本文關(guān)鍵詞：RhoGDI2基因及人臍靜脈內(nèi)皮細胞對T24膀胱癌細胞侵襲、遷移及增殖能力的影響

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【摘要】：目的：膀胱癌是我國泌尿系腫瘤當中最常見的惡性腫瘤,易浸潤、轉(zhuǎn)移是膀胱癌最主要的特征。RhoGTP酶GDP解離抑制因子2 (rho GDP dissociation inhibitor 2, RhoGDI2)是近年來發(fā)現(xiàn)的抑制腫瘤遷移的基因之一,其在高遷移潛能的膀胱癌細胞中的表達量顯著低于低遷移潛能細胞。內(nèi)皮細胞一般對腫瘤均是促進作用,如果將RhoGDI2基因和人臍靜脈內(nèi)皮細胞放在一起,到底是促進大于抑制呢,還是抑制大于促進呢?本實驗便是觀察在人臍靜脈內(nèi)皮細胞共培養(yǎng)的Transwell模型下,RhoGDI2基因?qū)θ税螂装㏕24細胞的侵襲、遷移及增殖的影響。方法：設(shè)計并合成含有RhoGDI2基因過表達的GFP慢病毒載體,利用western blotting技術(shù)檢測RhoGDI2基因在LV-RhoGDI2-GFP/T24、 LV-CONTROL-GFP/T24、T24三組蛋白水平表達之間的差異。利用Transwell模型和Matrigel基質(zhì)膠檢測三組細胞的侵襲能力的差異,利用Transwell模型檢測三組細胞的遷移能力的差異,利用Transwell模型和CCK-8試劑檢測三組細胞的增殖能力的差異。結(jié)果：本研究成功構(gòu)建了RhoGDI2基因的慢病毒載體,western blotting技術(shù)檢測到LV-RhoGDI2-GFP/T24的RhoGDI2的蛋白表達量明顯高于LV-CONTROL-GFP/T24和T24組(P0.05)；在Transwell侵襲實驗當中,無論是非共培養(yǎng)組還是共培養(yǎng)組,LV-RhoGDI2-GFP/T24組的侵襲的細胞數(shù)目明顯少于LV-CONTROL-GFP/T24組及T24組(P0.05)。而各自細胞系自身的非共培養(yǎng)組和共培養(yǎng)組的比較當中,LV-RhoGDI2-GFP/T24非共培養(yǎng)組侵襲的細胞數(shù)和LV-RhoGDI2-GFP/T24共培養(yǎng)組侵襲的細胞數(shù)目無差異(P0.05),但是LV-CONTROL-GFP/T24非共培養(yǎng)組和T24非共培養(yǎng)組的侵襲的細胞數(shù)明顯少于LV-CONTROL-GFP/T24共培養(yǎng)組和T24共培養(yǎng)組(P0.05)。在Transwell遷移實驗當中,無論是非共培養(yǎng)組還是共培養(yǎng)組,LV-RhoGDI2-GFP/T24組的侵襲的細胞數(shù)目明顯少于LV-CONTROL-GFP/T24組及T24組(P0.05)。而各自細胞系自身的非共培養(yǎng)組和共培養(yǎng)組的比較當中,LV-RhoGDI2-GFP/T24非共培養(yǎng)組侵襲的細胞數(shù)和LV-RhoGDI2-GFP/T24共培養(yǎng)組侵襲的細胞數(shù)目無差異(P0.05),但是LV-CONTROL-GFP/T24非共培養(yǎng)組和T24非共培養(yǎng)組的侵襲的細胞數(shù)明顯少于LV-CONTROL-GFP/T24共培養(yǎng)組和T24共培養(yǎng)組(P0.05)。在增殖能力實驗當中,無論是非共培養(yǎng)組還是共培養(yǎng)組,在第二天開始,LV-RhoGDI2-GFP/T24組的OD值明顯小于LV-CONTROL-GFP/T24組及T24組(P0.05)。而各自細胞系自身的非共培養(yǎng)組和共培養(yǎng)組的比較當中,在第三天開始,LV-RhoGDI2-GFP/T24非共培養(yǎng)組OD值和LV-RhoGDI2-GFP/T24共培養(yǎng)組的OD值無差異(P0.05),但是LV-CONTROL-GFP/T24非共培養(yǎng)組和T24非共培養(yǎng)組的OD值明顯小于LV-CONTROL-GFP/T24共培養(yǎng)組和T24共培養(yǎng)組(P0.05)。結(jié)論：RhoGDI2基因?qū)24膀胱癌的侵襲、遷移及增殖能力均有抑制作用；人臍靜脈內(nèi)皮細胞對T24膀胱癌細胞的侵襲、遷移及增殖能力均有促進作用；RhoGDI2基因可以“阻斷”人臍靜脈內(nèi)皮細胞對T24膀胱癌的侵襲、遷移及增殖能力的促進作用。
【關(guān)鍵詞】：RhoGDI2 膀胱癌 Transwell 人臍靜脈內(nèi)皮細胞 共培養(yǎng) 侵襲 遷移 增殖
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R737.14
【目錄】：

• 個人簡歷3-6
• 主要英文縮寫6-8
• 摘要8-10
• ABSTRACT10-14
• 前言14-21
• 參考文獻18-21
• 慢病毒介導(dǎo)的RhoGDI2基因過表達人膀胱癌T24細胞的構(gòu)建與驗證21-35
• 1.1 材料與方法21-24
• 1.2 慢病毒的構(gòu)建、包裝及轉(zhuǎn)染24-28
• 1.3 Western blotting檢測慢病毒轉(zhuǎn)染后T24膀胱癌細胞中的RhoGDI2的表達28-32
• 1.4 實驗結(jié)果32-35
• 共培養(yǎng)模型下的RhoGDI2基因?qū)θ税螂装㏕24細胞侵襲、遷移及增殖能力的影響35-56
• 1.1 材料與方法35-36
• 1.2 RhoGDI2基因?qū)24膀胱癌細胞侵襲能力的影響36-39
• 1.3 RhoGDI2基因?qū)24膀胱癌細胞遷移能力的影響39-41
• 1.4 RhoGDI2基因?qū)24膀胱癌細胞增殖能力的影響41-44
• 1.5 RhoGDI2基因?qū)24膀胱癌細胞侵襲、遷移、增殖能力的影響實驗結(jié)果44-56
• 討論56-65
• 參考文獻65-71
• 綜述71-86
• 參考文獻81-86
• 致謝86-87

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