本文關(guān)鍵詞：不良心理應(yīng)激對人卵巢癌荷瘤裸鼠原位移植瘤差異蛋白表達的影響

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【摘要】：研究背景:卵巢癌(epithelial ovarian cancer EOC)是常見的女性生殖器惡性腫瘤,由于卵巢居于盆腔內(nèi),且早期臨床癥狀無特異性,診斷非常困難,發(fā)現(xiàn)時已多有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移,病死率占女性生殖器官惡性腫瘤的首位。雖然卵巢癌手術(shù)、放療和化療等治療方法的不斷改進,但治療效果尚不理想,近三十年死亡率并沒有下降趨勢,五年生存率始終徘徊在30%-40%,嚴(yán)重威脅女性的生命健康。隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)模式向生物-心理-社會模式轉(zhuǎn)換,逐漸發(fā)現(xiàn)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展受多種因素的影響。不良心理因素能促進各種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展已經(jīng)成為定論,人們逐漸把腫瘤視為一種心身疾病,但其機制并不明了。因此,深入研究心理因素與腫瘤發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系及其影響機制,并利用心理治療來控制腫瘤的發(fā)生、發(fā)展,或通過改變腫瘤患者的免疫狀態(tài)來阻止腫瘤生長,已越來越成為腫瘤醫(yī)學(xué)研究所關(guān)注的重點。研究目的:1、構(gòu)建不良心理應(yīng)激人卵巢癌荷瘤裸鼠原位移植瘤動物模型。2、探索不良心理應(yīng)激對荷人卵巢癌裸鼠原位移植瘤差異蛋白表達的影響,探尋慢性心理應(yīng)激促進卵巢癌發(fā)生發(fā)展的分子機制。研究方法:1、裸鼠分組及建立裸鼠慢性心理應(yīng)激模型;2、建立人卵巢癌荷瘤裸鼠皮下移植瘤模型;3、建立人卵巢癌荷瘤裸鼠原位移植瘤模型;4、原位移植瘤組織樣本蛋白提取;5、Western blot檢測不良心理應(yīng)激對裸鼠原位移植瘤瘤體組織中Prdx1,SOD1,GSTO1,Nm23,CKM這5種蛋白表達的影響;6、免疫組化驗證不良心理應(yīng)激對荷瘤裸鼠瘤體組織中Prdx1,SOD1,GSTO1,Nm23,CKM這5種蛋白表達的影響;結(jié)果:1不良心理應(yīng)激對原位移植瘤裸鼠的一般生存狀態(tài)及裸鼠體重的影響實驗開始的前3天應(yīng)激組裸鼠反應(yīng)強烈,焦躁不安,數(shù)日后有所適應(yīng),與對照組相比,應(yīng)激組裸鼠整體的一般生長狀態(tài)不佳,攝食量少,活動意愿及活動范圍下降,反應(yīng)遲鈍,體重增加較對照組緩慢,但攝水量相當(dāng),試驗過程中無裸鼠死亡。試驗結(jié)束后,應(yīng)激組裸鼠體重明顯低于非應(yīng)激組,組間比較體重差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),而在試驗開始前,兩組裸鼠組間比較體重差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。2不良心理應(yīng)激對荷人卵巢癌原位移植瘤裸鼠瘤體重量的影響人卵巢癌組織裸鼠原位接種術(shù)后4周左右,可于裸鼠腹部捫及質(zhì)硬的腫物樣結(jié)節(jié),隨時間推移,腫物逐漸增大,腹圍增加,皮下脂肪減少。大體上觀,應(yīng)激組裸鼠的腹部腫物生長要比非應(yīng)激組更快。整個試驗過程均無裸鼠死亡,原位移植瘤成瘤率100%。試驗結(jié)束后仔細(xì)剝出腫瘤稱重,應(yīng)激組裸鼠瘤重明顯高于非應(yīng)激組,組間比較瘤體重量差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。3裸鼠原位移植瘤組織中5種蛋白的westernblotting結(jié)果westernblotting實驗結(jié)果顯示,經(jīng)檢測的5種蛋白中,其中prdx1,sod1,gsto1,nm23這4種蛋白的表達在應(yīng)激組裸鼠原位移植瘤組織中明顯高于對照組;而ckm蛋白的表達在應(yīng)激組裸鼠原位移植瘤組織中明顯低于非應(yīng)激組,組間比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。4人卵巢癌荷瘤裸鼠原位移植瘤組織的免疫組化結(jié)果應(yīng)激組和非應(yīng)激組裸鼠的原位移植瘤組織經(jīng)he染色后經(jīng)鏡檢證實為低分化腺癌,符合卵巢癌的病理特征。兩組裸鼠的原位移植瘤組織均經(jīng)免疫組織化學(xué)染色處理后鏡檢,與非應(yīng)激相比,應(yīng)激組裸鼠原位移植瘤組織中prdx1,sod1,gsto1,nm23蛋白陽性率明顯高于對照組;而原位移植瘤組織中ckm蛋白則低于對照組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。結(jié)論:本實驗成功建立了不良心理應(yīng)激荷人卵巢癌裸鼠原位移植瘤模型,進一步證實了不良心理應(yīng)激可能導(dǎo)致卵巢腫瘤蛋白表達發(fā)生變化,而這些蛋白可能參與了細(xì)胞能量代謝的調(diào)節(jié),細(xì)胞骨架的形成和細(xì)胞增殖、分化、凋亡等過程,從而來影響卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸,為揭示不良心理因素和卵巢癌的關(guān)系提供了新的分子生物學(xué)方面的理論依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：不良心理應(yīng)激 卵巢癌 原位移植瘤 蛋白質(zhì) Western blotting 免疫組化
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R737.31
【目錄】：

• 摘要3-6
• ABSTRACT6-12
• 中英文縮略詞表12-14
• 第1章 引言14-17
• 第2章 材料與方法17-29
• 2.1 實驗材料、試劑及儀器17-20
• 2.1.1 實驗動物17
• 2.1.2 卵巢癌實體瘤組織17
• 2.1.3 主要試劑與材料17-19
• 2.1.4 主要實驗儀器設(shè)備19-20
• 2.2 主要試劑的配制20-22
• 2.2.1 組織蛋白質(zhì)提取相關(guān)試劑配制20
• 2.2.2 Western blot實驗主要試劑的配制20-21
• 2.2.3 免疫組化實驗主要試劑的配制21-22
• 2.3 實驗方法22-28
• 2.3.1 裸鼠慢性心理應(yīng)激模型的建立22
• 2.3.2 建立人卵巢癌荷瘤裸鼠皮下移植瘤模型22-23
• 2.3.3 建立人卵巢癌荷瘤裸鼠原位移植瘤模型23
• 2.3.4 裸鼠原位移植瘤組織蛋白提取23-24
• 2.3.5 荷瘤裸鼠瘤體組織蛋白的Western blot檢測24-25
• 2.3.6 荷瘤裸鼠瘤體組織的免疫組化檢測25-28
• 2.4 統(tǒng)計學(xué)處理28-29
• 第3章 結(jié)果29-35
• 3.1 不良心理應(yīng)激對荷瘤裸鼠一般生存狀態(tài)及裸鼠體重的影響29
• 3.2 不良心理應(yīng)激對荷瘤裸鼠瘤體重量的影響29-30
• 3.3 人卵巢癌荷瘤裸鼠原位移植瘤組織蛋白的Western blotting結(jié)果30-32
• 3.4 人卵巢癌荷瘤裸鼠原位移植瘤組織的免疫組化結(jié)果32-35
• 第4章 討論35-39
• 第5章 結(jié)論與展望39-40
• 致謝40-41
• 參考文獻41-45
• 攻讀學(xué)位期間的成果及榮譽45-46
• 綜述46-57
• 參考文獻53-57

【參考文獻】

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本文編號：610947