本文關(guān)鍵詞：氯化鈷誘導(dǎo)低氧環(huán)境對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞株的生長(zhǎng)代謝影響

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【摘要】：1、 目的建立人肝癌HepG2細(xì)胞在氯化鈷誘導(dǎo)的低氧環(huán)境下的生長(zhǎng)模型,觀察不同濃度氯化鈷誘導(dǎo)的低氧環(huán)境對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞的增殖、細(xì)胞的周期與凋亡即細(xì)胞的生長(zhǎng)狀況影響,進(jìn)而探討氯化鈷誘導(dǎo)的低氧對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞的生長(zhǎng)代謝的作用機(jī)制,并進(jìn)一步探討腫瘤細(xì)胞對(duì)低氧環(huán)境耐受性變化,為臨床上對(duì)腫瘤化療治療的療效尋找理論依據(jù)。2、 方法對(duì)數(shù)期人肝癌細(xì)胞株HepG2細(xì)胞,隨機(jī)分組對(duì)照組,不同濃度(50μm/L、100μm/L、 150μm/L、200μm/L) Cocl2實(shí)驗(yàn)組,通過(guò)MTT法檢測(cè)HepG2細(xì)胞增殖情況計(jì)算細(xì)胞的抑制率并繪制HepG2細(xì)胞生長(zhǎng)抑制曲線；劃痕實(shí)驗(yàn)觀察HepG 2細(xì)胞的遷移能力；通過(guò)流式細(xì)胞儀的Annexin-V FITC/PI雙染法和PI單染法檢測(cè)細(xì)胞的凋亡和周期變化；通過(guò)Western Blot法檢測(cè)HepG2細(xì)胞的3-磷酸甘油醛脫氫酶(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)、Bcl-2蛋白的表達(dá)。3、 結(jié)果1.通過(guò)MTT法檢測(cè)結(jié)果示在一定的時(shí)間和濃度范圍內(nèi)Cocl2抑制人肝癌HepG2細(xì)胞的增殖,并呈時(shí)間-劑量依賴性關(guān)系,即細(xì)胞的增值率隨著Cocl2濃度的增加和作用時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸減低。2. HepG2細(xì)胞經(jīng)過(guò)劃痕損傷試驗(yàn)后,實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞的遷移能力顯著變慢,對(duì)照組在經(jīng)過(guò)劃痕實(shí)驗(yàn)24h后,細(xì)胞已基本遷移至劃痕的中央,而實(shí)驗(yàn)組隨著氯化鉆濃度的增加,細(xì)胞劃痕損傷面積未見(jiàn)明顯減少,劃痕明顯,說(shuō)明氯化鈷抑制HepG2細(xì)胞的遷移及損傷修復(fù)能力,呈濃度依賴性關(guān)系。3.流式細(xì)胞儀的檢測(cè)結(jié)果顯示：對(duì)照組、不同濃度(50μm/L、100μm/L、200μm/L、 300μm/L、500μm/L)的實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞凋亡率(%)分別是：3.42、7.74、13.07、20.56、28.53、44.45(P0.05),與對(duì)照組相比較試驗(yàn)組的凋亡率明顯增加,并呈濃度依賴性。細(xì)胞的周期結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組的HepG2細(xì)胞隨著氯化鈷濃度的增加,處于細(xì)胞周期G。期的比例(%)由30.51增加到68.10,都高于對(duì)照組比例(%)的28.38；而S期比例則從42.51降低到17.58,都低于42.91的對(duì)照組比例(%),說(shuō)明氯化鈷能明顯抑制HepG2細(xì)胞周期的變化,阻滯細(xì)胞周期于G1期,從而抑制細(xì)胞的增殖。4. Western Blot法檢測(cè)：與對(duì)照組相比,經(jīng)過(guò)不同濃度氯化鉆處理后的實(shí)驗(yàn)組Bcl-2蛋白的表達(dá)明顯減少。4、 結(jié)論在一定范圍內(nèi),Cocl2誘導(dǎo)的低氧環(huán)境可以抑制人肝癌HepG2細(xì)胞的增殖以及愈合遷移的作用,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡并呈時(shí)間-劑量的依賴性關(guān)系,其作用機(jī)制可能與Bcl-2蛋白的表達(dá)減少有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：氯化鈷 肝癌 低氧 人肝癌HepG2細(xì)胞株 生長(zhǎng)代謝
【學(xué)位授予單位】：揚(yáng)州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R735.7
【目錄】：

• 中文摘要2-4
• 英文摘要4-7
• 縮略詞表7-8
• 前言8-10
• 第一部分 氯化鈷誘導(dǎo)的低氧環(huán)境對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞增殖、遷移愈合能力的影響10-16
• 1 材料及方法10-11
• 2 結(jié)果11-15
• 3 小結(jié)15-16
• 第二部分 氯化鈷誘導(dǎo)的低氧環(huán)境對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞周期、凋亡和Bcl-2蛋白表達(dá)的影響16-24
• 1 材料及方法16-18
• 2 結(jié)果18-22
• 3 討論22-23
• 4 小結(jié)23-24
• 參考文獻(xiàn)24-26
• 綜述26-30
• 參考文獻(xiàn)29-30
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文目錄30-31
• 致謝31-32

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本文編號(hào)：554872