本文關鍵詞：氯化鈷誘導低氧環(huán)境對人肝癌HepG2細胞株的生長代謝影響

  更多相關文章： 氯化鈷 肝癌 低氧 人肝癌HepG2細胞株 生長代謝

【摘要】：1、 目的建立人肝癌HepG2細胞在氯化鈷誘導的低氧環(huán)境下的生長模型,觀察不同濃度氯化鈷誘導的低氧環(huán)境對人肝癌HepG2細胞的增殖、細胞的周期與凋亡即細胞的生長狀況影響,進而探討氯化鈷誘導的低氧對人肝癌HepG2細胞的生長代謝的作用機制,并進一步探討腫瘤細胞對低氧環(huán)境耐受性變化,為臨床上對腫瘤化療治療的療效尋找理論依據(jù)。2、 方法對數(shù)期人肝癌細胞株HepG2細胞,隨機分組對照組,不同濃度(50μm/L、100μm/L、 150μm/L、200μm/L) Cocl2實驗組,通過MTT法檢測HepG2細胞增殖情況計算細胞的抑制率并繪制HepG2細胞生長抑制曲線；劃痕實驗觀察HepG 2細胞的遷移能力；通過流式細胞儀的Annexin-V FITC/PI雙染法和PI單染法檢測細胞的凋亡和周期變化；通過Western Blot法檢測HepG2細胞的3-磷酸甘油醛脫氫酶(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)、Bcl-2蛋白的表達。3、 結(jié)果1.通過MTT法檢測結(jié)果示在一定的時間和濃度范圍內(nèi)Cocl2抑制人肝癌HepG2細胞的增殖,并呈時間-劑量依賴性關系,即細胞的增值率隨著Cocl2濃度的增加和作用時間的延長逐漸減低。2. HepG2細胞經(jīng)過劃痕損傷試驗后,實驗組的細胞的遷移能力顯著變慢,對照組在經(jīng)過劃痕實驗24h后,細胞已基本遷移至劃痕的中央,而實驗組隨著氯化鉆濃度的增加,細胞劃痕損傷面積未見明顯減少,劃痕明顯,說明氯化鈷抑制HepG2細胞的遷移及損傷修復能力,呈濃度依賴性關系。3.流式細胞儀的檢測結(jié)果顯示：對照組、不同濃度(50μm/L、100μm/L、200μm/L、 300μm/L、500μm/L)的實驗組的細胞凋亡率(%)分別是：3.42、7.74、13.07、20.56、28.53、44.45(P0.05),與對照組相比較試驗組的凋亡率明顯增加,并呈濃度依賴性。細胞的周期結(jié)果顯示實驗組的HepG2細胞隨著氯化鈷濃度的增加,處于細胞周期G。期的比例(%)由30.51增加到68.10,都高于對照組比例(%)的28.38；而S期比例則從42.51降低到17.58,都低于42.91的對照組比例(%),說明氯化鈷能明顯抑制HepG2細胞周期的變化,阻滯細胞周期于G1期,從而抑制細胞的增殖。4. Western Blot法檢測：與對照組相比,經(jīng)過不同濃度氯化鉆處理后的實驗組Bcl-2蛋白的表達明顯減少。4、 結(jié)論在一定范圍內(nèi),Cocl2誘導的低氧環(huán)境可以抑制人肝癌HepG2細胞的增殖以及愈合遷移的作用,誘導細胞凋亡并呈時間-劑量的依賴性關系,其作用機制可能與Bcl-2蛋白的表達減少有關。
【關鍵詞】：氯化鈷 肝癌 低氧 人肝癌HepG2細胞株 生長代謝
【學位授予單位】：揚州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R735.7
【目錄】：

• 中文摘要2-4
• 英文摘要4-7
• 縮略詞表7-8
• 前言8-10
• 第一部分 氯化鈷誘導的低氧環(huán)境對人肝癌HepG2細胞增殖、遷移愈合能力的影響10-16
• 1 材料及方法10-11
• 2 結(jié)果11-15
• 3 小結(jié)15-16
• 第二部分 氯化鈷誘導的低氧環(huán)境對人肝癌HepG2細胞周期、凋亡和Bcl-2蛋白表達的影響16-24
• 1 材料及方法16-18
• 2 結(jié)果18-22
• 3 討論22-23
• 4 小結(jié)23-24
• 參考文獻24-26
• 綜述26-30
• 參考文獻29-30
• 攻讀學位期間發(fā)表的論文目錄30-31
• 致謝31-32

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