順鉑聯(lián)合低分子肝素對人肺腺癌A549細(xì)胞增殖及bcl-2、bax表達(dá)的影響
發(fā)布時(shí)間:2017-07-20 19:22
本文關(guān)鍵詞:順鉑聯(lián)合低分子肝素對人肺腺癌A549細(xì)胞增殖及bcl-2、bax表達(dá)的影響
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【摘要】:目的:作為第一代鉑類化療藥物,順鉑為周期非特異性藥,其主要是與DNA鏈內(nèi)及鏈間交聯(lián),干擾DNA的復(fù)制,最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡,而目前的研究卻發(fā)現(xiàn)順鉑的抗腫瘤毒性與誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡有關(guān)。低分子肝素作為一種重要的抗凝物質(zhì),除了其抗凝作用以外,近年發(fā)現(xiàn)其具有抗腫瘤、抗炎癥、抗病毒等生物學(xué)作用,特別是抗腫瘤作用受到學(xué)者關(guān)注,其抗腫瘤凋亡機(jī)制成為近年來研究熱點(diǎn)。目前大多實(shí)驗(yàn)僅僅只是對順鉑或是低分子肝素兩藥各自凋亡的研究,尚未見其聯(lián)合用藥的相關(guān)研究報(bào)道,因此,本基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)旨在觀察順鉑聯(lián)合低分子肝素預(yù)處理人肺腺癌A549細(xì)胞的作用,并對其可能的增殖抑制、凋亡機(jī)制等進(jìn)行初步探討,從而為臨床上肺癌的化療提供更有效的方案及理論依據(jù),以提高晚期肺癌患者的生命質(zhì)量。方法:采用HyClone改良型RPMI-1640培養(yǎng)基對人肺腺癌A549細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng),然后放置于5%C02、37℃恒溫孵育箱中孵育,取對數(shù)生長期細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。按實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)分為實(shí)驗(yàn)組和對照組,實(shí)驗(yàn)組分為順鉑組(DDP組:濃度為2ug/ml),低分子肝素組(LMWH組:濃度為:10ug/ml),順鉑聯(lián)合低分子肝素組(DDP+LMWH組:濃度為2ug/ml+10ug/ml),對照組不加順鉑和低分子肝素。采用MTT實(shí)驗(yàn)方法,分別在48h,72h兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)檢測各實(shí)驗(yàn)組與對照組吸光度值,計(jì)算增殖抑制率,比較各組兩兩之間的差異;采用流式細(xì)胞儀技術(shù)檢測各實(shí)驗(yàn)組與對照組細(xì)胞凋亡率,比較各組兩兩之間的差異;采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)測量各實(shí)驗(yàn)組與對照組細(xì)胞中bcl-2蛋白和bax蛋白含量,比較各組兩兩之間的差異;結(jié)果:1.增殖抑制率:DDP+LMWH組對A549細(xì)胞增殖抑制作用強(qiáng)于DDP組和LMWH組單獨(dú)的抑制率(P0.05,n=10),分別與對照組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05,n=10),且72h抑制作用比48h更明顯;2.凋亡率:DDP+LMWH組誘導(dǎo)A549細(xì)胞凋亡作用強(qiáng)于DDP組和LMWH組單獨(dú)的凋亡作用(P0.05,n=3),且分別與對照組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05,n=3);3.bcl-2蛋白:DDP+LMWH組作用下調(diào)了A549細(xì)胞中bcl-2蛋白的表達(dá),且強(qiáng)于DDP組和LMWH組單獨(dú)的下調(diào)作用(P0.05,n=10),與對照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05,n=10);4.bax蛋白:DDP+LMWH組作用上調(diào)了A549細(xì)胞中bax蛋白的表達(dá),并且強(qiáng)于DDP組和LMWH組單獨(dú)的上調(diào)作用(P0.05,n=10),與對照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05,n=10);結(jié)論:1.順鉑聯(lián)合低分子肝素能夠有效的抑制體外培養(yǎng)的人肺腺癌A549細(xì)胞增殖,并且其抑制作用優(yōu)于單獨(dú)使用順鉑和低分子肝素;2.順鉑聯(lián)合低分子肝素能夠有效誘導(dǎo)體外培養(yǎng)的人肺腺癌A549細(xì)胞株細(xì)胞凋亡,誘導(dǎo)作用優(yōu)于單獨(dú)使用順鉑和低分子肝素;其機(jī)制或許是通過下調(diào)bcl-2蛋白,上調(diào)bax蛋白的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)的。
【關(guān)鍵詞】:順鉑 低分子肝素 肺癌 增殖 bcl-2 bax
【學(xué)位授予單位】:四川醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R734.2
【目錄】:
- 中文摘要3-5
- 英文摘要5-8
- 前言8-11
- 材料與方法11-21
- 結(jié)果21-30
- 討論30-39
- 結(jié)論39-40
- 參考文獻(xiàn)40-47
- 英漢縮略詞對照表47-48
- 致謝48-49
- 鉑類藥物與肺癌化療的臨床研究進(jìn)展(綜述)49-59
- 參考文獻(xiàn)55-59
【相似文獻(xiàn)】
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7 張峰,姜翠琴
本文編號(hào):569619
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