觀察Lipo2000轉(zhuǎn)染效率;轉(zhuǎn)染后A549細(xì)胞的侵襲能力用Transwell實(shí)驗(yàn)檢測;實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(Real-time quantitative polymerase chain reaction,Real-time PCR)用于檢測轉(zhuǎn)染前后FGFR3及MMP9 m RNA的表達(dá)水平;蛋白質(zhì)印跡法(Western blot)檢測轉(zhuǎn)染前后FGFR3及MMP9蛋白質(zhì)表達(dá)水平。結(jié)果Lipo2000介導(dǎo)的FAM-siRNA對(duì)肺腺癌A549細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率可達(dá)80%;在轉(zhuǎn)染36 h后,Transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示A組較B組、C組侵襲能力顯著降低(P0.01)。Real-time PCR結(jié)果顯示,A組較B、C組的FGFR3和MMP9基因表達(dá)量明顯下調(diào)(P0.01)。Western blot結(jié)果顯示,A組較B、C組的FGFR3和MMP9蛋白表達(dá)量明顯下調(diào)(P0.01)。結(jié)論FGFR3基因沉默可明顯抑制肺腺癌A549細(xì)胞的侵襲能力,并能下調(diào)MMP9表達(dá)。本實(shí)驗(yàn)為肺癌的治療提供了新的治療靶點(diǎn)。
【關(guān)鍵詞】：肺癌 MMP9 RNA干擾 siRNA FGFR3
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R734.2
【目錄】：

• 摘要2-3
• Abstract3-5
• 引言5-6
• 第一章 實(shí)驗(yàn)材料6-8
• 1.1 細(xì)胞株6
• 1.2 實(shí)驗(yàn)儀器6-7
• 1.3 實(shí)驗(yàn)試劑7-8
• 第二章 實(shí)驗(yàn)方法與步驟8-10
• 2.1 細(xì)胞培養(yǎng)8
• 2.2 細(xì)胞的轉(zhuǎn)染與實(shí)驗(yàn)分組8
• 2.3 觀察轉(zhuǎn)染效率8
• 2.4 Transwell實(shí)驗(yàn)檢測A549細(xì)胞的侵襲能力8-9
• 2.6 Real-time PCR檢測A549細(xì)胞FGFR3及MMP9 mRNA的表達(dá)9
• 2.7 Western blot檢測A549細(xì)胞FGFR3及MMP9蛋白的表達(dá)9-10
• 2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析10
• 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果10-14
• 3.1 脂質(zhì)體Lipo2000介導(dǎo)的FAM-siRNA對(duì)肺癌細(xì)胞A549的轉(zhuǎn)染效率的觀察10-11
• 3.2 siRNAFGFR3沉默F(xiàn)GFR3表達(dá)抑制A549細(xì)胞侵襲力11
• 3.3 siRNA-FGFR3轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞對(duì)FGFR3、MMP9mRNA表達(dá)的影響11-12
• 3.4 siRNA-FGFR3轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞對(duì)FGFR3、MMP9蛋白表達(dá)的影響12-14
• 第四章 討論14-15
• 第五章 結(jié)論15-16
• 參考文獻(xiàn)16-18
• 綜述18-41
• 綜述參考文獻(xiàn)27-41
• 學(xué)位期間的研究成果41-42
• 致謝42-43

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 石岳泉;楊向紅;;非小細(xì)胞肺癌的驅(qū)動(dòng)基因及其臨床意義[J];中國肺癌雜志;2014年06期

2 劉明;周承志;鄭麗霞;歐陽銘;;自噬在表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑耐藥中的作用[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2014年16期

3 王旭洲;陳煒生;余英豪;;非小細(xì)胞肺癌患者EML4-ALK融合基因突變研究[J];中國肺癌雜志;2015年02期

4 鄭明英;張力;;克唑替尼治療ALK融合基因陽性的晚期非小細(xì)胞肺癌患者的療效分析[J];癌癥進(jìn)展;2015年01期

5 Peter B.Alexander;Xiao-Fan Wang;;Resistance to receptor tyrosine kinase inhibition in cancer:molecular mechanisms and therapeutic strategies[J];Frontiers of Medicine;2015年02期

6 Sha Fu;Hai?Yun Wang;Fang Wang;Ma?Yan Huang;Ling Deng;Xiao Zhang;Zu?Lu Ye;Jian?Yong Shao;;Clinicopathologic characteristics and therapeutic responses of Chinese patients with non-small cell lung cancer who harbor an anaplastic lymphoma kinase rearrangement[J];Chinese Journal of Cancer;2015年09期

7 韓振中;;非小細(xì)胞肺癌患者EML4-ALK融合基因檢測及其臨床特征分析[J];福建醫(yī)藥雜志;2016年01期

8 楊清海;陳惠玲;鄭智勇;;肺腺癌臨床病理研究新進(jìn)展[J];臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志;2014年01期

9 彭全洲;陳灼懷;王曉玫;左敏;劉漢勇;胡錦濤;成志強(qiáng);;腹腔上皮樣炎性肌纖維母細(xì)胞肉瘤2例臨床病理觀察[J];臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志;2015年05期

10 王杰;衣素琴;王歡;周s，

本文編號(hào)：614992