結直腸癌、癌前病變中klf6 mRNA與蛋白表達的研究
本文關鍵詞:結直腸癌、癌前病變中klf6 mRNA與蛋白表達的研究
【摘要】:目的:檢測抑癌基因KLF6(kruppel-like factor 6)在結直腸癌、癌前病變(結直腸高級別上皮內瘤變)及癌旁正常黏膜細胞中的表達水平,探討KLF6表達水平分別在各類型組織中相互關系及在結直腸癌病程進展中的作用。方法:標本主要采集皖南醫(yī)學院附屬弋磯山醫(yī)院結直腸癌手術切除后標本總共88例,其中包括病理切片證實為癌組織46例、癌前病變組織(均結直腸高級別上皮內瘤變)21例及正常腸管黏膜組織21例。并取距結直腸癌癌灶邊緣5cm以上的癌旁正常結直腸組織作為對照組。將離體后標本分為兩部分以備用,其中大約500毫克一部分離體后1小時內放入-80攝氏度冰箱中保存,以Q-PCR方法檢測結直腸癌(結直腸癌實驗組)、結直腸癌前病變(癌前病變實驗組)及癌旁組織(對照組)中KLF6表達水平;取標本后大部分術后標本常規(guī)送病理科,后取病理蠟塊用SP法進行免疫組化,并分別檢測結直腸癌、癌前病變及癌旁正常組織中KLF6蛋白表達水平。結果:1免疫組化結果1.1 KLF6蛋白表達定位于結直腸癌細胞、癌前病變細胞及正常結直腸黏膜中的細胞核、細胞質、細胞膜。KLF6在結直腸癌組織中的表達水平顯著低于癌旁正常組織(P0.05);KLF6在結直腸癌癌前病變組織中的表達水平顯著低于癌旁正常組織(P0.05);KLF6在結直腸癌組織的表達與癌前病變組織中表達無明顯差異(P0.05)。1.2 KLF6表達與浸潤情況、分化程度、淋巴結轉移、TNM分期有一定相關性(P0.05);KLF6表達與患者的年齡、性別、腫瘤組織學類型、癌灶大小無明顯相關性(P0.05)。2 Q-PCR實驗結果基因的相對表達量用比較CT值計算,其計算公式為:F_1=2~-ΔΔCT,ΔΔCT值=(結直腸癌組目的基因CT值-結直腸癌組內參基因CT值)-(結直腸癌癌旁組目的基因CT值-癌旁組內參基因CT值);F_2=2~-ΔΔCT,ΔΔCT值=(癌前病變組目的基因CT值-癌前病變組內參基因CT值)-(結直腸癌癌旁組目的基因CT值-癌旁組內參基因CT值)。以癌旁組織為陰性對照組,F以正常組織的ΔCt值作為參照。同樣類似的方法分別兩兩比較結直腸癌、癌前病變及正常組織中KLF6基因相對表達量,實驗結果顯示,正常組織中KLF6基因相對表達量高于結直腸癌癌前組織,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);正常組織中KLF6基因相對表達量高于結直腸癌組織,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);結直腸癌癌前組織中KLF6基因相對表達量高于結直腸癌組織,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論:1 KLF6在結直腸癌組織中的表達水平明顯低于結直腸癌癌旁正常腸管組織(P0.05);KLF6在結直腸癌癌前病變組織中的表達水平明顯低于癌旁正常腸管組織(P0.05);KLF6在結直腸癌組織的表達與癌前病變組織中表達需要進一步的確定。2 KLF6表達與浸潤情況、分化程度、淋巴結轉移、TNM分期有一定相關性(P0.05);KLF6表達與患者的年齡、性別、腫瘤組織學類型、癌灶大小無明顯相關性(P0.05)。所以KLF6基因在結直腸癌疾病的發(fā)展中起到了一定的作用。
【關鍵詞】:結直腸癌 癌前病變 KLF6基因
【學位授予單位】:皖南醫(yī)學院
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R735.34
【目錄】:
- 中英文縮略詞對照表5-7
- 摘要7-9
- ABSTRACT9-11
- 前言11-15
- 研究材料與方法15-25
- 1 主要儀器及實驗試劑15-16
- 1.1 主要儀器型號及生產廠家15
- 1.2 主要試劑及生產廠家15-16
- 2 實驗方法16-24
- 2.1 免疫組化16-19
- 2.2 Q-PCR19-24
- 3 統(tǒng)計方法24-25
- 結果25-31
- 討論31-36
- 結論36-37
- 參考文獻37-43
- 綜述 經肛門直腸全系膜切除術現狀及研究進展43-50
- 參考文獻47-50
- 作者簡介及讀研期間主要科研成果50-51
- 致謝51
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