本文關(guān)鍵詞：miR-202在原發(fā)性肝細(xì)胞癌中的表達(dá)及臨床意義初步研究

  更多相關(guān)文章： 原發(fā)性肝癌 mi R-202 生物標(biāo)記物 Hedgehog通路 Gli1

【摘要】：背景:肝細(xì)胞癌是一種常見的高惡性程度的消化系統(tǒng)腫瘤,死亡率居全球第三。肝癌早期診斷水平與其預(yù)后息息相關(guān),但由于其早期發(fā)現(xiàn)困難,確診多屬腫瘤晚期,導(dǎo)致傳統(tǒng)放化療及手術(shù)治療效果不佳。目前肝癌診斷主要依靠血清AFP水平,但其敏感性及特異性不甚理想,因此尋找新的無創(chuàng)生物標(biāo)記物尤為重要。大量研究發(fā)現(xiàn)miRNAs與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),且具有很強(qiáng)的細(xì)胞、組織特異性,可作為潛在的診斷標(biāo)志物。miRNA是一類小分子非編碼RNA,因其靶基因眾多、調(diào)控機(jī)制復(fù)雜成為近來研究熱點(diǎn)。研究表明肝癌中存在許多信號(hào)通路的異常激活,例如Notch、Wnt及Hedgehog(Hh)通路等。其中Hh通路是一條在胚胎發(fā)育時(shí)期調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)與分化的高度保守的形態(tài)發(fā)生通路,其異常激活與肝癌的發(fā)生、發(fā)展緊密相關(guān)。Glil(Glioma-associated Oncogene Homolog l,Glil)基因是Hh通路的核轉(zhuǎn)錄因子,其激活直接導(dǎo)致Hh信號(hào)通路下游目的基因轉(zhuǎn)錄水平的改變。已有文獻(xiàn)報(bào)道m(xù)iRNA可以靶向抑制Hh信號(hào)通路因子參與Hh信號(hào)通路的活化,兩者協(xié)同調(diào)控腫瘤的發(fā)生、發(fā)展進(jìn)程。在眾多靶向調(diào)控Gli1基因的肝癌相關(guān)miRNAs中,miR-202在肝癌組織中的表達(dá)水平僅被報(bào)道一次,迄今尚無文獻(xiàn)報(bào)道m(xù)iR-202在肝癌血清中的表達(dá)水平及其與肝癌患者臨床病理特征之間的聯(lián)系,以及在肝癌發(fā)生、發(fā)展過程中與Hh通路之間的相互作用。本研究通過檢測(cè)miR-202在原發(fā)性肝癌中的表達(dá)水平,分析其在肝癌中的臨床意義及潛在診斷價(jià)值,進(jìn)一步探討Hh通路在肝癌中的的協(xié)同調(diào)控機(jī)制。目的:檢測(cè)miR-202在肝癌細(xì)胞、FFPE組織及血清中的表達(dá)情況,分析miR-202表達(dá)量與肝癌臨床病理參數(shù)之間的聯(lián)系,評(píng)價(jià)mir-202作為特異性生物標(biāo)志物對(duì)肝癌的潛在診斷價(jià)值,初步探討mir-202與hedgehog通路在肝癌中的作用,為進(jìn)一步深入了解肝癌發(fā)病的分子機(jī)制提供依據(jù)。方法:采用real-timert-pcr方法,分別以lo2細(xì)胞株、正常肝臟ffpe組織及健康志愿者血清作為對(duì)照,以u(píng)6為內(nèi)參,檢測(cè)mir-202在肝癌細(xì)胞株、ffpe組織及血清標(biāo)本中的中的表達(dá)情況,分析其與肝癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系,并利用spss21.0軟件繪制mir-202、afp及兩者聯(lián)合對(duì)肝癌的診斷roc曲線,評(píng)價(jià)mir-202對(duì)肝癌的潛在診斷價(jià)值;以正常肝臟ffpe組織作為對(duì)照,以gadph基因作為內(nèi)參,檢測(cè)gli1基因在肝癌中的表達(dá)水平,采用spss軟件分析其與mir-202表達(dá)水平之間的相關(guān)性,為進(jìn)一步深入探討肝癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制提供初步依據(jù)。其中3株肝癌細(xì)胞株和lo2細(xì)胞為重慶醫(yī)科大學(xué)臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室惠贈(zèng),70例肝癌ffpe組織及血清標(biāo)本來自四川醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院2013年07月-2014年09月診治的70例原發(fā)性肝癌患者。結(jié)果:1.mir-202在肝癌細(xì)胞株中的表達(dá)較人正常肝細(xì)胞系lo2的表達(dá)均顯著降低(p0.05),mir-202在肝癌癌細(xì)胞株hepg2的表達(dá)量最低(0.0394±0.0141),顯著低于lo2細(xì)胞株(p0.05);肝癌ffpe組織及血清mir-202表達(dá)量均較正常對(duì)照顯著降低(p0.05)。2.肝癌ffpe中mir-202的低表達(dá)和肝癌患者的年齡、性別、腫瘤部位、腫瘤最大徑、臨床分期、局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和afp濃度等腫瘤臨床特征無關(guān)(p0.05);肝癌血清mir-202表達(dá)量?jī)H與腫瘤數(shù)目有關(guān)(p0.05);mir-202在同一患者肝癌血清中的表達(dá)量(0.33±0.30)顯著低于肝癌組織標(biāo)本中表達(dá)量(0.51±0.26)(p0.05)。3.mir-202和afp腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)可獲得較高的敏感度(81.8%)和特異度(93.0%),曲線下面積最大(0.942),并獲得高于單一miR-202或者AFP的特異性、Youden指數(shù)、陽性似然比/陰性似然比。4.Gli1基因在肝癌組織中的表達(dá)水平(3.45±2.07)相較于正常肝臟組織(1.34±0.58)明顯升高,兩組之間差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),在肝癌FFPE組織中,mi R-202表達(dá)水平與Gli1基因表達(dá)水平存在一定相關(guān)性(r=0.583,P0.005)。結(jié)論:1.miR-202在肝癌發(fā)生、發(fā)展過程中可能發(fā)揮相應(yīng)的生物學(xué)作用,其表達(dá)下調(diào)可能是肝癌發(fā)生的早期事件,且在肝癌中表達(dá)穩(wěn)定。2.miR-202聯(lián)合AFP對(duì)肝癌診斷價(jià)值優(yōu)于單一AFP,提示miR-202與AFP的聯(lián)合診斷價(jià)值大于單獨(dú)指標(biāo)的診斷價(jià)值。3.Hh通路中的核轉(zhuǎn)錄因子Gli1在肝癌中可能發(fā)揮一定作用,Gli1基因與miR-202可能在肝癌中的表達(dá)水平存在一定相關(guān)性。
【關(guān)鍵詞】：原發(fā)性肝癌 mi R-202 生物標(biāo)記物 Hedgehog通路 Gli1
【學(xué)位授予單位】：四川醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R735.7
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-10
• 前言10-13
• 第一部分miR-202在肝癌中的表達(dá)情況及其在肝癌中的診斷價(jià)值分析13-37
• 材料與方法13-23
• 結(jié)果23-32
• 討論32-37
• 第二部分 人肝癌組織miR-202與Hedgehog通路中Gli1表達(dá)的相關(guān)性分析37-49
• 材料與方法37-43
• 結(jié)果43-45
• 討論45-49
• 結(jié)論49-50
• 參考文獻(xiàn)50-55
• 英漢縮略詞對(duì)照表55-57
• 致謝57-58
• miRNA與Hh信號(hào)通路在腫瘤中的研究進(jìn)展58-73
• 參考文獻(xiàn)69-73

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 薛洋;曾富春;舒駿;叢偉;;福爾馬林固定石蠟包埋樣本提取的RNA質(zhì)量分析及其臨床應(yīng)用[J];實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué);2015年01期

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本文編號(hào)：603461