本文關(guān)鍵詞：去乙酰化酶SirT3與烯醇化酶ENO1關(guān)系及功能研究

  更多相關(guān)文章： ENO1 相互作用 SirT3 去乙�；� 蛋白質(zhì)分泌

【摘要】：ENO1是烯醇化酶,在糖酵解的過程中起重要作用,負責催化2-磷酸甘油酸形成高能化合物磷酸烯醇式丙酮酸。早期研究表明ENO1是腫瘤抑制因子,近幾年,研究表明ENO1可能參與癌癥的發(fā)生發(fā)展和轉(zhuǎn)移等多個環(huán)節(jié),ENO1基因是重要的原癌基因。ENO1在癌癥患者外周血和腫瘤細胞系中表達水平很高,具有潛在腫瘤診斷價值。SirT3為去乙�；�,主要分為FLSirT3和ShortSirT3。近幾年SirT3因其對各種非組蛋白去乙酰化作用受到越來越多關(guān)注。目前,已發(fā)現(xiàn)位于線粒體中的Short SirT3,對很多新陳代謝相關(guān)酶進行去乙�；揎�,但細胞質(zhì)中FLSirT3的底物和功能已知較少。本文首次發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)中FL SirT3與ENO1相互結(jié)合,通過免疫共沉淀和體外結(jié)合實驗,證實FL SirT3與ENO1無論在體內(nèi)還是體外都直接結(jié)合。然后本文發(fā)現(xiàn)FL SirT3主要結(jié)合在ENO1 376-434氨基酸區(qū)域內(nèi),并對ENO1進行去乙�；揎�。最后本文發(fā)現(xiàn)FLSirT3可能通過對ENO1去乙�；揎�,調(diào)控ENO1的分泌,對ENO1的分泌有促進作用。已發(fā)現(xiàn)ENO1在很多腫瘤患者血液中高表達,提示ENO1可作為腫瘤標記物,具有潛在醫(yī)學診斷價值。本文的發(fā)現(xiàn)為ENO1作為腫瘤標記物的研究提供了一些理論依據(jù),也為FL SirT3的功能研究提供了新思路。
【關(guān)鍵詞】：ENO1 相互作用 SirT3 去乙�；� 蛋白質(zhì)分泌
【學位授予單位】：華東師范大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R730.4
【目錄】：

• 摘要6-7
• ABSTRACT7-10
• 第一章 緒論10-22
• 第一節(jié) ENO1的概述10-16
• 1.1 ENO1簡介10
• 1.2 ENO1基因結(jié)構(gòu)和功能10-11
• 1.3 ENO1蛋白結(jié)構(gòu)和功能11-16
• 1.4 ENO1蛋白翻譯后修飾16
• 第二節(jié) SirT3概述16-22
• 2.1 SirT3簡介16-17
• 2.2 SirT3蛋白結(jié)構(gòu)和分布17-19
• 2.3 SirT3蛋白剪切體形式19
• 2.4 SirT3蛋白生物學功能19-22
• 第二章 實驗材料和方法22-32
• 第一節(jié) 實驗材料22-24
• 1.1 細胞株和菌株22
• 1.2 質(zhì)粒載體和引物22-23
• 1.3 耗材和儀器23
• 1.4 實驗試劑和藥品23-24
• 1.5 抗體24
• 第二節(jié) 實驗原理與方法24-32
• 2.1 質(zhì)粒構(gòu)建技術(shù)24
• 2.2 細胞培養(yǎng)技術(shù)24-25
• 2.3 細胞轉(zhuǎn)染技術(shù)25-26
• 2.4 慢病毒包裝與感染技術(shù)26-27
• 2.5 細胞免疫熒光技術(shù)27
• 2.6 蛋白質(zhì)免疫印跡技術(shù)27-28
• 2.7 免疫共沉淀技術(shù)28
• 2.8 GST融合誘導蛋白表達實驗28-29
• 2.9 蛋白質(zhì)體外結(jié)合實驗29-30
• 2.10 分泌蛋白實驗30
• 2.11 細胞遷移實驗30-32
• 第三章 結(jié)果與分析32-49
• 第一節(jié) SirT3與ENO1相互作用的研究32-38
• 1.1 體外純化SirT3蛋白32-33
• 1.2 質(zhì)譜分析SirT3結(jié)合蛋白33-34
• 1.3 初步發(fā)現(xiàn)ENO1與SirT3的結(jié)合34-35
• 1.4 ENO1與SirT3共定位35-36
• 1.5 ENO1與SirT3細胞內(nèi)結(jié)合36-37
• 1.6 ENO1與SirT3細胞外結(jié)合37-38
• 第二節(jié) SirT3與ENO1結(jié)合區(qū)域的研究38-40
• 第三節(jié) SirT3對ENO1去乙�；揎�40-43
• 第四節(jié) SirT3調(diào)控ENO1的分泌43-49
• 4.1 ENO1的分泌條件43-44
• 4.2 分泌條件下ENO1與SirT3相互作用的變化44-45
• 4.3 SirT3表達高低對ENO1分泌的影響45-47
• 4.4 SirT3對ENO1片段分泌的影響47-49
• 第四章 總結(jié)與討論49-52
• 第一節(jié) 總結(jié)49-50
• 第二節(jié) 討論50-52
• 參考文獻52-58
• 附錄Ⅰ 英文縮寫58-59
• 附錄Ⅱ 碩士期間參與發(fā)表論文情況59-60
• 致謝60

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李玲;鮑忠祈;王林秀;鐘國隆;耿士奎;;烯醇化酶抗原及抗體的制備[J];軍事醫(yī)學科學院院刊;1991年01期

2 殷仁富,張國元,陳思聰,過家珞,仇韶華,史文君,許紹輝,孔憲濤;人肌肉β-烯醇化酶的分離純化及抗體制備[J];第二軍醫(yī)大學學報;1992年03期

3 金道山;韓志濤;盧皎;王士雯;賈萬鈞;;人肌肉特異性烯醇化酶純化及性質(zhì)的研究[J];軍醫(yī)進修學院學報;1992年02期

4 祝培;;腎小管及腎細胞癌中的烯醇化酶同功酶[J];國外醫(yī)學(腫瘤學分冊);1987年04期

5 高s，

本文編號：545895