本文關(guān)鍵詞：結(jié)直腸癌、癌前病變中klf6 mRNA與蛋白表達(dá)的研究

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【摘要】：目的:檢測(cè)抑癌基因KLF6(kruppel-like factor 6)在結(jié)直腸癌、癌前病變(結(jié)直腸高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變)及癌旁正常黏膜細(xì)胞中的表達(dá)水平,探討KLF6表達(dá)水平分別在各類(lèi)型組織中相互關(guān)系及在結(jié)直腸癌病程進(jìn)展中的作用。方法:標(biāo)本主要采集皖南醫(yī)學(xué)院附屬弋磯山醫(yī)院結(jié)直腸癌手術(shù)切除后標(biāo)本總共88例,其中包括病理切片證實(shí)為癌組織46例、癌前病變組織(均結(jié)直腸高級(jí)別上皮內(nèi)瘤變)21例及正常腸管黏膜組織21例。并取距結(jié)直腸癌癌灶邊緣5cm以上的癌旁正常結(jié)直腸組織作為對(duì)照組。將離體后標(biāo)本分為兩部分以備用,其中大約500毫克一部分離體后1小時(shí)內(nèi)放入-80攝氏度冰箱中保存,以Q-PCR方法檢測(cè)結(jié)直腸癌(結(jié)直腸癌實(shí)驗(yàn)組)、結(jié)直腸癌前病變(癌前病變實(shí)驗(yàn)組)及癌旁組織(對(duì)照組)中KLF6表達(dá)水平;取標(biāo)本后大部分術(shù)后標(biāo)本常規(guī)送病理科,后取病理蠟塊用SP法進(jìn)行免疫組化,并分別檢測(cè)結(jié)直腸癌、癌前病變及癌旁正常組織中KLF6蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:1免疫組化結(jié)果1.1 KLF6蛋白表達(dá)定位于結(jié)直腸癌細(xì)胞、癌前病變細(xì)胞及正常結(jié)直腸黏膜中的細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞膜。KLF6在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)水平顯著低于癌旁正常組織(P0.05);KLF6在結(jié)直腸癌癌前病變組織中的表達(dá)水平顯著低于癌旁正常組織(P0.05);KLF6在結(jié)直腸癌組織的表達(dá)與癌前病變組織中表達(dá)無(wú)明顯差異(P0.05)。1.2 KLF6表達(dá)與浸潤(rùn)情況、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期有一定相關(guān)性(P0.05);KLF6表達(dá)與患者的年齡、性別、腫瘤組織學(xué)類(lèi)型、癌灶大小無(wú)明顯相關(guān)性(P0.05)。2 Q-PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果基因的相對(duì)表達(dá)量用比較CT值計(jì)算,其計(jì)算公式為:F_1=2~-ΔΔCT,ΔΔCT值=(結(jié)直腸癌組目的基因CT值-結(jié)直腸癌組內(nèi)參基因CT值)-(結(jié)直腸癌癌旁組目的基因CT值-癌旁組內(nèi)參基因CT值);F_2=2~-ΔΔCT,ΔΔCT值=(癌前病變組目的基因CT值-癌前病變組內(nèi)參基因CT值)-(結(jié)直腸癌癌旁組目的基因CT值-癌旁組內(nèi)參基因CT值)。以癌旁組織為陰性對(duì)照組,F以正常組織的ΔCt值作為參照。同樣類(lèi)似的方法分別兩兩比較結(jié)直腸癌、癌前病變及正常組織中KLF6基因相對(duì)表達(dá)量,實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,正常組織中KLF6基因相對(duì)表達(dá)量高于結(jié)直腸癌癌前組織,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);正常組織中KLF6基因相對(duì)表達(dá)量高于結(jié)直腸癌組織,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);結(jié)直腸癌癌前組織中KLF6基因相對(duì)表達(dá)量高于結(jié)直腸癌組織,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1 KLF6在結(jié)直腸癌組織中的表達(dá)水平明顯低于結(jié)直腸癌癌旁正常腸管組織(P0.05);KLF6在結(jié)直腸癌癌前病變組織中的表達(dá)水平明顯低于癌旁正常腸管組織(P0.05);KLF6在結(jié)直腸癌組織的表達(dá)與癌前病變組織中表達(dá)需要進(jìn)一步的確定。2 KLF6表達(dá)與浸潤(rùn)情況、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期有一定相關(guān)性(P0.05);KLF6表達(dá)與患者的年齡、性別、腫瘤組織學(xué)類(lèi)型、癌灶大小無(wú)明顯相關(guān)性(P0.05)。所以KLF6基因在結(jié)直腸癌疾病的發(fā)展中起到了一定的作用。
【關(guān)鍵詞】：結(jié)直腸癌 癌前病變 KLF6基因
【學(xué)位授予單位】：皖南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R735.34
【目錄】：

• 中英文縮略詞對(duì)照表5-7
• 摘要7-9
• ABSTRACT9-11
• 前言11-15
• 研究材料與方法15-25
• 1 主要儀器及實(shí)驗(yàn)試劑15-16
• 1.1 主要儀器型號(hào)及生產(chǎn)廠家15
• 1.2 主要試劑及生產(chǎn)廠家15-16
• 2 實(shí)驗(yàn)方法16-24
• 2.1 免疫組化16-19
• 2.2 Q-PCR19-24
• 3 統(tǒng)計(jì)方法24-25
• 結(jié)果25-31
• 討論31-36
• 結(jié)論36-37
• 參考文獻(xiàn)37-43
• 綜述 經(jīng)肛門(mén)直腸全系膜切除術(shù)現(xiàn)狀及研究進(jìn)展43-50
• 參考文獻(xiàn)47-50
• 作者簡(jiǎn)介及讀研期間主要科研成果50-51
• 致謝51

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