本文關(guān)鍵詞：外周血exosome中miRNA在肝癌中的臨床意義

  更多相關(guān)文章： miRNA 肝癌 exosome

【摘要】：目的原發(fā)性肝細(xì)胞肝癌是臨床上最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,肝癌在全球死亡率居高不下,肝癌的早期診斷對(duì)病人的生存至關(guān)重要,絕大部分早期肝癌可以通過(guò)手術(shù)進(jìn)行治愈性治療,因此發(fā)現(xiàn)一種新的早期診斷肝癌的標(biāo)志物尤其迫切。exosome與miRNA在診斷肝癌方面已經(jīng)被越來(lái)越多的人關(guān)注,Exosome是由多種細(xì)胞可分泌的直徑為納米量級(jí)的膜性小囊泡結(jié)構(gòu)。其中含有腫瘤特定的蛋白質(zhì)與核酸,而這些物質(zhì)使得exosome具有一些生物學(xué)特性。又因?yàn)閑xosome具有雙側(cè)膜結(jié)構(gòu),可以很好的保護(hù)內(nèi)含物,而exosome又具有富集作用。據(jù)此,我們可以把exosome作為診斷腫瘤的標(biāo)志物。本研究根據(jù)前期實(shí)驗(yàn)室對(duì)于exosome與血漿miRNA芯片分析為基礎(chǔ),利用相對(duì)定量PCR方法,以exosome獨(dú)特的生物學(xué)功能方面,結(jié)合其中含有的miRNA可作為診斷肝癌的標(biāo)志物進(jìn)行驗(yàn)證,并與血漿中miRNA在作為標(biāo)志物的敏感性與特異性上進(jìn)行比較。最終探討以exosomal miRNA組合作為肝癌診斷標(biāo)志物的可能性。方法本實(shí)驗(yàn)的血漿標(biāo)本均收集本醫(yī)院、本科室隨機(jī)收集的未經(jīng)任何標(biāo)準(zhǔn)治療肝癌病人血漿(乙肝-肝硬化-肝癌),共50例。所有標(biāo)本均經(jīng)病例檢查證實(shí)。對(duì)照組采用同醫(yī)院與實(shí)驗(yàn)組同一時(shí)期隨機(jī)收集的肝硬化病人血漿50例,以及正常健康人血漿20例。應(yīng)用Affymetrix以做miRNA的芯片分析；利用tapman探針?lè)ǖ南鄬?duì)定量PCR以檢測(cè)：niRNA在血漿中與exosome中得表達(dá)含量。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：采用prism軟件作圖并進(jìn)行ROC曲線分析,測(cè)出各個(gè)miRNA的敏感性與特異性；采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,并計(jì)算miRNA panel的敏感性與特異性,P0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1.3例肝癌病人、3例肝硬化病人以及3例正常健康人血漿和exosome溶液進(jìn)行niRNA芯片分析結(jié)果顯示Exosome組中測(cè)得204個(gè)表達(dá)差異有意義的miRNA,遠(yuǎn)高于血漿組的92個(gè),我們通過(guò)芯片結(jié)果還發(fā)現(xiàn)exosome組與血漿組相包含的miRNA有43個(gè)2.在36例肝癌與38例對(duì)照組(18例肝硬化,20例正常人)miRNA26a比較：(1)肝癌組與肝硬化組exosomal miRNA26a相比較,敏感性為82%,特異性為100%,二者比較差異非常顯著(P0.01),而肝癌與肝硬化外周血比較,miRNA26a敏感性為68%,特異性為100%,二者比較差異非常顯著(P0.01)(2)肝癌組與正常組exosomal miRNA26a相比較,敏感性為100%,特異性為100%,二者比較差異非常顯著(P0.01),而肝癌與健康人外周血比較,miRNA199a敏感性為50%,特異性為95%,二者比較差異非常顯著(P0.01)(3)肝硬化與正常組exosomal miRNA26a相比較,敏感性為90%,特異性為89%,二者比較差異非常顯著(P0.01),而肝硬化與健康人外周血比較,miRNA26a敏感性為88%,特異性為50%,二者無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.51)。3.在20例肝癌與31例對(duì)照組(11例肝硬化,20例正常人)miRNA199a比較：(1)肝癌組與肝硬化組exosomal miRNA199a目比較,敏感性為59%,特異性為89%,二者比較差異顯著(P0.05),而肝癌與肝硬化外周血比較,miRNA199a敏感性為67%,特異性為83%,二者比較差異非常顯著(P0.01)(2)肝癌組與正常組exosomal miRNA 199a相比較,敏感性為1000%,特異性為100%,二者比較差異非常顯著(P0.01),而肝癌與健康人外周血比較,miRNA199a敏感性為67%,特異性為89%,二者比較差異非常顯著(P0.01)(3)正常組與肝硬化組exosomal miRNA199a相比較,敏感性為100%,特異性為100%,二者比較差異非常顯著(P0.01),而肝硬化與健康人外周血比較,miRNA26a敏感性為67%,特異性為61%,二者無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.25)4.在20例肝癌與40例對(duì)照組(20例肝硬化,20例正常人)miRNA29c比較：(1)肝癌與肝硬化組exosomal miRNA29c相比較,敏感性為79%,特異性為86%,二者比較差異非常顯著(P0.01),而肝癌與肝硬化外周血比較,miRNA29c敏感性為83%,特異性為45%,二者比較差異不顯著(P=0.59)(2)肝癌組與正常組exosomal miRNA29c相比較,敏感性為1000%,特異性為100%,二者比較差異非常顯著(P0.01),而肝癌與健康人外周血比較,miRNA199a敏感性為50%,特異性為90%,二者比較差異非常顯著(P0.01)(3)正常組與肝硬化組exosomal miRNA29c相比較,敏感性為100%,特異性為100%,二者比較差異非常顯著(P0.01),而肝硬化與健康人外周血比較,miRNA29c敏感性為55%,特異性為95%,二者比較差異非常顯著(P0.01)5.在20例肝癌與30例對(duì)照組外周exosome中,我們利用spss軟件對(duì)miRNA26a、miRNA29c和miRNA199a進(jìn)行多元邏輯回歸分析,測(cè)出niRNA panel敏感性為94%,特異性為90%,二者比較差異非常顯著(P0.01)6.我們對(duì)20例肝癌與10例正常組exosome中miRNA122做相對(duì)定量PCR,測(cè)出敏感性89%,特異性100%,二者比較差異非常顯著(P0.01),而血漿組敏感性為83%,特異性為100%,二者比較差異非常顯著(P0.01)結(jié)論1.肝硬化和健康人的miRNA-26a、miRNA-29c和miRNA-199a表達(dá)水平均高于肝癌組2.在診斷肝癌和肝硬化上,Exosome中的niRNA-26a比血漿擁有更高的敏感性和特異性；3.在診斷肝癌和肝硬化上,Exosome中的niRNA-29c比血漿擁有更高的敏感性和特異性；4.在診斷肝癌,Exosome中miRNA-199a比血漿擁有更高的敏感性,而在診斷肝硬化上,exosome中的miRNA-199比血漿擁有更高的敏感性和特異性；5. Exosome miRNA panel比單獨(dú)miRNA-26a、miRNA-29c和miRNA-199a診斷肝癌具有更高的敏感性和特異性；6.肝癌組miRNA-122表達(dá)水平高于正常人群組；7. miRNA-122在exosome中具有更高的敏感性。
【關(guān)鍵詞】：miRNA 肝癌 exosome
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.7
【目錄】：

• 中文摘要5-8
• 英文摘要8-13
• 前言13-15
• 第一部分 肝癌、肝硬化病人和正常人外周血與exosome中miRNA芯片分析15-26
• 1 材料與方法15-18
• 2 結(jié)果18-24
• 3 討論24-26
• 第二部分 討論exosomal miRNA26a、miRNA199a與miRNA29c作為診斷肝癌標(biāo)志物的可能性26-41
• 1 材料與方法26-29
• 2 結(jié)果29-38
• 3 討論38-41
• 第三部分 討論exsomal miRNA122作為診斷肝癌標(biāo)志物的可能性41-47
• 1 材料與方法41-44
• 2 結(jié)果44-45
• 3 討論45-47
• 全文總結(jié)47
• 參考文獻(xiàn)47-51
• 綜述51-67
• 參考文獻(xiàn)56-67
• 附錄：英文縮略語(yǔ)詞表67-68
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況68-69
• 致謝69

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王東關(guān);孫善珍;王振光;王霞;;腫瘤exosome誘導(dǎo)特異性T殺傷細(xì)胞的研究[J];華西口腔醫(yī)學(xué)雜志;2006年02期

2 王東關(guān);孫善珍;王振光;施琳;王霞;;腫瘤exosome誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性T細(xì)胞的特異性殺傷作用[J];山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2006年02期

3 張?jiān)谠?李希德;劉葉;王志侖;潘祥林;;肺癌細(xì)胞裂解物負(fù)載對(duì)樹(shù)突狀細(xì)胞分泌的exosome誘導(dǎo)抗腫瘤作用的影響[J];山東醫(yī)藥;2011年31期

4 薩仁高娃;吳巖;肖文華;;exosome與腫瘤免疫治療的研究進(jìn)展[J];感染.炎癥.修復(fù);2008年03期

5 金錚;于金錄;楊Pr;李超;黃海燕;;膠質(zhì)瘤來(lái)源exosome的鑒定及其蛋白質(zhì)組成研究[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué);2010年09期

6 杜嘉瑞;張路遙;楊洪發(fā);別黎;徐惠勇;陳立兵;鞠硯;;膠質(zhì)瘤細(xì)胞來(lái)源exosome的鑒定及其蛋白組成研究[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué);2008年01期

7 張堯;張家摸;何百成;羅春麗;吳小候;;腎癌細(xì)胞來(lái)源exosome的制備和免疫相關(guān)蛋白組成的初步研究[J];重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2010年01期

8 元小寧;朱運(yùn)峰;;外泌體(Exosome)及其在腫瘤調(diào)控中的作用[J];中國(guó)生物工程雜志;2013年08期

9 沈宜;向自武;陳國(guó)慶;謝瑩珊;鄭維萍;;As_2O_3聯(lián)合H_(22)源exosome的抗腫瘤作用研究[J];激光雜志;2009年04期

10 耿建;金潔;陳龍邦;;以exosome為基礎(chǔ)的腫瘤免疫治療研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào);2006年09期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 秦霞;邱峰;;近年來(lái)國(guó)內(nèi)外關(guān)于exosome研究的文獻(xiàn)計(jì)量學(xué)分析[A];2010年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第十屆中國(guó)藥師周論文集[C];2010年

2 張琳;鄭桂娜;萬(wàn)宇峰;郭一鳴;魏盼盼;郭金虎;;exosome復(fù)合物對(duì)生物鐘基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控研究[A];中國(guó)的遺傳學(xué)研究——遺傳學(xué)進(jìn)步推動(dòng)中國(guó)西部經(jīng)濟(jì)與社會(huì)發(fā)展——2011年中國(guó)遺傳學(xué)會(huì)大會(huì)論文摘要匯編[C];2011年

3 顧麗亞;惠杰;;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞exosome對(duì)自身心肌分化及抗凋亡實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十五次全國(guó)心血管病學(xué)大會(huì)論文匯編[C];2013年

4 孫禎;宋亞軍;黃赤兵;;大鼠腸系膜淋巴結(jié)和外周淋巴結(jié)固有exosome的制備[A];2013中國(guó)器官移植大會(huì)論文匯編[C];2013年

5 徐保鋒;黃海燕;關(guān)毅;吳宣萱;;膠質(zhì)瘤源性exosome的研究進(jìn)展[A];2011中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)外科學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

6 Hong-Wei Wang;;Alternative pathways of RNA recruitment in yeast exosome revealed by single particle electron microscopy[A];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)第十一次會(huì)員代表大會(huì)暨2014年全國(guó)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集——專題報(bào)告一[C];2014年

7 ;Characterations and functions of exosome[A];2012全國(guó)臨床微生物與感染免疫學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2012年

8 孫禎;黃赤兵;;各淋巴組織源性exosome的收集方法比較的研究[A];2012中國(guó)器官移植大會(huì)論文匯編[C];2012年

9 宋亞軍;黃赤兵;;探討小鼠腸系膜淋巴結(jié)exosome對(duì)外周血T細(xì)胞增殖的影響[A];2013中國(guó)器官移植大會(huì)論文匯編[C];2013年

10 卜寧;孫秉中;李奇靈;于華;;K562細(xì)胞分泌的exosome電鏡標(biāo)本的制備及觀察[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第八次全國(guó)血液學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

1 王汝霖;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源exosome對(duì)大鼠腎缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 卜寧;慢性髓細(xì)胞白血病細(xì)胞分泌的exosome的抗白血病作用研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2006年

3 王東關(guān);負(fù)載exosome的樹(shù)突狀細(xì)胞誘導(dǎo)抗舌鱗癌效應(yīng)的研究[D];山東大學(xué);2006年

4 彭澎;卵巢癌患者腹水來(lái)源exosome對(duì)機(jī)體抗卵巢癌免疫功能影響的實(shí)驗(yàn)研究及其蛋白質(zhì)組成分析[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2007年

5 吳塵軒;增強(qiáng)樹(shù)突狀細(xì)胞及其相關(guān)exosome抗肝癌免疫效應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2008年

6 黃海燕;膠質(zhì)瘤及膠質(zhì)瘤細(xì)胞株源exosome的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];吉林大學(xué);2008年

7 余雪松;口服RDP58肽誘導(dǎo)的Treg源性exosomes抑制大鼠腎移植排斥的研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2012年

8 郭軍;熱休克腫瘤細(xì)胞上清及EXOSOME中趨化因子的發(fā)現(xiàn)及一種非細(xì)胞結(jié)構(gòu)性新型高效腫瘤疫苗的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2002年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 周葉;冠心病人血清外泌體miRNA表達(dá)譜分析[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2015年

2 劉振方;CD151在直腸癌組織及尿液exosome小體中表達(dá)的對(duì)比研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

3 王碩;外周血exosome中miRNA在肝癌中的臨床意義[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2015年

4 呂浩;不同預(yù)處理方法對(duì)MSCs分泌的exosomes免疫調(diào)節(jié)功能影響的研究[D];蘇州大學(xué);2015年

5 張路遙;膠質(zhì)瘤源性exosome分離和提純的實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2007年

6 孫禎;腸系膜淋巴結(jié)固有exosome的制備及其對(duì)異體淋巴細(xì)胞增殖的影響[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

7 杜嘉瑞;膠質(zhì)瘤來(lái)源exosome的鑒定及其蛋白組成研究[D];吉林大學(xué);2007年

8 顧麗亞;大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞exosome對(duì)自身心肌分化及抗凋亡實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2013年

9 李超;膠質(zhì)瘤源性exosome的提取及其蛋白組成研究[D];吉林大學(xué);2011年

10 孫斐;exosome在胃癌患者血清中的表達(dá)及臨床意義[D];蘇州大學(xué);2014年

，

本文編號(hào)：608730