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大蒜素制劑抑制人膽管癌細(xì)胞株生長增殖的體外實驗研究

發(fā)布時間:2017-08-02 19:41

  本文關(guān)鍵詞:大蒜素制劑抑制人膽管癌細(xì)胞株生長增殖的體外實驗研究


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【摘要】:[目的]:觀察研究大蒜素(Allicin)對體外培養(yǎng)的人膽管癌細(xì)胞株(QBC939)生長增殖抑制和凋亡誘導(dǎo)的作用,以及對細(xì)胞體外遷移、侵襲能力的影響,為膽管癌臨床治療探索新方法。[方法]:1.測定體外培養(yǎng)的人膽管癌細(xì)胞活力、貼壁率,應(yīng)用四唑鹽比色法(MTT)測定膽管癌細(xì)胞在不同時間、不同濃度的OD值,繪制生長曲線,確定實驗的最佳細(xì)胞培養(yǎng)時間;2.四唑鹽比色法(MTT)測定不同時間、不同濃度的大蒜素制劑(Allicin)對人膽管癌細(xì)胞株的生長增殖抑制率并于倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化,確定藥物的IC 50;3.流式細(xì)胞術(shù)檢測IC50濃度大蒜素制劑(Allicin)對人膽管癌細(xì)胞周期的影響及分析證實凋亡的存在;4、細(xì)胞劃痕實驗檢測大蒜素(Allicin)對人膽管癌細(xì)胞遷移、侵襲能力的作用。[結(jié)果]:1.人膽管癌細(xì)胞株常規(guī)培養(yǎng),存活率均95%符合本實驗要求,MTT測定的生長曲線提示按照6×103/孔的密度接種于96孔板內(nèi)可提供足夠的細(xì)胞生長空間及營養(yǎng)成分,使細(xì)胞接種12小時后,適應(yīng)新環(huán)境,逐漸進(jìn)入快速繁殖期。2.選取細(xì)胞接種于96孔板后的24小時左右,該區(qū)間能夠保證細(xì)胞始終處于一個穩(wěn)定的對數(shù)生長期,在此條件下MTT法檢測不同濃度大蒜素對人膽管癌細(xì)胞生長抑制率具有時間和劑量依賴性并確定IC50為7.25mg/L。3.流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果顯示,大蒜素誘導(dǎo)人膽管癌細(xì)胞凋亡,IC50藥物濃度作用于人膽管癌細(xì)胞株(QBC939)細(xì)胞24h后,與對照組比較,G0/G1期細(xì)胞減少(P0.01),G2/M期細(xì)胞增多(P0.01),S期細(xì)胞無明顯變化(P0.05)。4、細(xì)胞劃痕實驗結(jié)果顯示大蒜素能夠明顯降低人膽管癌細(xì)胞的遷移、侵襲能力。[結(jié)論]:本實驗提示:1.大蒜素(Allicin)在體外實驗中對人膽管癌細(xì)胞增殖具有抑制作用,且呈濃度、時間依賴性。2.大蒜素(Allicin)能誘導(dǎo)人膽管癌細(xì)胞株凋亡作用并使細(xì)胞周期阻滯于G2/M期。3.大蒜素(Allicin)能夠明顯降低人膽管癌細(xì)胞的遷移、侵襲能力。4.可能是有前景的抑制膽管癌細(xì)胞的藥物。
【關(guān)鍵詞】:大蒜素制劑 人膽管癌細(xì)胞株 體外實驗 凋亡 細(xì)胞周期 細(xì)胞侵襲能力
【學(xué)位授予單位】:昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R735.8
【目錄】:
  • 中英文縮略詞表5-6
  • 中文摘要6-8
  • 英文摘要8-9
  • 引言9-11
  • 材料和方法11-22
  • 結(jié)果22-34
  • 討論34-39
  • 結(jié)論39-40
  • 展望40-41
  • 參考文獻(xiàn)41-45
  • 文獻(xiàn)綜述45-51
  • 參考文獻(xiàn)49-51
  • 讀碩士期間發(fā)表文章情況及獲獎情況51-52
  • 致謝52

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號:610946

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