發(fā)布時間：2017-07-25 14:05

  本文關(guān)鍵詞：鼻咽癌差異miRNAs表達(dá)譜研究

  更多相關(guān)文章： 鼻咽癌 miRNA 差異表達(dá)譜 miR-205 miR-34c-3p

【摘要】：[目的]:通過miRNA芯片技術(shù)獲得鼻咽癌組織與鼻咽部慢性炎性組織的miRNAs差異表達(dá)譜;通過qRT-PCR技術(shù)驗證鼻咽癌組織及鼻咽癌細(xì)胞中兩個差異miRNAs的表達(dá)水平;生物信息學(xué)分析兩個差異miRNAs所涉及的信號通路。[方法]:收集鼻咽癌組織及鼻咽部慢性炎性組織,提取RNA,檢測總RNA純度,通過miRNA芯片獲得鼻咽癌組織和鼻咽部慢性炎性組織中差異表達(dá)的miRNAs;在鼻咽部慢性炎性組織與鼻咽癌組織,人類永生化鼻咽粘膜上皮細(xì)胞NP69、鼻咽癌細(xì)胞6-10B、5-8F、CNE1、CNE2中,通過qRT-PCR技術(shù)檢測miR-205和miR-34c-3p的表達(dá)水平,并與基因芯片結(jié)果進(jìn)行比較;生物信息學(xué)分析獲得的差異miRNAs所涉及的信號通路。[結(jié)果]:1.通過miRNA基因芯片獲得了鼻咽癌的差異miRNAs表達(dá)譜,芯片結(jié)果顯示了133個差異表達(dá)的miRNAs,其中鼻咽癌組織中下調(diào)的miRNAs有31個,上調(diào)的miRNAs有102個,其中,miR-205的上調(diào)倍數(shù)最大,miR-34c-3p的下調(diào)倍數(shù)最大。2.miR-205、miR-34c-3p在鼻咽癌組織和鼻咽部慢性炎性組織中的表達(dá)的相差倍數(shù)分別是5.458和-3.098倍,qRT-PCR與基因芯片結(jié)果方向一致。3.miR-205在不同分化和轉(zhuǎn)移的鼻咽癌細(xì)胞中,其表達(dá)水平高于NP69細(xì)胞,差異具有顯著性意義(p0.01)。miR-205表達(dá)水平在高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株5-8F中高于低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株6-10B,在低分化細(xì)胞株CNE2中高于高分化細(xì)胞株CNE1(p0.01)。4.miR-34c-3p在不同分化和轉(zhuǎn)移的鼻咽癌細(xì)胞中,其表達(dá)水平低于NP69細(xì)胞,差異均有顯著性意義(p0.01)。miR-34c-3p表達(dá)水平在高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株5-8F和低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株6-10B中表達(dá)水平無顯著性差異(p0.05),在低分化細(xì)胞株CNE2中高于高分化細(xì)胞株CNE1(p0.01)。5.差異miRNAs調(diào)控的靶基因當(dāng)中,所涉及到的信號通路主要包括:MAPK,Focaladhesion,Insulin,Neurotrophin,ErbB,Axonguidance。其中,MAPK信號通路與鼻咽癌發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切。[結(jié)論]:1.獲得鼻咽癌組織和鼻咽部慢性炎性組織中差異表達(dá)的miRNAs表達(dá)譜,其中上調(diào)的有102個,下調(diào)的有31個。2.miR-205和miR-34c-3p的表達(dá)水平在鼻咽癌組織與細(xì)胞中的表達(dá)水平與基因芯片所獲得的結(jié)果方向一致,芯片結(jié)果是可靠的。3.miR-205的上調(diào)與miR-34c-3p的下調(diào)在鼻咽癌的發(fā)生發(fā)展中起了重要作用。4.miR-205表達(dá)與鼻咽癌分化和轉(zhuǎn)移有關(guān),miR-34c-3p表達(dá)與鼻咽癌分化有關(guān),而和轉(zhuǎn)移無關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：鼻咽癌 miRNA 差異表達(dá)譜 miR-205 miR-34c-3p
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R739.63
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 主要縮略英文索引10-14
• 第1章 前言14-18
• 1.1 鼻咽癌發(fā)病與診療現(xiàn)狀14
• 1.2 miRNA與腫瘤關(guān)系14-15
• 1.3 差異miRNAs芯片在腫瘤研究中作用15-16
• 1.4 研究內(nèi)容16-18
• 第2章 材料與方法18-28
• 2.1 材料18-21
• 2.2 實(shí)驗方法21-28
• 第3章 結(jié)果28-46
• 3.1 鼻咽癌組織和鼻咽部慢性炎性組織的總RNA的抽提過程28-29
• 3.2 基因芯片檢測差異表達(dá)miRNAs29-33
• 3.3 qRT-PCR檢測miR-205，miR-34c-3p在組織中的表達(dá)水平33-34
• 3.4 qRT-PCR檢測miR-205，miR-34c-3p在細(xì)胞中的表達(dá)水平34-38
• 3.5 差異表達(dá)miRNAs的生物信息學(xué)分析38-46
• 第4章 討論46-50
• 4.1 miRNA在鼻咽癌中的研究現(xiàn)狀46-47
• 4.2 miR-205與鼻咽癌的關(guān)系47-48
• 4.3 miR-34c-3p的研究進(jìn)展48
• 4.4 差異miRNAs的功能分析48-50
• 第5章 結(jié)論50-52
• 參考文獻(xiàn)52-58
• 文獻(xiàn)綜述58-66
• 參考文獻(xiàn)62-66
• 攻讀學(xué)位期間的科研成果66-68
• 致謝68-70
• 附表70-75

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