本文關(guān)鍵詞：硼替佐米與高三尖杉酯堿在K562細(xì)胞中的聯(lián)合作用及機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： 硼替佐米 高三尖杉酯堿 K562 慢性粒細(xì)胞白血病 聯(lián)合效應(yīng)

【摘要】：研究目的:(1)觀察硼替佐米(Bortezomib,BTZ)、高三尖杉酯堿(Homoharringonine,HHT)兩者單藥及聯(lián)合對K562細(xì)胞增殖和凋亡的影響。(2)探討硼替佐米及高三尖杉酯堿對K562細(xì)胞的聯(lián)合作用機(jī)制與Bcl-2、Bax、Mcl-1蛋白表達(dá)量的關(guān)系。研究方法:將K562細(xì)胞株按不同處理分為4組:(1)BTZ(20nmol/L)組(2)HHT(40ng/m L)組(3)BTZ(20nmol/L)+HHT(40ng/m L)聯(lián)合組(4)對照組。1、采用MTT方法檢測各處理組中K562細(xì)胞增殖抑制率的變化。2、采用Annexin V-FITC/PI雙染色法檢測各處理組中K562細(xì)胞早期凋亡率的變化。3、采用Western Blot方法測定各處理組中Bcl-2、Bax及Mcl-1蛋白相對表達(dá)量的變化。實驗結(jié)果:1、在BTZ的0~160nmol/L濃度范圍內(nèi),K562細(xì)胞的增殖抑制率隨BTZ濃度的增加而增加(與對照組比較,p0.05)。在24~72h內(nèi),同濃度BTZ作用于K562細(xì)胞的增殖抑制率隨作用時間的延長而增加(組間比較p0.05)。BTZ作用K562細(xì)胞24h、48h、72h的半數(shù)抑制濃度(IC50)分別為91.36nmol/L、44.25nmol/L、20.34nmol/L。2、在HHT的0~320ng/ml濃度范圍內(nèi),K562細(xì)胞的增殖抑制率隨HHT濃度的增加而增加(與對照組比較,p0.05)。在24~72h內(nèi),同濃度HHT作用于K562細(xì)胞的增殖抑制率隨作用時間的延長而增加(組間比較p0.05)。HHT作用K562細(xì)胞24h、48h、72h的半數(shù)抑制濃度(IC50)分別為148.92ng/ml、61.48ng/ml、35.65ng/ml。3、20nmol/L BTZ作用K562細(xì)胞24h、48h、72h后的增殖抑制率分別為24.29±1.38、38.36±0.97、49.30±1.66(與對照組比較,p0.001);40ng/m L HHT作用K562細(xì)胞24h、48h、72h后的增殖抑制率(%)分別為29.10±1.54、39.78±1.86、50.71±2.26(與對照組比較,p0.001);BTZ+HHT聯(lián)合作用K562細(xì)胞24h、48h、72h后的增殖抑制率(%)分別為48.58±2.18、69.87±1.86、84.48±1.84。BTZ、HHT單藥與聯(lián)合組比較有差異(p0.01)。進(jìn)一步行相互作用分析表明在不同時間點(diǎn)BTZ+HHT聯(lián)合組增殖抑制率均有IR(BTZ+HHT)IR(BTZ)+IR(HHT)-IR(BTZ)*IR(HHT)。4、對照組、BTZ單藥組、HHT單藥組、聯(lián)合組K562細(xì)胞的早期凋亡率(%)分別為2.36±0.56、8.09±0.81、8.93±0.82、21.13±1.90。BTZ及HHT單藥組高于對照組(p0.05),聯(lián)合組均高于BTZ、HHT單藥組(p0.05)。5、對照組、BTZ單藥組、HHT單藥組、聯(lián)合組K562細(xì)胞的Bcl-2蛋白相對表達(dá)量分別為1.00±0.00、0.77±0.28、0.78+0.04、0.18±0.02(與對照組比較,p0.05)。BTZ、HHT單藥組低于對照組(p0.05),聯(lián)合組低于BTZ及HHT單藥組(p0.05)。6、對照組、BTZ單藥組、HHT單藥組、聯(lián)合組K562細(xì)胞的Bax蛋白相對表達(dá)量分別為1.00±0.00、1.77±0.09、2.02±0.09、2.53±0.12。BTZ、HHT單藥組高于對照組(p0.05),聯(lián)合組高于BTZ及HHT單藥組(p0.05)。7、對照組、BTZ單藥組、HHT單藥組、聯(lián)合組K562細(xì)胞的Mcl-1蛋白相對表達(dá)量分別為1.00±0.00、1.25±0.05、0.75±0.03、0.87±0.02。不同處理組Mcl-1蛋白相對表達(dá)量高低:BTZ組對照組BTZ+HHT聯(lián)合組HHT組(組間比較p0.05)。結(jié)論:1、BTZ、HHT對K562細(xì)胞株均有抑制增殖作用,且均呈劑量、時間依賴性。BTZ與HHT聯(lián)合可起協(xié)同抑制細(xì)胞增殖效應(yīng)。2、BTZ、HHT對K562細(xì)胞株均有誘導(dǎo)凋亡作用,BTZ與HHT聯(lián)合誘導(dǎo)凋亡效應(yīng)更明顯。3、BTZ、HHT可下調(diào)K562細(xì)胞Bcl-2蛋白表達(dá),兩藥聯(lián)合時Bcl-2蛋白下調(diào)更明顯。4、BTZ、HHT可上調(diào)K562細(xì)胞Bax蛋白表達(dá),兩藥聯(lián)合時Bax蛋白上調(diào)更明顯。5、HHT可通過下調(diào)Mcl-1蛋白表達(dá)增加K562細(xì)胞對BTZ作用的敏感性。
【關(guān)鍵詞】：硼替佐米 高三尖杉酯堿 K562 慢性粒細(xì)胞白血病 聯(lián)合效應(yīng)
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R733.7
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 中英文縮略詞表9-11
• 第1章 引言11-13
• 第2章 材料與方法13-22
• 2.1 材料13-15
• 2.1.1 細(xì)胞系13
• 2.1.2 實驗藥物及配制方法13
• 2.1.3 主要試劑13-14
• 2.1.4 主要抗體14
• 2.1.5 實驗主要儀器14-15
• 2.1.6 實驗主要耗材15
• 2.2 實驗方法15-21
• 2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)15
• 2.2.2 BTZ、HHT單藥對K562細(xì)胞增殖的影響15-16
• 2.2.3 聯(lián)合藥物實驗16-21
• 2.3 統(tǒng)計學(xué)分析21-22
• 第3章 結(jié)果22-30
• 3.1 BTZ、HHT單藥對K562細(xì)胞增殖的影響22-24
• 3.1.1 BTZ對K562細(xì)胞增殖的影響22-23
• 3.1.2 HHT對K562細(xì)胞增殖的影響23-24
• 3.2 聯(lián)合藥物實驗24-30
• 3.2.1 BTZ、HHT聯(lián)合對K562細(xì)胞增殖的影響24-25
• 3.2.2 BTZ、HHT聯(lián)合對K562細(xì)胞早期凋亡率的影響25-27
• 3.2.3 BTZ、HHT聯(lián)合對K562細(xì)胞的Bcl-2、Bax、Mcl-1 蛋白表達(dá)水平的影響27-30
• 第4章 討論30-37
• 4.1 BTZ、HHT單藥對K562細(xì)胞增殖的影響30-31
• 4.1.1 BTZ對K562細(xì)胞增殖的影響30-31
• 4.1.2 HHT對K562細(xì)胞增殖的影響31
• 4.2 BTZ、HHT聯(lián)合對K562細(xì)胞增殖的影響31-32
• 4.3 BTZ、HHT聯(lián)合對K562細(xì)胞凋亡的影響32
• 4.4 BTZ聯(lián)合HHT對K562細(xì)胞的凋亡效應(yīng)機(jī)制與Bcl-2 家族蛋白的關(guān)系2232-37
• 4.4.1 BTZ聯(lián)合HHT誘導(dǎo)K562細(xì)胞凋亡的機(jī)制與Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)水平的關(guān)系34-35
• 4.4.2 HHT通過抑制Mcl-1 蛋白表達(dá)提高K562細(xì)胞對BTZ的敏感性35-37
• 第5章 結(jié)論與展望37-38
• 5.1 結(jié)論37
• 5.2 展望37-38
• 致謝38-39
• 參考文獻(xiàn)39-43
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果43-44
• 綜述44-51
• 參考文獻(xiàn)49-51

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1 趙小萍;孫彩虹;;硼替佐米在惡性腫瘤治療中的應(yīng)用進(jìn)展[J];實用腫瘤學(xué)雜志;2007年05期

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7 袁振剛;侯健;周帆;王東星;付衛(wèi)軍;陳玉寶;奚昊;楊盛玲;;硼替佐米聯(lián)合地塞米松治療16例復(fù)發(fā)、難治性多發(fā)性骨髓瘤患者[J];中華血液學(xué)雜志;2006年10期

8 高沖;陳寶安;孫耘玉;程堅;費(fèi)菲;;硼替佐米為主方案治療復(fù)發(fā)難治性多發(fā)性骨髓瘤[J];白血病.淋巴瘤;2007年04期

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10 謝亞萍;錢R季，

本文編號：554880