本文關(guān)鍵詞：miR-21在人喉鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及對(duì)喉鱗癌細(xì)胞增殖和凋亡機(jī)制的研究

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【摘要】：背景喉癌在頭頸部腫瘤中的發(fā)病率為13.9%,僅次于鼻咽癌以及鼻腔癌,居于第三位,且近年來(lái)其發(fā)病率呈逐年增高趨勢(shì)。大量學(xué)者研究發(fā)現(xiàn),喉癌的發(fā)生是一個(gè)多種癌基因和抑癌基因參與,多個(gè)階段級(jí)聯(lián)反應(yīng)的過(guò)程,其發(fā)生和發(fā)展可能是由于癌基因激活、抑癌基因缺失或者突變體產(chǎn)生而使腫瘤細(xì)胞過(guò)度增殖所致：此外還可能是由于細(xì)胞凋亡受到抑制從而促使惡性腫瘤細(xì)胞存活的結(jié)果,當(dāng)細(xì)胞增殖和／或凋亡的調(diào)節(jié)因素發(fā)生變化時(shí),將會(huì)造成惡性腫瘤的發(fā)生。目的本研究通過(guò)分析miR-21 mRNA以及Bcl-2 mRNA在人喉鱗狀細(xì)胞癌組織中的表達(dá),同時(shí)對(duì)喉鱗癌患者癌組織中Bcl-2蛋白的表達(dá)與患者臨床病理參數(shù)的相關(guān)性進(jìn)行分析,探討miR-21表達(dá)變化對(duì)Bcl-2的影響以及對(duì)喉鱗癌Hep-2細(xì)胞增殖、凋亡和侵襲的作用,旨在為了解喉鱗癌的發(fā)生和發(fā)展機(jī)制并為喉鱗癌的臨床診斷及靶向治療提供可靠依據(jù)。方法(1)采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR的方法檢測(cè)喉鱗癌患者癌組織及其相應(yīng)癌旁正常組織中miR-21和Bcl-2 mRNA的表達(dá)情況；采用western blot法檢測(cè)喉鱗癌患者癌組織及其相應(yīng)癌旁正常組織中Bcl-2蛋白的表達(dá)情況；分析喉鱗癌患者癌組織中Bcl-2蛋白的表達(dá)與患者臨床病理參數(shù)的相關(guān)性。(2)將miR-21 inhibitor轉(zhuǎn)染人喉鱗癌Hep-2細(xì)胞；檢測(cè)轉(zhuǎn)染后細(xì)胞中Bcl-2蛋白的表達(dá)情況；MTT法檢分別檢測(cè)轉(zhuǎn)染后48 h細(xì)胞的增殖情況；Annexin V-fitc/pi雙染色及流式細(xì)胞儀分別檢測(cè)轉(zhuǎn)染后0h、24 h、48 h、72 h、96 h時(shí)細(xì)胞的凋亡情況；Transwe Ⅱ小室法檢測(cè)轉(zhuǎn)染細(xì)胞侵襲能力的影響。結(jié)果(1)miR-21和Bcl-2 mRNA在喉鱗癌組織中的表達(dá)顯著高于其在癌旁相應(yīng)正常組織中的表達(dá)；Bcl-2蛋白在喉鱗癌組織中的表達(dá)顯著高于其在相應(yīng)癌旁正常組織中的表達(dá)；Bcl-2蛋白表達(dá)與喉鱗癌患者臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及腫瘤分化程度密切相關(guān)；(2)轉(zhuǎn)染miR-21 inhibitor后Bcl-2蛋白的表達(dá)明顯減少：Hep-2細(xì)胞的增殖和侵襲能力降低,細(xì)胞凋亡明顯上升。結(jié)論miR-21可能經(jīng)由上調(diào)Bcl-2的表達(dá)來(lái)發(fā)揮促進(jìn)喉鱗癌細(xì)胞增殖和侵襲,抑制細(xì)胞凋亡的作用,提示其可能為一種癌基因參與了喉鱗癌的發(fā)生和發(fā)展過(guò)程,可將其作為腫瘤標(biāo)志物應(yīng)用于喉鱗癌臨床檢測(cè)、預(yù)后判斷以及靶向治療中。
【關(guān)鍵詞】：喉鱗狀細(xì)胞癌 miR-21 Bcl-2
【學(xué)位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R739.65
【目錄】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-9
• 第一章 喉鱗狀細(xì)胞癌組織中MIR-21和BCL-2的表達(dá)及臨床意義9-30
• 前言9-10
• 1. 材料與方法10-22
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料10-15
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法15-22
• 2 結(jié)果22-24
• 3 討論24-29
• 4 小結(jié)29-30
• 第二章 MIR-21對(duì)人喉鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞增殖、侵襲和凋亡的影響30-43
• 前言30-31
• 1. 材料與方法31-36
• 2 結(jié)果36-40
• 3 討論40-42
• 4 小結(jié)42-43
• 參考文獻(xiàn)43-49
• 綜述49-62
• 綜述參考文獻(xiàn)56-62
• 附錄62-64
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況64-65
• 致謝65-66
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷66

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