本文關(guān)鍵詞：靶向性的聚乙烯亞胺熒光碳點的載基因性能研究

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【摘要】：研究目的:以傳統(tǒng)的基因載體聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,PEI)為基本原料,葉酸(Folic acid,FA)為靶向基團(tuán),制備兩種不同的碳納米材料,并比較它們的理化性能、熒光性能、對腫瘤細(xì)胞的靶向性以及作為納米基因載體的應(yīng)用效果。研究方法:1.以PEI和FA為原料,水熱法制備碳量子點(Folic acid-Polyethylenimine Carbon Dots,FA/PEI CDs),采用透射電子顯微鏡、紫外-可見吸收光譜分析、付利葉轉(zhuǎn)變紅外光譜法、熒光光譜儀對其進(jìn)行理化性質(zhì)的表征;通過硫酸奎寧法對其進(jìn)行熒光量子產(chǎn)率的測定;熒光倒置顯微鏡下觀察FA/PEI CDs的靶向性;通過Real-Time PCR技術(shù)檢測FA/PEI CDs所載mi RNA的表達(dá)水平;MTT法測定其生物相容性。通過增大FA/PEI CDs粒徑大小以及封閉葉酸受體探究影響細(xì)胞攝取的因素。2.以PEI為原料,水熱法制備聚合物點(Polyethylenimine Dots,PDs),將其與葉酸共混,二者通過靜電力結(jié)合得到PEI PDs-FA。采用上述方法對PEI PDsFA進(jìn)行表征。研究結(jié)果:1.FA/PEI CDs的性能表征:透射電鏡結(jié)果示該方法制備的納米材料尺寸小于5nm,紫外-可見吸收光譜分析和付利葉轉(zhuǎn)變紅外光譜法的結(jié)果表明兩種物質(zhì)反應(yīng)并形成酰胺鍵,熒光測試的結(jié)果表明該納米材料熒光較強(qiáng)、具備熒光標(biāo)記的功能,在紫外光下能夠發(fā)出藍(lán)色熒光。但FA/PEI CDs不具備對腫瘤細(xì)胞的靶向性,主要與納米材料的粒徑大小以及葉酸與細(xì)胞表面葉酸受體的結(jié)合有關(guān)。FA/PEI CDs是一種優(yōu)良的基因載體,并且具有良好的生物相容性。2.進(jìn)一步改進(jìn)材料的制備方法得到PEI PDs-FA,對其進(jìn)行上述性能的表征:透射電鏡結(jié)果顯示該方法制備的納米材料大小介于10-40nm之間,紫外-可見吸收光譜分析結(jié)果表明PEI PDs-FA具有與PEI相似的特征峰且與FA連接,熒光測試的結(jié)果表明該納米材料在藍(lán)色激發(fā)光下能夠發(fā)出綠色熒光。PEI PDs-FA具有對腫瘤細(xì)胞的靶向性,并且作為基因載體優(yōu)于傳統(tǒng)的基因載體PEI,具有良好的生物相容性。結(jié)論:FA/PEI CDs的熒光性質(zhì)和載基因能力優(yōu)于PEI PDs-FA;FA/PEI CDs不具有靶向腫瘤細(xì)胞的能力,PEI PDs-FA具有靶向性;兩種碳納米材料均具有良好的生物相容性。
【關(guān)鍵詞】：碳納米材料 熒光 靶向 腫瘤 基因載體 聚乙烯亞胺 葉酸
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R73-36
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-8
• 英文縮略詞8-12
• 第1章 引言12-13
• 第2章 文獻(xiàn)綜述13-17
• 2.1 納米材料作為基因載體13-14
• 2.2 熒光納米材料在腫瘤診治中的應(yīng)用14-15
• 2.3 納米材料在腫瘤靶向治療中的應(yīng)用15-17
• 第3章 FA/PEI CDs的制備及表征17-31
• 3.1 材料和方法17-22
• 3.1.1 主要原料和試劑17-18
• 3.1.2 主要儀器設(shè)備18
• 3.1.3 FA/PEI CDs的制備18
• 3.1.4 FA/PEI CDs的物理化學(xué)性能表征18-19
• 3.1.5 FA/PEI CDs的生物學(xué)表征19-22
• 3.1.5.1 KB、HaCaT細(xì)胞培養(yǎng)19
• 3.1.5.2 FA/PEI CDs的靶向性19-20
• 3.1.5.3 FA/PEI CDs基因載體20-22
• 3.2 結(jié)果22-28
• 3.2.1 FA/PEI CDs的物理化學(xué)表征22-25
• 3.2.1.1 透射電子顯微鏡觀察22-23
• 3.2.1.2 紫外-可見吸收光譜分析23
• 3.2.1.3 付利葉轉(zhuǎn)變紅外光譜法23-24
• 3.2.1.4 熒光測試24-25
• 3.2.1.5 MTT測定材料的生物相容性25
• 3.2.2 FA/PEI CDs的生物學(xué)表征25-28
• 3.2.2.1 FA/PEI CDs的靶向性檢測25-26
• 3.2.2.2 瓊脂糖凝膠阻滯實驗26-27
• 3.2.2.3 細(xì)胞攝取影響因素實驗27-28
• 3.2.2.4 Real-Time PCR檢測miR34a的表達(dá)28
• 3.3 討論28-31
• 第4章 PEI PDs-FA的制備及表征31-40
• 4.1 材料和方法31-32
• 4.1.1 主要原料和試劑31
• 4.1.2 主要儀器設(shè)備31
• 4.1.3 PEI PDs-FA的制備31
• 4.1.4 PEI PDs-FA的物理化學(xué)表征31
• 4.1.5 PEI PDs-FA的生物學(xué)表征31-32
• 4.1.5.1 KB、HaCaT細(xì)胞培養(yǎng)31
• 4.1.5.2 PEI PDs-FA的靶向性31-32
• 4.1.5.3 PEI PDs-FA基因載體32
• 4.2 結(jié)果32-38
• 4.2.1 PEI PDs-FA的物理化學(xué)表征32-35
• 4.2.1.1 透射電子顯微鏡觀察32-33
• 4.2.1.2 紫外-可見吸收光譜分析33
• 4.2.1.3 熒光測試33-34
• 4.2.1.4 MTT測定材料的生物相容性34-35
• 4.2.2 PEI PDs-FA的生物學(xué)表征35-38
• 4.2.2.1 PEI PDs-FA的靶向性檢測35-36
• 4.2.2.2 瓊脂糖凝膠阻滯實驗36-37
• 4.2.2.3 Real-Time PCR檢測miR-34a的表達(dá)37-38
• 4.3 討論38-40
• 第5章 結(jié)論40-41
• 參考文獻(xiàn)41-45
• 作者簡介及在學(xué)期間取得的科研成果45-46
• 致謝46

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10 陳，

本文編號：541846