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miR-21在人喉鱗狀細胞癌中的表達及對喉鱗癌細胞增殖和凋亡機制的研究

發(fā)布時間:2017-07-17 21:43

  本文關鍵詞:miR-21在人喉鱗狀細胞癌中的表達及對喉鱗癌細胞增殖和凋亡機制的研究


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【摘要】:背景喉癌在頭頸部腫瘤中的發(fā)病率為13.9%,僅次于鼻咽癌以及鼻腔癌,居于第三位,且近年來其發(fā)病率呈逐年增高趨勢。大量學者研究發(fā)現(xiàn),喉癌的發(fā)生是一個多種癌基因和抑癌基因參與,多個階段級聯(lián)反應的過程,其發(fā)生和發(fā)展可能是由于癌基因激活、抑癌基因缺失或者突變體產(chǎn)生而使腫瘤細胞過度增殖所致:此外還可能是由于細胞凋亡受到抑制從而促使惡性腫瘤細胞存活的結果,當細胞增殖和/或凋亡的調節(jié)因素發(fā)生變化時,將會造成惡性腫瘤的發(fā)生。目的本研究通過分析miR-21 mRNA以及Bcl-2 mRNA在人喉鱗狀細胞癌組織中的表達,同時對喉鱗癌患者癌組織中Bcl-2蛋白的表達與患者臨床病理參數(shù)的相關性進行分析,探討miR-21表達變化對Bcl-2的影響以及對喉鱗癌Hep-2細胞增殖、凋亡和侵襲的作用,旨在為了解喉鱗癌的發(fā)生和發(fā)展機制并為喉鱗癌的臨床診斷及靶向治療提供可靠依據(jù)。方法(1)采用實時熒光定量PCR的方法檢測喉鱗癌患者癌組織及其相應癌旁正常組織中miR-21和Bcl-2 mRNA的表達情況;采用western blot法檢測喉鱗癌患者癌組織及其相應癌旁正常組織中Bcl-2蛋白的表達情況;分析喉鱗癌患者癌組織中Bcl-2蛋白的表達與患者臨床病理參數(shù)的相關性。(2)將miR-21 inhibitor轉染人喉鱗癌Hep-2細胞;檢測轉染后細胞中Bcl-2蛋白的表達情況;MTT法檢分別檢測轉染后48 h細胞的增殖情況;Annexin V-fitc/pi雙染色及流式細胞儀分別檢測轉染后0h、24 h、48 h、72 h、96 h時細胞的凋亡情況;Transwe Ⅱ小室法檢測轉染細胞侵襲能力的影響。結果(1)miR-21和Bcl-2 mRNA在喉鱗癌組織中的表達顯著高于其在癌旁相應正常組織中的表達;Bcl-2蛋白在喉鱗癌組織中的表達顯著高于其在相應癌旁正常組織中的表達;Bcl-2蛋白表達與喉鱗癌患者臨床分期、淋巴結轉移以及腫瘤分化程度密切相關;(2)轉染miR-21 inhibitor后Bcl-2蛋白的表達明顯減少:Hep-2細胞的增殖和侵襲能力降低,細胞凋亡明顯上升。結論miR-21可能經(jīng)由上調Bcl-2的表達來發(fā)揮促進喉鱗癌細胞增殖和侵襲,抑制細胞凋亡的作用,提示其可能為一種癌基因參與了喉鱗癌的發(fā)生和發(fā)展過程,可將其作為腫瘤標志物應用于喉鱗癌臨床檢測、預后判斷以及靶向治療中。
【關鍵詞】:喉鱗狀細胞癌 miR-21 Bcl-2
【學位授予單位】:新鄉(xiāng)醫(yī)學院
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R739.65
【目錄】:
  • 摘要5-7
  • ABSTRACT7-9
  • 第一章 喉鱗狀細胞癌組織中MIR-21和BCL-2的表達及臨床意義9-30
  • 前言9-10
  • 1. 材料與方法10-22
  • 1.1 實驗材料10-15
  • 1.2 實驗方法15-22
  • 2 結果22-24
  • 3 討論24-29
  • 4 小結29-30
  • 第二章 MIR-21對人喉鱗狀細胞癌細胞增殖、侵襲和凋亡的影響30-43
  • 前言30-31
  • 1. 材料與方法31-36
  • 2 結果36-40
  • 3 討論40-42
  • 4 小結42-43
  • 參考文獻43-49
  • 綜述49-62
  • 綜述參考文獻56-62
  • 附錄62-64
  • 攻讀學位期間發(fā)表文章情況64-65
  • 致謝65-66
  • 個人簡歷66

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